Es wurde 1573 als Santa Fe de Vera Cruz im nahe gelegenen Cayastá von Juan de Garay, Vizegouverneur von Asunción, Paraguay, gegründet. Es wurde 1651 an seinen heutigen Standort verlegt und als unterstützender Flusshafen für die spanische Siedlung Asunción, 615 Meilen (990 km) nördlich am Fluss Paraguay, entwickelt. Während der Kolonialzeit war es ein Missionszentrum der Jesuiten, deren Kirche in der Stadt aus dem Jahr 1660 stammt. Bis zur Mitte des 19.Jahrhunderts markierte es die nördliche Grenze der provinziellen Expansion und diente als strategischer Außenposten gegen die Indianer der Region Gran Chaco. Ein Kongress, der sich dort 1853 traf, brachte die Verfassung hervor, die die Argentinische Republik gründete.Die Wirtschaft von Santa Fe ist diversifiziert und umfasst Getreidemühlen, Molkereien, Anlagen zur Verarbeitung von Waldprodukten, Mineralhütten und Automobilhersteller. Der für Hochseeschiffe modernisierte Hafen ist einer der Binnenhäfen der Welt (etwa 250 Meilen von der Mündung des Río de la Plata entfernt) und wickelt den Handel mit Bolivien und Paraguay sowie Argentinien ab. Santa Fe hat drei National Historic Monuments – die San Francisco Church and Convent (1680), die La Merced Church (1660-1754) und die Santa Fe Cathedral (1685). Die Nationale Universität der Litoral (1919) befindet sich dort. Pop. (2001) 368.668; (2010 est.) 395,500.