Escherichia coli O157:H7 stress-en virulentie-genexpressie op romeinse sla met behulp van vergelijkende real-time PCR
door voedsel overgedragen uitbraken toegeschreven aan de besmetting van verse producten met Escherichia coli O157:H7 zijn een groeiend probleem. Met name bladgroenten, waaronder sla en spinazie, zijn vatbaar voor verontreiniging door irrigatiewater, mest en voedselverwerking en-opslag. De overleving van E. coli O157:H7 en natuurlijke microflora op Romaine sla opgeslagen op 4 graden C en 15 graden C gedurende een periode van 9 dagen werd geëvalueerd door plaat tellingen. Een twee-staps reverse-transcriptie vergelijkende kwantitatieve real-time PCR-test werd gebruikt om expressie van genen te evalueren die coderen voor de A subeenheid van Shiga-toxine 1 en 2 (stx1A en stx2A), intimin (eaeA), flagellin (fliC), sigmaS–general stress sigma factor (rpoS) en ijzer superoxide dismutase (sodB) in E. coli O157:H7. De resultaten wijzen erop dat de opslagtemperatuur aanzienlijk wordt verlaagd van 15 graden C naar 4 graden C (P<0.05) verminderde de groei van Escherichia coli O157:H7 op romeinse sla, echter, levensvatbare populaties bleven na het einde van beide opslagperioden. Aan het einde van de opslagperiode werd een 0,430 en 0,180 log afname van E. coli O157:H7 waargenomen bij respectievelijk 4 graden C en 15 graden C. Bij beide opslagtemperaturen nam het totaal aantal aërobe platen toe gedurende de duur van het experiment. Een toename van E. coli O157:H7 vouwexpressie werd waargenomen met stx2A. Hoewel stx1A upregulation voor alle opslagvoorwaarden tentoonstelde, werd de veranderlijke genuitdrukking waargenomen gedurende de opslagperiode. Bovendien was fliC up-gereguleerd tijdens opslag bij 15 graden C, terwijl de transcriptie bij 4 graden C opslag slechts lichtjes veranderde. De expressie van eaeA was variabel bij 15 graden C met een tendens naar down-Regulatie, echter, dit gen was lichtjes up-regulated wanneer opgeslagen bij 4 graden C. Een lichte upregulatie van RPO ‘ s en sodB werd ook waargenomen bij 4 graden C. concluderend, onze resultaten suggereren E. coli O157:H7 kan virulenter worden bij langdurige opslag van Romeinse sla, in het bijzonder wanneer opgeslagen bij gekoelde temperaturen.