Articles

Escherichia coli O157:H7 stressi ja virulenssi-geenin ilmentyminen Romaine-lehtisalaatissa käyttäen vertailevaa reaaliaikaista PCR

elintarvikkeiden välityksellä leviävät taudinpurkaukset, joiden katsotaan johtuvan Escherichia coli O157: H7-bakteerin aiheuttamasta tuoreiden tuotteiden saastumisesta. Erityisesti lehtivihreät vihannekset, kuten salaatti ja pinaatti, ovat alttiita kasteluveden, lannan sekä elintarvikkeiden jalostus-ja varastointikäytäntöjen aiheuttamalle saastumiselle. E. coli O157: n eloonjääminen:H7 ja luontainen mikrobisto Romaine-salaatissa, jota säilytettiin 4 asteessa ja 15 asteessa 9 päivän aikana, arvioitiin lautasmäärien perusteella. Kaksivaiheista käänteiskopioivaa kvantitatiivista reaaliaikaista PCR-määritystä käytettiin Shiga-toksiinin 1 ja 2 (stx1A ja stx2A), intimin (eaeA), flagelliinin (fliC), sigmas–general stress sigma factor (rpos) ja rautasuperoksididismutaasin (sodb) a-alayksikköä koodaavien geenien ilmentymisen arvioimiseksi E. coli O157:H7: ssä. Tulokset osoittavat, että varastointilämpötilan alentaminen 15 asteesta 4 asteeseen merkitsevästi (P<0.05) vähensi Escherichia coli O157:H7: n kasvua Romainesalaatissa, mutta elinkelpoisia populaatioita säilyi molempien varastointijaksojen päätyttyä. Säilytysajan lopussa havaittiin E. coli O157:H7: n 0, 430 log-lasku 4 asteessa ja 15 asteessa 0, 180 log-lasku. Molemmissa säilytyslämpötiloissa aerobisten levyjen kokonaismäärä kasvoi kokeen aikana. E. coli O157: H7-kertaistuminen havaittiin stx2A: n käytön yhteydessä. Vaikka stx1A: ssa esiintyi kaikkien säilytysolosuhteiden säätelyä, vaihtelevia geeniekspressioita havaittiin koko säilytysajan. Lisäksi Flic säädeltiin ylös varastoinnin aikana 15 astetta C, kun taas transkriptio 4 astetta C varastointi muuttui vain hieman. EaeA: n ilmentyminen oli vaihtelevaa 15 asteessa C ja taipumusta alaspäin säätelyyn, mutta tämä geeni oli hieman yläsäätelyssä, kun sitä varastoitiin 4 asteessa C. rpos: n ja sodB: n pientä säätelyä havaittiin myös 4 asteessa C. lopuksi tuloksemme viittaavat E. coli O157: ään:H7 voi muuttua virulentimmaksi Romainesalaatin pitkäaikaisessa säilytyksessä, erityisesti jäähdytetyssä lämpötilassa säilytettynä.