olemme käyttäneet HIV-virobiomia, erityisesti kirjekuoriproteiini gp120: tä, tunnistaaksemme erittäin voimakkaita reseptoriaktiivisia peptidejä, jotka toimivat useiden kemokiinireseptorien funktionaalisina antagonisteina. Tämä saatiin aikaan etsimällä gp120-sekvenssistä pieniä paikallisia homologioita tunnetuille signalointipeptideille, kuten VIP/PACAP/GHRH-perheen neuropeptideille .

tunnistimme huomaamattoman oktapeptididomeenin (peptidi T-alueen) gp120: n v2-varren lähellä ja näistä sekvensseistä johdetut peptidit, jotka ensisijaisesti estävät R5-hakuisten HIV-isolaattien infektion . Alustavissa tutkimuksissamme käytettiin varhaisen vaiheen potilaan isolaattia, jolla on myöhemmin osoitettu olevan R5 / X4 (dual-tropic) – reseptorin fenotyyppi, vaikka mikään kemokiinireseptoreista tai kemokiinireseptorin käytön merkitys ei ollut tiedossa tämän työn aikaan (noin 1985). Vallitseva antiviraalinen vaikutus R5 vs X4 HIV-isolaateilla selittää varhaisen kiistelyn, joka liittyi antiviraalisten vaikutusten puuttumiseen X4 lab-adaptoiduilla isolaateilla .

vaikka peptidi T oli ensimmäinen HIV: n reseptoreihin kohdennettu anti-virus (tätä luokkaa alettiin kutsua ”maahantulon estäjiksi”), AIDS-epidemian laajetessa 1980-luvun puolivälissä kävi ilmi, että virus ei monistunut hermosoluissa, vaikka se vakiinnutti infektion keskushermostossa. Siitä huolimatta ilmoitettiin syvistä kognitiivisista ja motorisista vajauksista, mikä lisäsi tuohon aikaan levinnyttä suurta häpeää ja kärsimystä. Alustavissa raporteissamme huomasimme gp120: n aivokuorijakauman sitoutuvan kädellisten aivojen reseptoreihin ja oletimme, että gp120: n tappaminen herkillä neuroneilla selittäisi havaitut potilaan kognitiiviset vajeet. Ehdotimme, että peptidi T estämällä gp120: n sitoutumisen , jonka myöhemmin osoitettiin olevan CCR5: ssä , estäisi tehokkaasti hermokatoa HIV-infektiossa, jonka tiedetään nyt tapahtuvan hyvin varhain infektion jälkeen.

hyödyt neuroinflammaatiossa ja neurodegeneraatiossa

alustavat tutkimukset, joissa peptidi T ja sen hajoamiselle resistentti analoginen d-ala1-peptidi T-amidi (DAPTA) suojasivat gp120: n neurotoksisilta vaikutuksilta hermoviljelmissä, osittain vapauttamalla suojaavia kemokiineja . Daptan neurosuojavaikutukset osoitettiin myös gp120-hoitoa saaneilla eläimillä, joissa synapsien ja dendriittisten oksien häviäminen sekä käyttäytymisen viivästyminen kumoutuivat . Gp120: n neurotoksisten vaikutusten osoitettiinkin aiheuttavan aivokuoren hermokatoa ja dendriittisiä patologioita neuro-aidsissa. Gp120-neurotoksisuuden mekanismit paljastuivat vähitellen meille ja muille epäsuoriksi, ja liittyvät mikroglian aktivointiin gp120: llä, vaikutuksiin, jotka dapta estää . Aktivoidut mikroglia ja astrosyytit ovat nyt hyvin arvostettuja välittäjinä erilaisissa neuropatologioissa, joita peptidi-t-analogit voivat hoitaa.

vaikka näiden peptidien Anti-virusvaikutus oli ensimmäinen tutkimuskohde, vähitellen kävi selväksi, että peptidi T: n peptidiperheellä oli HIV: n lisäksi hyödyllisiä immuunivastetta sääteleviä ja hermosoluja säästäviä vaikutuksia, joita voitaisiin käyttää terapeuttisesti, erityisesti neurodegeneratiivisissa olosuhteissa, joissa on tulehduksellinen patogeneesi. DAPTA alensi M1-sytokiineja IL-1, Il-6, IL-8, IL-23, TNFa ja paranneltuja M2-sytokiineja kuten IL-4 ja IL-10 . Joitakin esimerkkejä mahdollisista dapta-hoidon hyödyistä ovat Alzheimerin tauti , eri alkuperää olevat neuropatiat , syöpäkipu, eksitotoksisuus ja aivohalvaus/aivoiskemia . Kliinistä hyötyä on osoitettu neuro-aidsille (alla), kasvuhormonin suppressiolle, joka on syynä lasten HIV: n kehitysviiveisiin , jotka dapta on palauttanut, sekä muille kuin HIV: hen liittyville ihosairauksille, kuten psoriaasille .

kliinisten tutkimusten tulokset neuro-aidsilla

peptidi T, tai oikeammin dapta, tuli ihmisillä tehtyihin neuro-AIDS-päätetapahtumien kliinisiin tutkimuksiin vuonna 1986. Myöhemmin raportoitiin aivojen magneettikuvausten ja kognitiivisten testien paranemisesta . Kognitiiviset hyödyt neuro-aidsin hoidossa vahvistettiin kontrolloiduissa lisätesteissä, jotka osoittivat merkitsevän ryhmän (aktiivinen vs. lumelääke, p=.003)ja aika (p=.001) vaikutukset , ilman toksisuutta. Kolmipaikkainen dbpc-tutkimus tehtiin 1990-luvun alussa 215 satunnaistetulla dapta-nenäsumutteen (2 mgs, TID) koehenkilöllä. päätetapahtuma oli muutos globaalissa kognitiivisessa pisteytyksessä 6 kuukauden kohdalla 23 testin paristolla. Vaikka daptan ja plaseboryhmän välillä ei havaittu merkittävää eroa globaalissa kognitiivisessa pisteytyksessä, 2 7: stä verkkotunnuksesta, työmuisti (p.04) ja tiedonkäsittelyn nopeus (p=.008), osoitti edistystä DAPTA-ryhmässä. Hoitovaikutusta raportoitiin myös potilailla, joiden CD4-solumäärä oli lähtötilanteessa yli 200 solua/µL (ei AIDS).

kaiken kaikkiaan tämä kohortti oli minimaalisesti kognitiivinen heikentynyt (MMSE=28). Kuitenkin niillä, joilla on suurempi ja kliinisesti merkittävä kognitiivinen vaje >0.5 maailmanlaajuisessa Z-score-tutkimuksessa ennalta suunniteltu alaryhmäanalyysi osoitti, että dapta liittyi suorituskyvyn paranemiseen, kun taas huononeminen oli yleisempää plaseboryhmässä (P=.02) . Vaikka virusmittaukset eivät olleet ensisijainen päätetapahtuma tässä tutkimuksessa, tiedot raportoitiin ja osoittivat, että DAPTA vähensi viruskuormaa (- 0, 54 log, p<.03) . Tässä tutkimuksessa havaittu anti-virus vaikutus on merkittävä, koska potilaat eivät olleet mukana perustuu viruskuorma, ei ollut annoksen optimointi anti-virus vaikutus, niiden R5 tai X4 virus fenotyyppejä, jotka määrittäisivät herkkyys anti-virus vaikutus oli tuntematon, ja koska tutkimus tehtiin pre-HAART aikakausi, dapta oli lähinnä testattu monoterapiana.

sairaalavaiheen 2 tutkimus daptasta 15-tai 1-vuotiaana.5 mg/vrk 4 viikon ajan yhdeksällä varhaisen aidsin dementiaa sairastavalla suonensisäisesti käyttävällä huumeidenkäyttäjällä neurokognitiivisuus parani suuremmalla annoksella verrattuna pienempään annokseen tai lumelääkkeeseen (p<.05) . Lisätutkimuksessa, hyödyt toiminnallisen aivojen kuvantaminen raportoitiin 39-vuotias mies AIDS Dementia Complex, joka sai 12 viikkoa intranasaalinen DAPTA (0.4 mg kolme kertaa vuorokaudessa, 1.2 mg päivässä). Tämä tutkimus osoitti, että 34: llä niistä 35 aivoalueesta , joilla oli alhainen FDG-aktiivisuus, todettiin remissio hoidon jälkeen, mikä oli yhdenmukaista vaiheen 1 ja 2 tutkimuksissa Havaittujen magneettikuvausten ja kognitiivisten hyötyjen kanssa. (op.cit., yllä).

oraalisesti aktiiviset peptidit

vaikka dapta on oleellisesti suojassa hajoamiselta plasmassa, se pilkkoutuu nopeasti mahalaukussa . Lisäksi sen kliinisessä käytössä on käytetty ensisijaisesti nenäsumutetta, joka vaatii nestemäisen lääkeaineen pitkäaikaista säilytystä. Daptan on osoitettu menettävän aktiivisuuttaan aggregoimalla tallennuksen yhteydessä. Lääkeaineen aggregointi oli huolenaihe DBPC-tutkimuksessa, koska varastoitua valmistetta käytettiin useita vuosia tutkimuksen loppuun saattamiseen ja tutkimuslääkkeen geelöinti oli potilaiden ilmoittama. Tämä on rajoittanut daptan kliinistä kehitystä. Tämän merkittävän esteen voittamiseksi loimme daptan analogin (RAP-103), joka on täysin suojattu hajoamiselle ja säilyttää picomolar-tehon.

rotilla tehty proof-of-concept-tutkimus osoitti, että rap-103: n oraalinen annostelu (0.05-1mg / kg) 7 päivän ajan estää täysin mekaanisen allodynian ja estää lämpöylalgesian kehittymisen iskiashermon osittaisen ligaation jälkeen rotilla . Tässä tutkimuksessa osoitimme edelleen, että DAPTA ja RAP-103 estivät sekä CCR2: n että siihen läheisesti liittyvän kemokiinireseptorin CCR5: n. Lisäksi RAP-103 voi vähentää selkärangan mikrogliaalista aktivaatiota ja monosyyttien infiltraatiota ja estää perifeerisen hermovaurion, neuropaattisen kivun aiheuttajan, aikaansaamaa tulehduksellista sytokiinivastetta.

tutkimustuloksemme viittaavat siihen, että ccr2/CCR5: n kohdentamisen pitäisi tarjota suurempi teho kuin pelkän CCR2: n tai CCR5: n kohdentamisen, ja että ccr2 / CCR5: n kaksoisagonistilla RAP-103 on potentiaalia kliiniseen käyttöön neuropaattisissa ja muissa kiputiloissa. Koska tämä analoginen jakaa useita dapta-mekanismeja mikrogliaalisen aktivaation vähentämiseksi, sytokiinitasapainon siirtämiseksi, neuronien suojaamiseksi ja vara-Dendritic Arborin suojaamiseksi, se on ensisijainen ehdokas kliiniselle kehitykselle useissa neuroinflammatorisissa olosuhteissa, joista on jo keskusteltu ja joista on hyötyä prekliinisissä eläinkoemalleissa, kuten tämän katsauksen monissa lainauksissa todetaan.