Articles

rintaevien muokkaus tapahtuu mutasiipisen (Periophthalmus modestus) toukasta nuoreen siirtymisen aikana

by admin

aikuisten evien luurangot

tarkastelimme ensin aikuisten kalojen rintalihasten rakennetta. Rintavyö yhdistää rintaevät aksiaaliseen luurankoon. Se koostuu Post-temporaalisesta (post. t.), supracleithrum (sup. cl.), kleithrum (cl) ja coracoid (co) (kuva. 1c). Vyö tukee neljää proksimaalista sädettä (pr1-pr4) (Kuva. 1c). Neljätoista distaalista radiaalia sijaitsevat distaalisina proksimaalisiin radiaaleihin (Kuva. 1d), ja 14 eksoskeletaalista eväsrauskua on linjassa rintaevän distaalisessa osassa (pec. fr. 1-14) (Kuva. 1c).

kleithrum, rintavyön pääosa, on rintaevän tyvessä sijaitseva dorsoventraalisesti pitkänomainen luu (viikuna. 1c). Kleithrum muuttuu keskeltä leveämmäksi,jolloin sitä kutsutaan Kleithrum-levyksi (Kleithrum-levy Kuvassa. 1c), kuten Ps. barbarus, Pn. schlosseri ja Ps. argentilineatus . Kummankin kahdenvälisen kleitran ventraalinen reuna sijaitsee kiduksen takana, ja niiden pinnat ovat vastakkain keskiviivalla (Kuva. 1 e). Korakoidin vieressä olevan kleithrumin ventraalinen osa yhdistyy lantioluuhun (PVB viikuna. 1C, e), ja lantion kupolit (pvd) reunalla kunkin lantion luun sulake keskiviivan (Kuva. 1 e). Kleithrumin selkäosa yhtyy takaraivoon ohimolohkon ja suprakleithrumin kautta (viikuna. 1). Teriö sijaitsee ventraalisesti kleithrum-laatan (Kuva. 1c)ja osittain artikuloi neljännen proksimaalisen säteittäisen kanssa (nuolenkärjet viikuna. 1g), kuten Ps. barbarus .

jokainen proksimaalinen säteittäissäde menee osittain päällekkäin ja näyttää suurelta yksittäiseltä levyltä (Kuvassa pr1–pr4. 1c), mutta pienet tilat tunnistetaan toisen ja kolmannen, sekä kolmannen ja neljännen, proksimaalisten säteiden välillä (nuolenkärjet kuviossa. 1c). Ensimmäinen proksimaalinen säteinen (pr1) on pitkä, ohut luu. Neljäs proksimaalinen radiaali (pr4) on lyhin alkuaine neljän proksimaalisen radiaalin joukossa (Fig. 1c), kuten Ps. barbarus . Ensimmäisestä kahdeksanteen eväsrauskut ovat segmentoituneita pehmeitä säteitä, kun taas yhdeksännestä neljänteen eväsrauskut ovat bifurkoituja luisia säteitä(Kuva. 1c).

rintaevien kehitys ja muut kehitysominaisuudet

tutkia, milloin ja miten mudankoipi Ps: n rintaevät kehittyvät. modestus tulee pitkänomainen ja työntyvät kehon seinään, havaitsimme kehitysprosessin rintaevien. Vaikka Ps. modestus-kehitys on kuvattu keinolannoituksella saaduille alkioille ja toukille , tarkempia kuvauksia tarvitaan kehitysprosessin täsmälliseen ymmärtämiseen. Siksi havaitsimme myös alkioiden kehitysominaisuudet laboratorioon saavuttaessa, jotka olivat otic-vesikkelivaiheessa (Lisätiedosto 1: kuva S1A-C), vaiheessa, joka vastaa Kuvassa 1l kuvattua 39 – 46-h hedelmöityksen jälkeistä vaihetta (hpf). (1972). Kunkin vaiheen kehitysvaiheet ja kulunut aika on koottu lisätiedostoon 2: taulukko S1.

Alkiovaiheet (Kuva. 2; Kuva. 3)

Otic vesicle stage (Lisätiedosto 1: Figure S1A-C; ”39-46 hpf-stage, Figure 1l in Kobayashi et al., 1972”)

tässä vaiheessa alkion häntä irtoaa keltuaisesta (Lisätiedosto 1: kuva S1A). Otic placodes ontto ja muodostavat otic rakkulat (ov), ja optic primordia kanssa lens placodes (LP) havaitaan myös (Lisätiedosto 1: kuva S1B). Hännän distaalipäässä on mesenkymaalisoluja (Mc) (Lisätiedosto 1: kuva S1C). Sydän (h) on näkyvissä (Lisätiedosto 1: kuva S1B), mutta ei lyö.

aivorakkulavaihe (Lisätiedosto 1: kuva S1D-F)

sydän alkaa sykkiä tässä vaiheessa (Lisätiedosto 1: kuva S1D). Pyrstö venyy (Lisätiedosto 1: kuva S1D). Aivojen rakkulat, kuten etuaivojen telencephalon (t) ja diencephalon (d), keskiaivojen (m) ja takaraivojen rhombomeerit (r), ovat näkyvissä (Lisätiedosto 1: kuva S1E). Ksantoforeja esiintyy päässä ja takaruumiin häntäosassa (avoimet nuolenkärjet lisätiedostossa 1: kuva S1E, F). Kussakin Otic-rakkulassa tunnistetaan kaksi otoliittia (Lisätiedosto 1: kuva S1E’). Melanoforit näkyvät sivusuunnassa rungossa ja hännässä (nuolenkärjet lisätiedostossa 1: kuva S1F). Peräaukko muodostuu suolen takaosaan (musta nuoli lisätiedostossa 1: kuva S1F).

Sydänkammiovaihe (Lisätiedosto 1: kuva S1G-I)

sydänputki jaetaan eteiseen (at) ja kammioon (Lisätiedosto 1: kuva S1H). Mesenkymaaliset solut hännän distaalisessa päässä ovat hävinneet tässä vaiheessa (Lisätiedosto 1: kuva S1i). Ksantoforit leviävät päähän ja rungon ventraalireunoille ja selkäreunoille (lisätiedosto 1: kuva S1G’).

Levikkivaihe (Lisätiedosto 1: Kuva S1J-K)

verisoluja havaitaan ensimmäisen kerran tässä vaiheessa (Mustat nuolenkärjet lisätiedostossa 1: kuva S1K). Sydämen veri kiertää koko kehossa ja kerätään yhteisen kardinaalilaskimon kautta (ccv Lisätiedostossa 1: kuva S1K).

silmien pigmenttivaihe (Kuva. 3a; Lisätiedosto 1: kuva S1L-M)

tässä vaiheessa melanoforeja on havaittavissa vain optisten vesikkelien takareunassa (nuolenkärjet lisätiedostossa 1: kuva S1M). Joitakin ksantoforeja nähdään myös optisissa vesikkeleissä (avaa nuolenkärjet lisätiedostossa 1: kuva S1M). Alkion poikkileikkaukset oletetulla evän nupputasolla osoittavat somatopleuren paksuuntumista, joka koostuu kahdesta tai kolmesta mesenkyymisolukerroksesta (Kuva. 3 A). Päällä oleva ektodermi muodostaa yksisoluisen kerrostuneen apikaalisen ektodermin paksuuntuman (viikuna. 3 A).

Fig. 2
kuvio2

mudskipperin alkioiden rintaevänvarren kehitys ennen kuoriutumisvaihetta. Mudskipper-alkioiden (a, c, e, g) ventrolateraalinen viisto näkymä ja kylkinäkymä rintaevien silmuista (b, d, f, h) low-pec-vaiheessa (a, b; n = 1), middle-pec-vaiheessa (c, d; n = 1), high-pec-vaiheessa (e, f; n = 1) ja long-pec-vaiheessa (g, h; n = 1). Nuolenkärjet kohdassa (a) viittaavat melanoforeihin. Selkäeväsilmujen selkäpuoli keskimmäisessä eväkertausvaiheessa (i; n = 1) ja pitkässä eväkertausvaiheessa (j; n = 1). at, apical paksuuntuminen; af, apical fin taita; op, optinen rakkula; pec, rintaevä. Asteikkotangot, 100 µm (A, c, e, g); 50 µm in (b, d, f, h, i, j)

Low-pec-vaihe (kuva. 2a, b)

tässä vaiheessa rintaevät orastavat keltuaisen pinnalla (viikuna. 2a), ja apical ektodermal paksuuntuminen on läsnä kärjessä rintaevä nuppu (Kuva. 2b). Melanoforeja esiintyy nykyään sekä optisten rakkuloiden etu-että takareunoissa (nuolenkärjet Viikunassa. 2 a).

Fig. 3
figure3

Hematoksyliini-eosiinivärjäys rintaperän silmuissa ja varhaisissa toukkaevissä. Hematoksyliinilla ja eosiinilla (a, b, c, e) värjättyjen rintaperäisten eväsilmujen ja varhaisten toukkien poikkileikkaukset sekä suurennetut kuvat (d, f) silmän pigmenttivaiheessa (a; n = 1), Keski-pec-vaiheessa (b; n = 1), pitkä-pec-vaiheessa (c, d; n = 1) ja pitkässä eväkertoimessa (e, f; n = 1). at, apical thickening; af, apical fin fold; cc, kondrogeeninen kondensaatio; DMM, dorsal muscle mass; ed., endoskeletaalinen levy; vmm, ventraalinen lihasmassa; pec, rintaevä. Asteikkotangot, 10 µm

Keski-pec-vaihe (kuva. 2C-d; kuva. 3b; lisätiedosto 1: kuva S1N-O)

rintaperän Silmun korkeus on noin puolet sen leveydestä (Kuva. 2c, d). Pigmentti on havaittavissa koko silmässä (Lisätiedosto 1: kuva S1n). Uimalukko (sb) alkaa täyttyä (Lisätiedosto 1: kuva S1O). Pectoral fin nuppu poikkileikkaus osoittaa muutoksen apical ektodermal paksuuntuminen kahteen soluun kerroksittain apical fin taita (Kuva. 3b). Kondrogeeninen tiivistyminen tulee näkyviin keskellä evän nuppu (Kuva. 3b).

High-pec-vaihe (kuva. 2e-f; lisätiedosto 1: kuva S1P, Q)

tässä vaiheessa rintaevän nuppu kaartuu posteriorisesti ja kapenee (Kuva. 2 e, f). Apikaalisen ektodermin paksuuntuminen muuttuu apikaaliseksi eväpoimuksi(Af viikuna. 2). Silmän pigmentti on hyvin tiheä (Kuva. 2 e). Sydämen putken kierto on havaittavissa (Lisätiedosto 1: kuva S1Q).

Long-pec-vaihe (kuva. 2g, h; kuva. 3c, d)

tässä vaiheessa rintaevän nuppu venyy ruumiin akselin suuntaisesti (Kuva. 2g, h), mikä viittaa sen kiertoon. Rintaevän Silmun poikkileikkauksessa (Kuva. 3c), apical fin kertainen venyy, ja kondrogeeniset solut (cc) yhdenmukaistaa pitkin proksimaali-distaalinen akseli ja jakaa rintalihasten osaksi dorsal ja ventral lihasmassat (DMM ja VMM, vastaavasti) sisällä pektoraali fin silmut (Kuva. 3d).

Keskievä-taittuva vaihe (kuva. 2i)

rintaevän nuppu ja apikaalinen eväpoimu venyvät vielä tässä vaiheessa. Apikaalisen eväkertun pituus muodostaa nyt kaksi viidesosaa Silmun kokonaispituudesta (Kuva. 2).

pitkä fin-taittuva vaihe (kuva. 2j; Kuva. 3e, f; Lisätiedosto 1: kuva S1R-T)

apikaalisen eväkertun pituus muodostaa nyt kolme viidesosaa Silmun kokonaispituudesta (Kuva. 2j). Suu avautuu (Lisätiedosto 1: kuva S1S), ja otic-vesikkelit kehittävät ominaisen käänteisen sydämen muotonsa (Lisätiedosto 1: kuva S1S, S’). Sekä selkäevän mediaani että ventraalinen mediaani eväkertainen alkavat kaventua kaudaalialueella (nuolet Lisätiedostossa 1: kuva S1t). Vuonna poikkileikkaus pectoral fin bud, kuutiomainen kondrogeenisten solujen nähdään yhdenmukaistaa muodostavat yksisoluinen kerroksellinen endoskeletal levy keskellä pectoral fin bud (Kuva. 3 e, f).

Kuoriutumisvaihe (Lisätiedosto 1: kuva S1U-V)

yläleuka (uj) työntyy nyt samalla tasolla kuin alaleuka (Lisätiedosto 1: kuva S1V).

Planktoniset toukkavaiheet (Kuva. 4; Kuva. 5; Kuva. 6)

3, 0–4, 3 mm TL (Kuva. 4a; Kuva. 5A-c; Lisätiedosto 3: kuva S2A)

keinotekoisesti kuoriutuneiden toukkien koko vaihteli välillä 3, 0-4, 3 mm TL (Lisätiedosto 3: Kuva S2A). Toukalla on tässä vaiheessa pyöreä pää, jatkuva eväkertymä ja keltuaispussi (lisätiedosto 3: kuva S2A). Endoskeletaalinen levy (ed) ja apical fin fold (af) sijaitsevat proksimaalinen ja distaalinen alueilla rintaevän bud, vastaavasti (Kuva. 4 A). Rintaevän endoskeletaalisen kiekon keskellä on ohut matriisihajoamisen vyöhyke (MDZ) (Kuva. 5 a). Endoskeletaalisen levyn proksimaalisessa osassa solut ovat pyöristyneempiä, ja pieniä määriä jakautuvia soluja on havaittavissa (Kuva. 5b). Endoskelaalisen kiekon distaalisessa osassa lieriömäiset solut ovat linjassa proksimaali-distaalisen akselin suuntaisesti (Kuva. 5c). Proximal endoskeletal levy, on chondrified vyön primordia, joka koostuu cleithrum (cl), scapulocoracoid (sco), postcoracoid prosessi (pop), ja precoracoid prosessi (prp) (Kuva. 5 a). Vyön luuston osat muodostuvat kehon seinämän sisälle. Kleithrum kehittyy ohuena elementtinä (Kuva. 5 a). Skapulokorakoidi näkyy kleithrumin ja endoskeletaalisen kiekon välissä (Kuva. 5 a). Precoracoid prosessi kasvaa anteriorly, ja postcoracoid prosessi kasvaa posteriorly (Kuva. 5 a).

Fig. 4
figure4

mudankiipijän toukkien ja nuorten yksilöiden rintaevien kehitys. Planktonisten toukkien selkä–(A–d), ventraalinen (e, i) ja sivusuuntainen (F–h) näkymä TL: n 4,0–14,5 mm: n vaiheissa (A–f; n = 1 kussakin vaiheessa) ja pohjanäkymä amfibiopoikasille TL: n 18,6–19,2 mm: n vaiheissa (g-i; n = 1 kussakin vaiheessa). B, c-kirjaimen nuolet osoittavat endoskeletaalisen kiekon ja eväkertun välisen rajan. Nuolenkärjet kohdissa (e, f) viittaavat eväsäteisiin. Af, apical fin fold; ed, endoskeletal levy; fr, fin ray; ope, operculum; pel, lantion evä. Asteikkotangot, 100 µm A-e: ssä; 500 µm f–i: ssä

Fig. 5
figure5

toukkien rintaevien luurangot. Planktonisten toukkien rintaevien lateraaliset (A–d, f–h, k–m) ja ventraaliset näköalat (e, i, j) 3,0–13.6 mm TL värjätty alkian sinisellä ja alitsariininpunaisella (N = 1 kussakin vaiheessa). b, c, g, h, l, m suurennetut näkymät ilmoitetuista kuvista. Nuolenkärjet kohdissa (b, c, g, h, l, m) osoittavat ohutta matriisia septa jakautuvissa soluissa. cl, cleithrum; toim., endoskeletal levy; ff, fin fold; mdz, zone matriisin hajoaminen; pop, postcoracoid prosessi; prp, precoracoid prosessi; pel, lantion luun primordium; sco, scapulocoracoid. Asteikko, 100 µm in (d, e, i, j); 50 µm in (a, f, k); 10 µm in (b, c, g, h, l, m)

5,6 mm TL (Kuva. 4b; Lisätiedosto 3: Kuva S2B)

alaleuka työntyy yläleuan ulkopuolelle (Lisätiedosto 3: kuva S2B). Keltuainen imeytyy kokonaan (lisätiedosto 3: kuva S2B). Rintaevän nuppu venyy edelleen (Kuva. 4b). Endoskelaalisen levyn muodossa ei ole dramaattisia muutoksia (Kuva. 4b). Apikaalinen eväpoimu koskettaa endoskeletaalisen levyn proksimaalista päätä ja sijaitsee lähellä kehon seinämää (nuoli Kuvassa. 4b).

6,2 mm TL (Kuva. 5d-e; Lisätiedosto 3: kuva S2C, D)

notochordin häntäkärki alkaa käyristyä dorsaalisesti (nuoli lisätiedostossa 3: kuva S2D). On eväsrauskut on ventraalinen osa caudal fin fold (nuolenkärjet Lisätiedostossa 3: kuva S2D). Kleithrumin luutumista havaitaan kiduksen takana (Kuva. 5d, e). Vyön luustossa ei ole havaittavissa merkittäviä morfologisia muutoksia lukuun ottamatta kleithrum-luutumista.

7,9 mm TL (Kuva. 4c; Kuva. 5F; Lisätiedosto 3: kuva S2E-F)

lantion eväsilmut (pel) tunnistetaan ensin pieniksi pullistumiksi, eikä apikaalista ektodermaalin paksuuntumista havaita (lisätiedosto 3: kuva S2F). Lantion evän nuppumuodostuksen aloittaminen on yksi morfologisista muutoksista, jotka tapahtuvat teleostin kalojen toukkien ja nuorien välisessä siirtymävaiheessa (metamorfoosi). Mediaanievä muodostaa toisen selkäevän (df2) ja peräevän (Af) (lisätiedosto 3: kuva S2E). Pyöreänmuotoisen mediaanievän kauvatsainen alue muuttuu melamaiseksi häntäeväksi (KS.lisätiedostossa 3: kuva S2E). Hypuraaliluun primordium, joka tukee häntäeväsäteiden elementtejä, havaitaan dorsaalisesti kaartuvana nikamana häntäreunassa (nuoli Lisätiedostossa 3: kuva S2E). Rintaevän apikaalisen eväpoimun proksimaalinen pää alkaa liikkua poispäin ruumiin seinämästä (nuoli Kuvassa. 4c). Rintaevän endoskelaalisen levyn proksimaalinen osa venyy ja muuttuu muodoltaan viuhkamaiseksi(Kuva. 4c; Kuva. 5 F). Endoskeletaalisen kiekon proksimaalisella alueella on kuutiollisia soluja, joissa on ohut matriisi septa (nuolenkärjet Viikunassa. 5g), joka viittaa solunjakautumiseen . Endoskeletaalisen kiekon distaalisessa osassa on lieriömäisiä soluja, eikä havaituissa soluissa ole havaittavissa selvää matriisiseptaa (Fig. 5 tuntia). Kleithrum on edelleen luutunut (Kuva. 5). Precoracoid-prosessin ja postcoracoid-prosessin välinen kulma on pienempi kuin 6,2 mm TL: n kohdalla (vertaa Kuva. 5e, i), joka johtaa lapaluun ulkonemaan kehon seinämästä (Kuva. 5). Postcoracoid prosessi on edelleen pitkänomainen posteriorly (Kuva. 5).

9, 5 mm TL (Kuva. 4d)

rintaevän endoskeletaalisen kiekon proksimaalinen alue on edelleen pitkänomainen (Kuva. 4d). Viuhkamainen rintaevä on täysin erillään ruumiin seinämästä (Kuva. 4d).

11, 0 mm TL (Kuva. 4e; Lisätiedosto 3: Kuva S2G-H)

lantion eväsilmut tarkentuvat (Lisätiedosto 3: kuva S2H). Melanoforeja löytyy takaruumiin takaruumiin selkä-ja ventraaliosista (nuolenkärjet lisätiedostossa 3: kuva S2G). Rintaevien apikaalisessa eväpoimussa on kaksi evää (nuolenkärjet Viikunassa. 4 e).

13,6 mm TL (Kuva. 5j-m)

lapa työntyy ulos ruumiin seinämän pinnalta ja muodostaa rintaevien proksimaalisen osan. Kondrogeneesi aloitetaan lantion evärungon (Kuva. 5j). Rintaevien endoskeletaalilevyssä on kuutiomaisia kondrogeenisia soluja (Kuva. 5 L, m). Joissakin kuutiomaisissa soluissa on ohut matriisi septa (nuolenkärjet Viikunassa. 5l, m), mikä viittaa siihen, että ne jakautuvat. Endoskeletaalisen kiekon proksimaalisella alueella solunjakautumat suuntautuvat satunnaisesti (Kuva. 5l), kun taas ne esiintyvät proksimaalisen-distaalisen akselin suuntaisesti distaalisella alueella (Kuva. 5m).

14, 5 mm TL (Kuva. 4F; Kuva. 6a-c; lisätiedosto 3: kuva S2I-J)

ensimmäinen selkäevä on tässä vaiheessa havaittavissa (lisätiedosto 3: kuva S2J). Viuhkamaisen rintaevän eväpoimussa on 14 evää (nuolenkärkiä Viikunassa. 4 F). Nämä ominaisuudet ovat samanlaisia kuin toukilla juuri ennen niiden siirtymistä pelagisesta elinympäristöstä pohjaeläimiin (late post toukka viikuna. 4F Kobayashi et al., 1972). Rintaevän otsalohkot osoittavat, että lapaluukerros (sco) työntyy ja siitä tulee evän proksimaalinen osa (Kuva. 6 A). Endoskelaalisen kiekon proksimaalinen alue on kaksi solua leveä dorso-ventraaliakselia pitkin (kuva. 6b), kun taas se on yksisoluinen leveä keskialueella (Kuva. 6c).

Fig. 6
figure6

nuorten yksilöiden rintaevien luurangot. 14,5 mm TL planktonisia toukkia (n = 1). b, c kohdassa A tarkoitetut suurennetut luvut. d, e sivuttaiset (d) ja ventraaliset (e) näkymät 18,6 mm: n TL-pohjaisten nuorten (n = 1) rintaevien luurangoista. F – I Hematoksyliini-ja eosiinimaalatut rintaevät 19,9 mm TL-sammakkoeläinpoikasilla (n = 1). g, h, i f alakohdassa tarkoitetut suurennetut luvut. j, k sivuttais – (j) ja ventraalinäkymät 22,5 mm: n TL-amfibioeläinten poikasten rintaevien luurangoista (N = 1). cl, cleithrum; co, coracoid; fr, fin ray; mdz, zone of matrix decomposition; pel, lantioluu; pt., posttemporaalinen; PR, proksimaalinen radiaalinen; scl, supracleithrum; sco, scapulocoracoid. Asteikko, 10 µm in (a-c, g-i); 50 µm in (f); 400 µm in (d–e, j–k)

Pohjanuorisovaiheet (Kuva. 4; Kuva. 6)

18, 6 mm TL (Kuva. 4g; Kuva. 6d-e; Lisätiedosto 3: Kuva S2K-L)

lantion evät ovat havaittavissa sivusuunnassa, ja eväsrauskut näkyvät lantion evien eväkertaisella alueella (Lisätiedosto 3: kuva S2L). Silmät alkavat liikkua dorsally (Lisätiedosto 3: kuva S2K). Lisää melanoforeja näkyy pään alueella (nuolenkärjet lisätiedostossa 3: kuva S2K). Rintaevät muuttuvat viuhkamaisesta melan muotoon(Kuva. 4g; Lisätiedosto 3: kuva S2L). Endoskeletaalinen levy alkaa luutua ja muuttuu proksimaaliseksi radiaaliksi (pr). Luutumista havaitaan myös rintaevän eväsrauskuissa (fr) ja post-temporaalisessa (post. t.) (Kuva. 6d). Suurin osa kleithrumista on luutunutta, joskin kleithrum-levy (CLP Kuvassa. 1D), joka on ominaisuus aikuisille kaloille, ei ole vielä havaittu (Kuva. 6d, e).

19,2–19,9 mm TL (Kuva. 4h-I; Kuva. 6f-i; Lisätiedosto 3: kuva S2M)

Melanoforeja on levittäytynyt koko vartaloon, mukaan lukien rintaevät (Kuva. 4h; Lisätiedosto 3: kuva S2M). Suu liikkuu ventraalisesti (Lisätiedosto 3: kuva S2M). Rintaevän proksimaalista aluetta peittää hyvin kehittynyt operculum (Ope) (Kuva. 4h, i). Rintaevien otsalohkot osoittavat, että neljä proksimaalista radiaalia (pr1–pr4) on kukin eristetty matriisin hajoamisvyöhykkeellä (MDZ Kuvassa. 6g). Ensimmäinen ja toinen proksimaalinen radiaali ovat yksisoluisia leveitä (Kuva. 6h), kun taas kolmas proksimaalinen säteinen on kahden solun levyinen ja neljäs proksimaalinen säteinen on kaksi-tai kolmisoluinen pitkin dorso-ventraalista akselia rintaevän proksimaalisessa osassa (Kuva. 6).

Amphibious juvenile stage (Lisätiedosto 3: kuva S2N; Kuva. 6j-k)

21,1–22,5 mm TL (Lisätiedosto 3: kuva S2N; Kuva. 6j-k)

silmät työntyvät päälaelle ja suu sijaitsee vatsapuolella. Jalusta litistyy ja muuttuu vaakasuoraksi vartalon akseliin nähden (Lisätiedosto 3: kuva S2N). Melanoforit peittävät koko kehon pinnan. Poikanen on tässä vaiheessa samannäköinen kuin aikuinen, lukuun ottamatta kehittyviä ensimmäisiä selkäeviä (Lisätiedosto 3: kuva S2N) ja alkaa osoittaa amfibio-ekologiaa .

Alitsariininpunaiset ja alkian siniseksi värjätyt luustonäytteet osoittavat, että kleithrum– laatan luutuminen (nuoli Kuvassa. 6j, k), ensimmäinen kautta neljäs proksimaalinen radiaalit (pr1–pr4), ja coracoid (co) on tapahtunut (Kuva. 6 J, k). Rintaevän luustomallit (Kuva. 6j, k)muistuttavat aikuisten kalojen (Kuva. 1c).