kuvaus

rnalater-RNA-Stabilointiliuos stabiloi ja suojaa solun RNA: ta ehjissä, sulamattomissa kudosnäytteissä, jolloin kudosnäytteiden välitöntä käsittelyä tai näytteiden jäädyttämistä nestemäisessä typessä myöhempää käsittelyä varten ei tarvita. Kudospalat voidaan kerätä ja upottaa rnalater-RNA-Stabilointiliuokseen varastointia varten vaarantamatta myöhemmän RNA-eristyksen jälkeen saadun RNA: n laatua tai määrää. Edut käyttämällä RNAlater RNA stabilointi ratkaisu:
• tehokkuus—stabiloi RNA: ta 1 päivä 37°C: ssa, 1 viikko 25°C: ssa, 1 kuukausi 4°C: ssa tai loputtomiin -20°C: ssa
• yksinkertaisuus—yksi reagenssi, joka inaktivoi Rnaasit välittömästi ja stabiloi RNA: ta kudoksissa tai soluissa
• mukavuus—ei tarvitse jäädyttää näytteitä nestemäisessä typessä tai rush—näytteissä takaisin laboratorion pakastimeen
• liikkuvuus—täydellinen kudosten keräämiseen ”kentällä”
• monipuolisuus-yhteensopiva monien RNA-eristysmenetelmien kanssa, mukaan lukien useimmat RNA-eristyspakkaukset
Sovellukset
br > rnalaterin RNA-STABILOINTILIUOSTA on testattu erilaisilla nisäkkäiden kudoksia, kasveja, E. coli, Xenopus, kala, ja Drosophila. Se soveltuu erinomaisesti:
• RNA: n eheyden suojaamiseen kudoksissa, joissa on runsaasti Rnaaseja
• näytteiden keräämiseen eri aikapisteistä tarvitsematta välittömästi käsitellä näytteitä jokaiselta aikapisteeltä
• kudosten arkistointiin tulevaa mikrotissektiota varten
• eläinten onteloiden tai elinten upottamiseen RNA: n vakauttamiseksi pitkällisten dissektiomenetelmien aikana
* näytteiden keräämiseen paikoista (esim., sairaalat, kenttäkohteet, avaruussukkula), joissa RNA: n välitön eristäminen ei ole mahdollista
• näytteiden lähettäminen märällä jäällä tai jopa huoneenlämmössä, jos ne toimitetaan yön yli
Rnalaterin RNA-Stabilointiliuos
leikelty kudos (alle 0, 5 cm missä tahansa ulottuvuudessa) yksinkertaisesti upotetaan noin 5 tilavuuteen huoneenlämpöistä Rnalaterin liuosta. Liuos läpäisee solut ja stabiloi RNA: ta. Tämän jälkeen näytettä voidaan säilyttää määräämättömän ajan -20°C: ssa (kudos ei jäädy), 4°C: ssa enintään kuukauden ajan tai 25°C: ssa enintään viikon ajan. RNA-eristystä varten kudos yksinkertaisesti poistetaan RNAlater-liuoksesta ja käsitellään ikään kuin se olisi juuri korjattu. Useimmat kudokset voidaan siirtää suoraan lysis-puskuriin ja homogenoida. Rnalater-liuoksella käsitellyt ja sitten jäädytetyt näytteet voidaan jauhaa laastilla ja survimella tai sulattaa ja käsitellä tuoreen kudoksen tavoin ilman huolta rnaasien solumurtumasta ja vapautumisesta, koska rnaasit on jo inaktivoitu. Solut voidaan kehrätä pois ja lisätä sitten lysis-puskuriin tai joissakin tapauksissa RNAlater-liuosta voidaan lisätä solujen mukana suoraan lysis-puskuriin.
yhteensopiva useiden eri menetelmien kanssa
RNAlater-RNA-Stabilointiliuos on yhteensopiva yksivaiheisten RNA-eristysmenetelmien, kuten Trizolireagenssin kanssa; lasinsitomismenetelmien, kuten QIAGENin RNeasy – tai Ambion RNAqueous kit-menetelmän kanssa; happamien fenoliuuttomenetelmien, kuten Ambion ToTALLY RNA kit-menetelmän kanssa; ja mRNA: n oligo(DT) – valinnan menetelmien, kuten Ambion Poly(a)Puristt™ kit-menetelmän kanssa. Sisäinen tutkimus, samoin kuin äskettäin julkaistu riippumaton tutkimus, osoittaa, että rnalater RNA-Stabilointiliuoksen käyttö kudosten varastointiin ei vaikuta myöhempien RNA-ekspressioanalyysikokeiden tuloksiin verrattuna muihin käsittelymenetelmiin.