Articles

Mastering The Microtome

Beskrivelse Av Microtome

generelt er microtomes involvert i prosessen med å forberede prøver av biologisk materiale som skal undersøkes under et mikroskop. Spesielt skar de materiale i ekstremt tynne stykker, slik at de kan passe inn i et mikroskop og studeres av forskere. Det holder materialet på plass mens et veldig skarpt glass eller diamantkantet kniv skiver det i stykker noen få titalls mikron tykk.

Historien Bak Microtomy Og Microtome Enheten

når mikroskopet ble oppfunnet, forskere trengte å skjære materiale. Før mikrotomet ble opprettet, ville forskerne manuelt kutte stykker materiale de ønsket å inspisere ved hjelp av et knivblad. Denne metoden for å forberede prøver for studier var kjedelig og vanskelig, så det var naturlig at et alternativ måtte oppfinnes. Cummings, et produksjonsfirma, designet manuelle seksjoneringsinstrumenter laget av tre i 1770. Disse instrumentene ble brukt utelukkende i botanikk for kutting av planter. Da ble begrepet «mikrotom» laget i 1839 Av Chevalier.Det var Imidlertid Rudolf Thoma som designet det aller første offisielle mikrotomet, Kalt «Thoma microtome». Derfra utviklet mikrotomet seg til forskjellige typer og stiler, brukt til forskjellige formål.

Mest Populære Typer Mikrotom Maskiner

1. Rotary

den mest allsidige og ofte brukte versjonen. Det fungerer på en roterende måte. Kniven er ubevegelig, gjenstår i horisontal stilling. Maskinens kropp roterer rundt bladet, skiver som det går. For eksempel holder maskinen prøven rett over kniven, så beveger den seg nedover over kniven, skiver et stykke vev av, og maskinen trekker seg tilbake og beveger seg oppover før du starter igjen. Dette gir vevsskiver på 1-60 mikrometer.

2. Sledge

Fungerer ved å holde prøven fortsatt i «shuttle», som deretter avanserer og trekker seg over bladet. Skivene som denne maskinen produserer, er like tykke som et roterende mikrotom, men det kutter vev som er mye «tøffere» og er derfor vanskelig å skjære – mer trykk plasseres på prøven, slik at et jevnt kutt kan gjøres. Biologer bruker denne typen maskin for å kutte bein og andre vanskelige materialer.

3. Vibrerende

et vibrerende blad er den definerende egenskapen til denne maskinen. Dette gjør at tøffe og harde prøver kan kuttes uten å bruke trykket som en annen mekanisme, med et stasjonært blad, ville innpode. Denne maskinen produserer skiver fra 30-50 mikrometer tykk.

4. Saw

når en sledemikrotom ikke kan kutte nøyaktig og effektivt, er det nødvendig med en sagbasert maskin. I likhet med en slede brukes denne mikrotomen når materialer er ekstremt harde, som bein eller tenner, og krever mer kraft. En roterende sag brukes til å skjære. Dette mikrotomet produserer skiver som er minst 30 mikrometer tykke.

5. Laser

en laser brukes til presis kutting uten å berøre prøven. På grunn av toppmoderne teknologi gjør denne maskinen det mulig å kutte uten kontakt uten å forårsake termisk skade. Lasermaskinen skiver vev mellom 10-100 mikrometer tykk. Dette er også en automatisk maskin, hvor de andre vil bli klassifisert som manuell.

Funksjoner & Deler Av Mikrotomet

det er forskjellige mikrotomer, men de består alle av tre hoveddeler:

  1. Base (mikrotom kropp)
  2. knivfeste og blad
  3. Materiale eller vev holder

noen mikrotomer har flere funksjoner, som en bordklemme for å holde maskinen på plass. Noen enheter brukes manuelt, mens andre er automatiske, så de spesifikke funksjonene vil variere i disse mikrotomene.

uansett hvilken maskin som brukes, kommer mikrotomi i utgangspunktet ned til kniven. En skarp, lyte-fri blad er viktig å nøyaktig og effektivt skjære en prøve. Vanligvis er knivene enten plan konkav, kileformet eller meiselformet design.

Hvordan Betjene En Mikrotom Maskin

før du bruker en mikrotom, må prøver være innebygd, noe som betyr at de skal settes i en mer stiv fikseringsmiddel. For å gjøre dette må prøven dekkes av voks eller epoksy. Dette plasseres deretter i en form for å avkjøle og herde, slik at den er klar til å skjære.

deretter, med de fleste mikrotom maskiner, en seksjon er kuttet ved å fremme materialet holderen mot bladet mens kniven holdes stivt stille. Den faktiske skivebevegelsen, enten den er på et vertikalt eller horisontalt plan, kombineres med forhåndsmekanismen, slik at materialholderen flyttes etter hver skive. Avstanden som holderen flyttes på, kan velges ved hjelp av en skaleringsinnstilling på maskinens kropp.

Vedlikeholdsinstruksjoner

den viktigste instruksjonen er å rengjøre instrumentet daglig. Hvis du ikke rengjør det regelmessig, kan kniven bli rusten, og det blir vanskeligere og vanskeligere å skjære prøver effektivt. Når det er sagt, bør du alltid fjerne kniven før rengjøring.

det er også viktig å fjerne avfall fra bladet og maskinen. Dette kan gjøres ved hjelp av en tørr pensel. Ikke rengjør de ytre overflatene med alkohol eller xylen da maskinen sannsynligvis ikke er motstandsdyktig mot disse løsningsmidlene, og eksponering for xylen bør unngås. Parafinfjerner, milde husholdningsrengjøringsmidler eller såpe og vann anbefales.

det er ekstremt viktig å sørge for at ingen væske kommer inn i apparatet under rengjøring. Dette kan kompromittere maskinens effektivitet og kan potensielt skade mikrotomets indre arbeid.

for den endelige pleieinstruksjonen, som med det meste vitenskapelig utstyr, anbefales det å få instrumentet inspisert minst en gang i året av en kvalifisert servicetekniker.

til slutt er det mange forskjellige typer mikrotommaskiner kommersielt tilgjengelige. Det er viktig å forstå hvilken type jobb eller prøve som må slicing før du kjøper en maskin. Å forstå komponentene og måten en bestemt maskinskiver er også viktig for å velge riktig mikrotom.Gudrun Lang (2006). Histotechnik. Praxislehrbuch für die Biomedizinische Analytik.(Histology: practical textbook for analytical biomedicine). Springer, Wien/New York. ISBN 978-3-211-33141-5.

  • https://www.leicabiosystems.com/pathologyleaders/steps-to-better-microtomy-flotation-section-drying/
  • https://www.sciencedirect.com/topics/neuroscience/microtome
  • https://biomedizin.unibas.ch/fileadmin/user_upload/biomedizin/core_facilities/histology/Guides/Paraffin_methods.pdf
  • https://www.labmanager.com/lab-health-and-safety/2010/06/microtome-safety#.XV6kn5NKiL8
  • https://brainresearchlab.com/information/microtome-knife-use-and-care/
  • http://www.microbehunter.com/parts-of-a-microtome/
  • https://www.labce.com/spg605374_instrumentation_for_microtomy_rotary_microtome_par.aspx