Hva Er Stillasproteiner?

Proteinstillas er medlemmer av signalkaskaden nedstrøms for celleoverflatereseptorer. Stillasproteiner hjelper til med å videresende meldingen mellom cellemembranen og kjernen raskere. De gjør dette ved å tjene som et dockingssted for flere proteinpartnere i kaskaden, slik at de kan være nær hverandre. Denne nærheten kutter ned tiden som kreves for ett protein i kaskaden for å finne sin partner. Noen protein stillas forblir losset til en melding fra en aktivert membranreseptor når dem, hvorpå de er docket av flere proteiner i kaskaden. Andre proteinstillas er forankret av proteiner i kaskaden selv før en aktivert membranreseptor sender en melding til dem, og øker effektiviteten der meldingen blir videresendt fra reseptor til kjerne.

Gpcrs Og Stillasproteiner

G-proteinkoblede Reseptorer (GPCRs) Er en stor klasse av celleoverflateproteiner som videresender ekstracellulære signaler til kjernen. ET EKSEMPEL på EN GPCR er den β-adrenerge reseptoren som registrerer hormonadrenalin. Når aktivert av en ligand på den ytre celleoverflaten, gpcrs aktivere sine beslektede G-proteiner som ligger på den indre cellemembranen. De aktiverte g-proteinene glir deretter langs innsiden av cellemembranen for å aktivere en kaskade av proteiner og enzymer som igjen forsterker den opprinnelige meldingen mottatt av GPCR. Stillasproteiner er viktige nav med informasjon nedstrøms for aktiverte GPCRs. Stillasproteiner rekrutterer nedstrøms medlemmer av en signalkaskade til den indre cellemembranen veldig raskt, eller på forhånd, noe som gjør det effektivt for meldingen å flytte fra GPCR til cytosol.

Aktiveringstilstander Av Signalkaskade

kompleksiteten av intracellulær signalering er at proteinene i en signalkaskade har varierende aktivitetstilstander (dvs.av, delvis aktiv, fullt aktiv). Disse tilstandene er avhengige av konformasjonsendringer som skyldes interaksjoner med andre proteiner. De er også avhengige av tilstedeværelse eller fravær av deler, som fosfatgrupper, ubiquitingrupper og kalsiumioner. Aktiveringstilstanden til et signalprotein brukes ofte som en indikator på om en bestemt vei er aktivert. For eksempel blir fosforylert MEK eller ERK ofte tolket som å representere aktivering av en intracellulær signalvei nedstrøms FOR EN GPCR. Videre kan disse signalproteinene ha flere fosforyleringssteder, hvor forskjellige kombinasjoner påvirker nivået av proteinets aktivitet eller halveringstid. Proteiner som MEK og ERK er kjent for å binde seg nær hverandre på stillasproteiner. Evnen stillasproteiner til å binde MEK og ERK er også regulert med hensyn til stillasets aktiveringstilstand, som endres etter post-translasjonell modifikasjon ved tilsetning av kjemiske enheter.

Plukke De Riktige Epitoper for Nøyaktig Informasjon

den nevnte kompleksiteten av intracellulær signalering er nettopp hvorfor plukke de riktige antistoffene er avgjørende når forskere søker å nøyaktig bestemme tilstanden til en celle som svar på ekstracellulære stimuli. Hver aktiv konformasjon av et protein eller fosforyleringssted kan tjene som en annen epitop som kan bindes av et antistoff. Dermed kan antistoffer som er utformet for å oppdage tilstedeværelse eller fravær av en kjemisk del på et signalprotein, gi forskere et klart bilde av hvilken vei som er aktivert og i hvilken grad. Fosforylerte epitoper er ofte mål for immunoblotting og in situ immunolokaliseringsanalyser. Siden et protein kan ha flere fosforyleringssteder, som hver påvirker proteinet annerledes, i tillegg til flere steder for deler som ubiquitination, er det en fruktbar, men ikke – trivial oppgave å plukke de riktige epitopene for å oppdage.Flere epitoper, enten på samme protein eller forskjellige proteiner, kan oppdages samtidig eller sekvensielt på samme blot eller samme celler. Det er derfor viktig at de riktige vertsartene for primære og sekundære antistoffer vurderes med omtanke. Enkeltdomenantistoffer er også nyttige for disse forsøkene, noe som legger til allsidigheten av kombinasjoner av antistoffer som kan brukes i samme analyse.

både monoklonale og polyklonale antistoffer er nyttige for å oppdage tilstanden av intracellulære signalkaskader. Vår antistoff utvalg guide gjør plukke den rette kombinasjonen av antistoffer lett. Det tar hensyn til prøven arter, vertsarter, ønsket nivå av spesifisitet, og kryssreaktivitet bekymringer, blant andre faktorer. Antistoff selection guide vil lede deg til de beste alternativene for single-purpose antistoffer eller de som du vil bruke i flere programmer. Den rette kombinasjonen av antistoffer rettet mot strategiske epitoper vil gi klarhet til tilstanden til enhver intracellulær signalkaskade.