Articles

Mastering the Microtome

descrierea Microtomului

În general, microtomii sunt implicați în procesul de pregătire a probelor de material biologic care urmează să fie examinate la microscop. Mai exact, acestea feliază materialul în bucăți extrem de subțiri, astfel încât să poată încăpea într-un diapozitiv la microscop și să fie studiate de cercetători. Ține materialul în loc, în timp ce un cuțit foarte ascuțit de sticlă sau cu diamant îl taie în bucăți de câteva zeci de microni grosime.

istoria din spatele Microtomiei și a dispozitivului Microtom

când microscopul a fost inventat, oamenii de știință au trebuit să taie materialul. Înainte de crearea microtomului, oamenii de știință tăiau manual bucăți de material pe care doreau să le inspecteze folosind o lamă de ras. Această metodă de pregătire a probelor pentru studiu a fost obositoare și dificilă, așa că, în mod natural, a trebuit inventată o alternativă.

Cummings, o companie producătoare, a proiectat instrumente de secționare manuală din lemn în 1770. Aceste instrumente au fost folosite exclusiv în botanică pentru tăierea plantelor. Apoi, termenul „Microtom” a fost inventat în 1839 de Chevalier.cu toate acestea, Rudolf Thoma a fost cel care a proiectat primul Microtom oficial, numit „Microtomul Thoma”. De acolo, microtomul a evoluat în diferite tipuri și stiluri, utilizate în scopuri diferite.

cele mai populare tipuri de mașini Microtome

1. Rotary

Versiunea cea mai versatilă și frecvent utilizată. Funcționează într-o manieră rotativă. Cuțitul este nemișcat, rămânând în poziție orizontală. Corpul mașinii se rotește în jurul lamei, tăind în timp ce merge. De exemplu, mașina ține proba chiar deasupra cuțitului, apoi se deplasează în jos peste cuțit, tăind o bucată de țesut, apoi mașina se trage înapoi și se mișcă în sus înainte de a începe din nou. Aceasta produce felii de țesut de 1-60 micrometri.

2. Sledge

funcționează ținând eșantionul încă în „navetă”, care apoi avansează și se retrage peste lamă. Feliile pe care le produce această mașină au o grosime similară cu un Microtom rotativ, cu toate acestea, taie țesuturile care sunt mult mai „dure” și, prin urmare, sunt greu de tăiat – se pune mai multă presiune pe eșantion, astfel încât să se poată face o tăietură netedă. Biologii folosesc acest tip de mașină pentru tăierea oaselor și a altor materiale dificile.

3. Vibratoare

o lamă vibratoare este caracteristica definitorie a acestei mașini. Acest lucru permite tăierea probelor dure și dure fără a aplica presiunea pe care ar insufla un alt mecanism, cu o lamă staționară. Această mașină produce felii de 30-50 micrometri grosime.

4. Ferăstrău

când un Microtom de sanie nu poate tăia precis și eficient, este necesară o mașină pe bază de ferăstrău. Similar cu o sanie, acest Microtom este utilizat atunci când materialele sunt extrem de dure, cum ar fi oasele sau dinții, și necesită mai multă forță. Un ferăstrău rotativ este folosit pentru a tăia. Acest Microtom produce felii care au, cel puțin, o grosime de 30 micrometri.

5. Laser

un laser este utilizat pentru tăierea precisă fără a atinge efectiv proba. Datorită tehnologiei de ultimă generație, această mașină permite felierea fără contact fără a provoca daune termice. Mașina laser taie țesuturi între 10-100 micrometri grosime. Aceasta este, de asemenea, o mașină automată, unde celelalte ar fi clasificate ca manuale.

caracteristici & părți ale Microtomului

există microtomi diferiți, dar toți constau din trei părți principale:

  1. Base (corpul microtomului)
  2. cuțit atașament și lama
  3. material sau suport de țesut

unele microtomi au mai multe caracteristici, cum ar fi o clemă de birou pentru a ține mașina în poziție. Unele dispozitive sunt utilizate manual, în timp ce altele sunt automate, astfel încât caracteristicile specifice ar diferi în aceste microtomi.

indiferent de mașina utilizată, microtomia se reduce practic la cuțit. O lamă ascuțită, fără cusur, este esențială pentru a tăia cu precizie și eficient o probă. În general, cuțitele sunt fie concave plane, în formă de pană, fie în formă de daltă.

cum se utilizează o mașină de Microtom

înainte de a utiliza chiar și un Microtom, eșantioanele trebuie încorporate, ceea ce înseamnă că ar trebui introduse într-un fixativ mai rigid. Pentru a face acest lucru, eșantionul trebuie acoperit cu ceară sau epoxid. Acesta este apoi plasat într-o matriță pentru a se răci și a se întări, făcându-l gata de felie.

apoi, cu cele mai multe mașini microtome, o secțiune este tăiată prin avansarea suportului de material spre lamă în timp ce cuțitul este ținut rigid nemișcat. Mișcarea efectivă de feliere, indiferent dacă este pe un plan vertical sau orizontal, este combinată cu mecanismul de avans, astfel încât suportul materialului să fie mutat după fiecare felie. Distanța pe care este deplasată suportul poate fi selectată utilizând o setare de scară pe corpul mașinii.

instrucțiuni de îngrijire

cea mai importantă instrucțiune este curățarea zilnică a instrumentului. Dacă nu îl curățați în mod regulat, cuțitul se poate rugini și va deveni din ce în ce mai greu să tăiați probele în mod eficient. Acestea fiind spuse, ar trebui să scoateți întotdeauna cuțitul înainte de curățare.

de asemenea, este esențial să eliminați deșeurile de pe lamă și mașină. Acest lucru se poate face folosind o pensulă uscată. Nu curățați suprafețele exterioare cu alcool sau xilen, deoarece mașina nu este probabil rezistentă la acești solvenți și trebuie evitată expunerea la xilen. Se recomandă îndepărtarea parafinei, curățarea ușoară a gospodăriei comerciale sau săpunul și apa.

este extrem de important să vă asigurați că niciun lichid nu intră în interiorul instrumentului în timpul curățării. Acest lucru ar putea compromite eficiența mașinii și ar putea dăuna funcționării interioare a microtomului.

pentru instrucțiunile de îngrijire finală, ca și în cazul majorității echipamentelor științifice, se recomandă ca instrumentul să fie inspectat cel puțin o dată pe an de către un tehnician de service calificat.

În concluzie, există multe tipuri diferite de mașini microtome disponibile comercial. Este important să înțelegeți tipul de lucrare sau eșantion care trebuie tăiat înainte de a cumpăra o mașină. Înțelegerea componentelor și a modului în care o anumită mașină feliază este, de asemenea, esențială pentru a alege microtomul potrivit.

  1. Gudrun Lang (2006). Histotechnik. Praxislehrbuch für die Biomedizinische Analytik.(Histology: practical textbook for analytical biomedicine). Springer, Wien/New York. ISBN 978-3-211-33141-5.
  2. https://www.leicabiosystems.com/pathologyleaders/steps-to-better-microtomy-flotation-section-drying/
  3. https://www.sciencedirect.com/topics/neuroscience/microtome
  4. https://biomedizin.unibas.ch/fileadmin/user_upload/biomedizin/core_facilities/histology/Guides/Paraffin_methods.pdf
  5. https://www.labmanager.com/lab-health-and-safety/2010/06/microtome-safety#.XV6kn5NKiL8
  6. https://brainresearchlab.com/information/microtome-knife-use-and-care/
  7. http://www.microbehunter.com/parts-of-a-microtome/
  8. https://www.labce.com/spg605374_instrumentation_for_microtomy_rotary_microtome_par.aspx