am exploatat virobiomul HIV, în special proteina plic gp120, pentru a identifica peptidele active cu receptori foarte puternici care acționează ca antagoniști funcționali ai receptorilor multipli de chemokină. Acest lucru a fost realizat prin căutarea secvenței gp120 pentru mici omologii locale la peptide de semnalizare cunoscute, cum ar fi neuropeptide din VIP/PACAP/GHRH familie .

am identificat un domeniu octapeptidic discret (situsul peptidei T) în apropierea tulpinii V2 a gp120 și a peptidelor înrudite derivate din aceste secvențe care blochează preferențial infecția izolatelor HIV tropice R5 . Studiile noastre inițiale au folosit un izolat de pacient cu trecere timpurie, demonstrat ulterior că are un fenotip al receptorului R5 / X4 (dual-tropic), deși niciunul dintre receptorii chemokinei și nici semnificația utilizării receptorului chemokinei nu erau cunoscuți la momentul acestei lucrări (circa 1985). Efectul antiviral predominant pentru izolatele HIV R5 vs X4 explică controversa timpurie legată de lipsa efectelor antivirale cu izolatele adaptate la laboratorul X4 .

în timp ce peptida T a fost primul receptor anti-viral vizat pentru HIV (această clasă A ajuns să fie numită „inhibitori de intrare”), pe măsură ce epidemia SIDA s-a extins la mijlocul anilor 1980, a devenit evident că virusul, în timp ce stabilea infecția în SNC, nu s-a reprodus în neuroni. Cu toate acestea, au fost raportate deficite cognitive și motorii profunde, adăugând la marele stigmat și suferind această boală purtată la acea vreme. În rapoartele noastre inițiale am observat o distribuție corticală a legării gp120 la receptorii din creierul primatelor și am emis ipoteza că uciderea gp120 a neuronilor susceptibili ar explica deficitele cognitive observate ale pacientului. Am propus ca peptida T, prin blocarea legării gp120 , care s-a dovedit ulterior a fi la CCR5, să fie eficientă în prevenirea pierderii neuronale în infecția cu HIV, cunoscută acum că apare foarte devreme după infecție.

beneficii în neuroinflamație și neurodegenerare

studiile inițiale care au arătat peptida T și analogul său rezistent la degradare d-ala1-peptida t-amidă (DAPTA), a fost protector la efectele neurotoxice ale gp120 în culturile neuronale, în parte prin eliberarea de chemokine protectoare . Efectele neuroprotectoare ale DAPTA au fost, de asemenea, prezentate la animalele tratate cu gp120, unde pierderea sinapselor și a arborelui dendritic, împreună cu întârzierile comportamentale, au fost inversate . Prin urmare, efectele neurotoxice ale gp120 s-au dovedit a fi o cauză a pierderii neuronale corticale și a patologiilor dendritice în neuro-SIDA. Mecanismele neurotoxicității gp120 au fost dezvăluite treptat de noi și de alții ca fiind indirecte și legate de activarea microgliei de către gp120 , efecte blocate de DAPTA . Microglia și astrocitele activate sunt acum bine apreciate ca mediatori în diverse neuropatologii, pe care analogii peptidici T le pot trata.

deși acțiunile antivirale ale acestor peptide au fost subiectul inițial al investigației, a devenit treptat clar că familia peptidelor t a peptidelor a avut efecte imunomodulatoare și neuronale utile dincolo de HIV care ar putea fi exploatate terapeutic, în special în condiții neurodegenerative cu patogeneză inflamatorie. DAPTA a redus citokinele M1 IL-1, Il-6, IL-8, IL-23, TNFa și citokinele m2 îmbunătățite, cum ar fi IL-4 și IL-10 . Câteva exemple de posibile beneficii ale tratamentului DAPTA includ boala Alzheimer , neuropatii de origine diversă , dureri de cancer, excitotoxicitate și accident vascular cerebral/ischemie cerebrală . Beneficiile clinice au fost demonstrate pentru neuro-SIDA (mai jos), suprimarea hormonului de creștere , o cauză a întârzierilor de dezvoltare în HIV pediatric, pe care DAPTA le-a restaurat , precum și în afecțiunile cutanate non-HIV, cum ar fi psoriazisul .

rezultatele studiilor clinice în neuro-SIDA

peptida T, sau mai corect DAPTA, a intrat în studiile clinice umane pentru obiectivele neuro-SIDA în 1986. Au fost raportate ulterior îmbunătățiri ale scanărilor cerebrale RMN și ale testelor cognitive . Beneficiile cognitive în neuro-SIDA au fost confirmate în teste controlate suplimentare, care au arătat un grup semnificativ (Activ vs.placebo, p=.003) și timpul (p=.001) efecte, absente orice toxicitate. Un studiu dbpc cu trei site-uri la 215 subiecți randomizați de spray intra-nazal DAPTA (2 mgs, TID) a fost efectuat la începutul anilor 1990. obiectivul principal a fost schimbarea scorului cognitiv global la 6 luni pe o baterie de 23 de teste. Deși nu s-a găsit nicio diferență semnificativă între grupul dapta și grupul placebo în ceea ce privește scorul cognitiv global, 2 din 7 domenii, memoria de lucru (p.04) și viteza procesării informațiilor (p=.008), a arătat îmbunătățiri în grupul DAPTA. S-a raportat, de asemenea, un efect al tratamentului pentru pacienții al căror număr de celule CD4 a fost mai mare de 200 de celule/unktil la momentul inițial (non-SIDA).

În general, această cohortă a fost minim afectată cognitiv (MMSE=28). Cu toate acestea, printre cei cu deficit cognitiv mai mare și semnificativ clinic >0.5 în ceea ce privește scorul global Z, o analiză pre-planificată a subgrupului a arătat că DAPTA a fost asociată cu performanțe îmbunătățite, în timp ce deteriorarea a fost mai frecventă în grupul placebo (P=.02) . Deși măsurătorile antivirale nu au fost un obiectiv principal în acest studiu, aceste date au fost raportate și au arătat că DAPTA a redus încărcătura virală (-0, 54 log, p<.03) . Constatarea efectului antiviral în acest studiu este remarcabilă deoarece pacienții nu au fost înrolați pe baza încărcăturii virale, nu a existat o optimizare a dozei pentru efectul antiviral, fenotipurile virale R5 sau X4 care ar determina sensibilitatea la un efect antiviral nu au fost cunoscute și, deoarece studiul a fost făcut în era pre-HAART, DAPTA a fost testat în esență ca monoterapie.

Un studiu de fază 2 în spital cu DAPTA la 15 sau 1.5 mg/zi timp de 4 săptămâni la nouă consumatori de droguri IV cu demență SIDA timpurie au prezentat, de asemenea, performanțe neurocognitive îmbunătățite, la doza mai mare comparativ cu doza mai mică sau placebo (P<.05) . Într-un studiu suplimentar, beneficiile asupra imagisticii funcționale a creierului au fost raportate la un bărbat de 39 de ani cu Complex de demență SIDA care a primit 12 săptămâni de DAPTA intranazală (0,4 mg TID, 1,2 mg pe zi). Acest studiu a demonstrat că 34 din 35 de regiuni ale creierului cu activitate scăzută a FDG au prezentat remisie după terapie , în concordanță cu RMN și beneficiile cognitive identificate în studiile de fază 1 și 2. (op. cit., de mai sus).

peptide active pe cale orală

în timp ce DAPTA este protejat substanțial de degradarea plasmatică, acesta este digerat rapid în stomac . În plus, utilizarea sa clinică a fost în principal prin spray nazal, care necesită depozitarea pe termen lung a unui produs medicamentos lichid. S-a demonstrat că DAPTA pierde activitatea prin agregare la stocare. Agregarea produsului medicamentos a fost o preocupare în studiul DBPC, deoarece produsul stocat a fost utilizat timp de câțiva ani a fost nevoie pentru a finaliza studiul și gelificarea medicamentelor de studiu a fost raportată de pacienți. Acest lucru a limitat dezvoltarea clinică ulterioară a DAPTA. Pentru a depăși acest obstacol semnificativ, am creat un analog al DAPTA (RAP-103) care este pe deplin protejat de degradare și păstrează potența picomolară.

Un studiu proof-of-concept la șobolani a arătat că administrarea orală de RAP-103 (0.05-1mg / kg) timp de 7 zile previne complet alodinia mecanică și inhibă dezvoltarea hiperalgeziei termice după ligarea parțială a nervului sciatic la șobolani . În acest studiu, am arătat în continuare că DAPTA și RAP-103 au blocat atât CCR2, cât și receptorul de chemokină strâns legat CCR5. Mai mult, RAP-103 ar putea reduce activarea microglială spinală și infiltrarea monocitelor și ar putea inhiba răspunsurile inflamatorii ale citokinelor evocate de leziunile nervilor periferici, cauza durerii neuropatice.

constatările noastre sugerează că direcționarea CCR2/CCR5 ar trebui să ofere o eficacitate mai mare decât direcționarea ccr2 sau CCR5 în monoterapie și că antagonistul funcțional dual CCR2 / CCR5 RAP-103 are potențialul de utilizare clinică în afecțiuni neuropatice și alte dureri. Deoarece acest analog împărtășește mai multe mecanisme dapta pentru a reduce activarea microglială, pentru a schimba echilibrul citokinelor, pentru a proteja neuronii și arborele dendritic de rezervă, este un candidat principal pentru dezvoltarea clinică ulterioară în condițiile neuroinflamatorii multiple deja discutate, pentru care au fost demonstrate beneficii în modelele de testare preclinică pe animale, după cum sa menționat în numeroasele citări ale acestei revizuiri.