ce sunt proteinele Schele?

schele proteice sunt membri ai cascadei de semnalizare în aval de receptorii de suprafață celulară. Proteinele schelei ajută la transmiterea mai rapidă a mesajului între membrana celulară și nucleu. Ei fac acest lucru servind ca un loc de andocare pentru mai mulți parteneri de proteine în cascadă, astfel încât să poată fi aproape unul de celălalt. Această proximitate reduce timpul necesar pentru ca o proteină din cascadă să-și găsească partenerul. Unele schele proteice rămân descărcate până când un mesaj de la un receptor de membrană activat ajunge la ele, după care sunt andocate de mai multe proteine în cascadă. Alte schele proteice sunt andocate de proteine în cascadă chiar înainte ca un receptor de membrană activat să le trimită un mesaj, crescând eficiența în care mesajul este transmis de la receptor la nucleu.

GPCRs și proteine Schele

receptorii cuplați cu proteina G (GPCRs) sunt o clasă mare de proteine de suprafață celulară care transmit semnale extracelulare către nucleu. Un exemplu de GPCR este receptorul adrenocentric care simte hormonul adrenalină. Odată activate de un ligand la suprafața celulară exterioară, GPCR-urile își activează proteinele g înrudite care se află pe membrana celulară interioară. Proteinele G activate alunecă apoi de-a lungul interiorului membranei celulare pentru a activa o cascadă de proteine și enzime care, la rândul lor, amplifică mesajul original primit de GPCR. Proteinele schele sunt hub-uri cheie de informații în aval de GPCR-urile activate. Proteinele schele recrutează membrii din aval ai unei cascade de semnalizare către membrana celulară interioară foarte repede sau înainte de timp, ceea ce face eficient ca mesajul să treacă de la GPCR la citosol.

stări de activare a cascadei de semnalizare

complexitatea semnalizării intracelulare este că proteinele dintr-o cascadă de semnalizare au stări de activitate variate (adică oprit, parțial activ, complet activ). Aceste stări depind de modificările conformaționale care rezultă din interacțiunile cu alte proteine. De asemenea, depind de prezența sau absența fragmentelor, cum ar fi grupările fosfat, grupările ubiquitin și ionii de calciu. Starea de activare a unei proteine de semnalizare este adesea folosită ca indicator al activării unei anumite căi. De exemplu, Mek fosforilat sau ERK este adesea interpretat ca reprezentând activarea unei căi de semnalizare intracelulară în aval de un GPCR. Mai mult, aceste proteine de semnalizare pot avea mai multe situsuri de fosforilare, dintre care diferite combinații afectează nivelul activității proteinei sau timpul de înjumătățire. Se știe că proteinele precum MEK și ERK se leagă unul lângă celălalt pe proteinele schelei. Abilitatea proteinelor schelei de a lega MEK și ERK este, de asemenea, reglementată în ceea ce privește starea de activare a schelei, care se schimbă după modificarea post-translațională prin adăugarea de fragmente chimice.

alegerea Epitopilor potriviți pentru informații exacte

complexitatea menționată mai sus a semnalizării intracelulare este tocmai motivul pentru care alegerea anticorpilor potriviți este crucială atunci când cercetătorii încearcă să determine cu exactitate starea unei celule ca răspuns la stimulii extracelulari. Fiecare Conformație activă a unei proteine sau a unui situs de fosforilare poate servi ca un epitop diferit care poate fi legat de un anticorp. Astfel, anticorpii care sunt concepuți pentru a detecta prezența sau absența unei părți chimice pe o proteină de semnalizare pot oferi cercetătorilor o imagine clară a căii care a fost activată și în ce măsură. Epitopii fosforilați sunt adesea ținte ale testelor de imunoblotting și imunolocalizare in situ. Deoarece o proteină poate avea mai multe site – uri de fosforilare, fiecare afectând proteina în mod diferit, pe lângă mai multe site – uri pentru fragmente, cum ar fi ubiquitinarea, alegerea epitopilor potriviți pentru a detecta este o sarcină fructuoasă-dar netrivială -.epitopii multipli, fie pe aceeași proteină, fie pe proteine diferite, pot fi detectați simultan sau secvențial pe aceeași pată sau pe aceleași celule. Prin urmare, este important ca speciile gazdă potrivite pentru anticorpii primari și secundari să fie luate în considerare cu precauție. Anticorpii cu un singur domeniu sunt, de asemenea, utili pentru aceste experimente, care adaugă versatilitatea combinațiilor de anticorpi care pot fi utilizate în același test.atât anticorpii monoclonali, cât și cei policlonali sunt utili în detectarea stării cascadelor de semnalizare intracelulară. Ghidul nostru de selecție a anticorpilor facilitează alegerea combinației potrivite de anticorpi. Acesta ia în considerare speciile de specimene, speciile gazdă, nivelul dorit de specificitate și preocupările legate de reactivitatea încrucișată, printre alți factori. Ghidul de selecție a anticorpilor vă va conduce la cele mai bune opțiuni pentru anticorpi cu un singur scop sau cele pe care le veți utiliza în mai multe aplicații. Combinația potrivită de anticorpi vizați de epitopi strategici va aduce claritate stării oricărei cascade de semnalizare intracelulară.