Rnalater soluție de stabilizare a ARN-ului
descriere
soluția de stabilizare a ARN-ului RNAlater stabilizează și protejează ARN-ul celular în probele de țesut intacte, dezghețate, eliminând necesitatea de a procesa imediat probele de țesut sau de a îngheța probele în azot lichid pentru prelucrare ulterioară. Piesele de țesut pot fi recoltate și scufundate în soluție de stabilizare a ARN RNAlater pentru depozitare fără a pune în pericol calitatea sau cantitatea de ARN obținută după izolarea ulterioară a ARN. Avantajele utilizării soluției de stabilizare a ARN RNAlater:
• eficacitate—stabilizarea ARN—ului timp de 1 zi la 37% C, 1 săptămână la 25% C, 1 lună la 4% C sau pe termen nelimitat la -20% C• simplitate—un singur reactiv care inactivează imediat ARN—urile și stabilizează ARN—ul în țesuturi sau celule
• comoditate-nu este nevoie să înghețați probele în azot lichid sau să grăbiți probele înapoi la congelatorul de laborator
• mobilitate-perfectă pentru colectarea țesuturilor ‘în câmp’
• versatilitate-compatibilă cu multe proceduri de izolare a ARN-ului, inclusiv majoritatea kiturilor de izolare a ARN-ului
Aplicații
rnalater soluție de stabilizare ARN a fost testat pe o varietate de țesuturi de mamifere, plante, E. coli, Xenopus, pește și Drosophila. Este ideal pentru:
• protejarea integrității ARN în țesuturi bogate în ARN-uri
* colectarea probelor din diferite puncte de timp, fără a fi nevoie să proceseze probele din fiecare punct de timp imediat
• arhivarea țesuturilor pentru microdisecție viitoare
• scufundarea cavităților animalelor sau a organelor pentru stabilizarea ARN-ului în timpul procedurilor de disecție îndelungate
• colectarea probelor în locații (de ex.* expedierea probelor pe gheață umedă sau chiar la temperatura camerei dacă este expediată peste noapte
procedura soluției de stabilizare a ARN RNAlater
țesutul disecat (mai puțin de 0,5 cm în orice dimensiune) este pur și simplu scufundat în aproximativ 5 volume de soluție RNAlater la temperatura camerei. Soluția pătrunde în celule, stabilizând ARN-ul. Eșantionul poate fi apoi depozitat pe termen nelimitat la -20 centimetric C (țesutul nu îngheață), la 4 centimetric C timp de până la o lună sau la 25 centimetric C timp de până la o săptămână. Pentru izolarea ARN, țesutul este pur și simplu îndepărtat din soluția RNAlater și tratat ca și cum tocmai ar fi fost recoltat. Majoritatea țesuturilor pot fi transferate direct într-un tampon de liză și omogenizate. Probele tratate cu soluție de RNAlater și apoi congelate pot fi măcinate cu mortar și pistil sau dezghețate și prelucrate ca țesut proaspăt, fără îngrijorare pentru ruperea celulelor și eliberarea de Rnaze, deoarece Rnazele au fost deja inactivate. Celulele pot fi filate și apoi adăugate la tamponul de liză sau, în unele cazuri, soluția RNAlater poate fi adăugată împreună cu celulele direct la tamponul de liză.
compatibil cu o varietate de proceduri
Rnalater soluție de stabilizare ARN este compatibil cu metode de izolare ARN-o singură etapă, cum ar fi reactiv TRIzol; cu metode de sticlă de legare, cum ar fi Rneasy Qiagen lui sau trusa Rnaqueous Ambion; cu metode de extracție fenol acid, cum ar fi Trusa Ambion totally ARN; și cu metode care utilizează oligo(dT) selecție de ARNm, cum ar fi Ambion Poli(a)purist kit de. Cercetarea internă, precum și cercetarea independentă publicată recent, indică faptul că utilizarea soluției de stabilizare a ARN RNAlater pentru stocarea țesuturilor nu afectează rezultatul experimentelor ulterioare de analiză a expresiei ARN în comparație cu alte metode de procesare.