născut și crescut în Cincinnati, Ohio, Rudy a început să cânte în biserică de la o vârstă fragedă. În anii adolescenței, cânta ca membru al frații Isley cu Kelly, Ronnie și Vernon. În 1957, după moartea lui Vernon, restul de trei elder Isleys s-au mutat la New York pentru a căuta un acord de înregistrare, înregistrând ulterior pentru etichete mai mici până la încheierea unui acord cu RCA Records în 1959, unde au scris, înregistrat și lansat prima lor înregistrare semnificativă, „Shout”. Până în vara acelui an, familia Isley se mutase din Cincinnati într-o casă din Englewood, New Jersey.

după „Shout”, frații au înregistrat pentru alte etichete cu un succes modest, cu excepții, inclusiv hit-ul top 40, „Twist& Shout” și hit-ul Motown, „This old heart of Mine (Is Weak for You)”. În anii 1960, Rudy și frații săi au fondat casa de discuri T-Neck Records pentru a-și promova înregistrările. În urma despărțirii lor cu Motown, au reactivat eticheta și au obținut un premiu Grammy cu „It’ s Your Thing” în 1969. În timp ce Ron Isley a fost solistul proeminent al grupului, Rudy a înregistrat câteva voci principale pe unele Isley Brothers Melodii, după reactivarea T-Neck. După ce grupul s-a reorganizat într-o trupă după includerea fraților mai mici Ernie și Marvin Isley și cumnatul Chris Jasper, Rudy era cunoscut pentru purtarea pălăriilor și a îmbrăcămintei cu blană și era cunoscut și pentru purtarea unui baston. Rudy va împărtăși vocea principală cu frații săi Ron și Kelly pe hituri precum” Fight The Power „și”Livin’ In the Life”. Rudy a cântat, de asemenea, plumb complet pe alte melodii, cum ar fi „You Still Feel the Need” de pe album, Harvest for the World, și hitul lor din 1979, „It’ s a Disco Night (Rock Don ‘ t Stop)”. În 1986, fratele mai mare al lui Rudy, Kelly, a murit brusc de un atac de cord în somn. Moartea lui Kelly l-a devastat pe Rudy, deoarece frații erau apropiați. După înregistrarea albumelor, Smooth Sailin’ și petrece noaptea, Rudy Isley a părăsit definitiv grupul și industria muzicală în 1989 pentru a urma un obiectiv pe tot parcursul vieții de a fi ministru creștin. Rudy a fost introdus ca membru al Isleys la Rock and Roll Hall of Fame în 1992.