Articles

Escherichia coli O157:H7 stress och virulens genuttryck på romansallad med jämförande realtid PCR

livsmedelsburna utbrott tillskrivs kontaminering av färskvaror med Escherichia coli O157: H7 är en växande oro. I synnerhet är bladgröna grönsaker, inklusive sallad och spenat, mottagliga för förorening genom bevattningsvatten, gödsel och livsmedelsförädling och lagring. Överlevnaden av E. coli O157:H7 och naturlig mikroflora på romansallad lagrad vid 4 grader C och 15 grader C under en 9-dagarsperiod utvärderades med plattantal. En tvåstegs omvänd transkription jämförande kvantitativ realtids-PCR-analys användes för att utvärdera uttryck av gener som kodar för A-subenheten av Shiga-toxin 1 och 2 (stx1A och stx2A), intimin (eaeA), flagellin (fliC), Sigmas-general stress Sigma factor (rpoS) och järn superoxiddismutas (sodB) i E. coli O157:H7. Resultaten tyder på att minska lagringstemperaturen från 15 grader C till 4 grader C signifikant (P<0.05) minskade tillväxten av Escherichia coli O157: H7 på romansallad, men livskraftiga populationer kvarstod efter slutet av båda lagringsperioderna. Vid slutet av lagringsperioden observerades en 0, 430 och 0, 180 loggminskning i E. coli O157:H7 vid 4 grader C respektive 15 grader C. Under båda lagringstemperaturerna ökade det totala antalet aeroba plattor under experimentets varaktighet. En ökning av E. coli O157:H7-faldigt uttryck observerades med stx2A. Även om stx1A uppvisade uppreglering för alla lagringsförhållanden observerades variabelt genuttryck under hela lagringsperioden. Dessutom reglerades fliC under lagring vid 15 grader C, medan transkription vid 4 grader C-lagring endast ändrades något. Expression av eaeA var variabel vid 15 grader C med en tendens till nedreglering, men denna gen var något uppreglerad när den lagrades vid 4 grader C. En liten uppreglering av RPO och sodB observerades också vid 4 grader C. Sammanfattningsvis tyder våra resultat på E. coli O157:H7 kan bli mer virulent med långvarig lagring av romansallad, särskilt vid förvaring vid kylda temperaturer.