UHPLC och UPLC är båda vätskekromatografitekniker som används för att separera de olika komponenterna som finns i blandningar. Kommentar: förutsättningen som anges innebär en skillnad mellan UHPLC och UPLC när de faktiskt är samma tekniker. I 2004 lanserade Waters tekniken som kallas UltraPerformance LC (UPLC) baserat på sub 2-mikron porösa partiklar och varumärkesskyddade förkortningen UPLC. Som leverantörer in på marknaden med liknande instrument uhplc myntades som ett sätt att hänvisa till instrument som liknar UPLC eftersom UPLC är en Waters varumärke. De två termerna förstås vara synonyma. Den möjliggörande tekniken här för både uhplc-och UPLC-instrument är sub 2-mikron partiklar; de flesta HPLC – metoder utvecklas på partiklar mellan 2,5-5 mikron i storlek. De mindre sub 2-mikron partiklarna kräver ett högre tryck för att arbeta med så UHPLC-eller UPLC-system måste kunna fungera över 6000 PSI vilket vanligtvis är den övre gränsen för konventionella HPLC.

en blandning är ett ämne som består av två eller flera kemiska grundämnen och föreningar, som inte har bundits samman under en kemisk reaktion. Kommentar:” vätskekromatografi ” är separationen av komponenter som solubiliseras tillsammans i en vätska. Genom att använda en kolonn samverkar/diffunderar komponenterna i blandningen över kolonnen och in i dess porer eller yta i större eller mindre utsträckning och separeras. Eftersom sub 2 mikron partiklar är så små diffusionsvägen mellan provanalyterna och den stationära fasen är kortare och effektiviteten är högre. Fasta kärnpartiklar, som nu ökar, inkapslas av en yta av små partiklar så diffusion är banan mindre still och effektiviteten är högre, men beror fortfarande på ”tjockleken) av partikelskiktet runt den fasta ”kärnan”.
HPLC, UHPLC och UPLC föregångare, förlitade sig på pumpar, som passerade en trycksatt vätska innehållande en provblandning genom absorberande material. Kommentar: pumpar krävs med både UHPLC och UPLC. När du trycker en vätska genom den packade kolonnen krävs en pump som ger mottryck. I vissa fall trycksätts den mobila fasen innan den kommer i kontakt med den analytiska kolumnen, men provet introduceras senare.

under de senaste 6 åren har UHPLC och UPLC kommit fram. Både UHPLC och UPLC gör det möjligt för forskare att brottas med mindre partiklar snabbare än vad som tidigare var möjligt, men det finns viktiga skillnader mellan de två systemen. Kommentar: i stället för att behöva brottas med mindre partiklar, uhplc och UPLC gör det möjligt för forskare att brottas med mer analytiska utmaningar snabbare än vad som tidigare var möjligt.

Vad är UPLC?

UPLC-system (ultra performance liquid chromatography) introducerades först 2004. Genom att nästan fördubbla det totala arbetstrycket (till 15 000 psi) för att få snabbare flödeshastigheter kunde UPLC-Utvecklare uppnå lika eller bättre upplösning LC-separationer i mycket kortare tidsramar. Kommentar: i stället för att ”fördubbla det totala arbetstrycket för att få snabbare flödeshastigheter” är det bättre att säga … ”för att dra nytta av 2 mikron partiklar krävs högre tryck.”Det typiska ID för en UPLC-kolumn är 2.1 mm och i allmänhet är flödeshastigheterna lägre än HPLC, men på grund av effektivitetsökningen, förklarad ovan, reduceras den totala separationstiden. När det gäller effektivitet, noggrannhet och produktivitet var detta goda nyheter för laboratorier världen över. UPLC är en variant av HPLC, även med kolumner och pumpar. Kommentar: oavsett om vi talar om HPLC, UPLC eller UHPLC, var och en av dessa tekniker använder kolumner och pumpar.

Vad är UHPLC?

däremot arbetar UHPLC (ultra high performance liquid chromatography) i 20 000 psi-området. Kommentar: Detta är helt enkelt inte sant. Vissa UHPLC-system kan gå så högt, men inte alla. I allmänhet är UPLC-instrument lägre dispersion, lägre volym (extra kolumn) system som kan fungera vid högre tryck.? Till skillnad från UPLC är namnet inte varumärkesskyddat och kan hänvisa till ett antal tillverkares system. UHPLC-system designades med en låg uppehållsvolym i åtanke. Kommentar: Dwell volume är en term som hänvisar till gradientseparationer; extra kolumnvolym och dispersion är bättre termer att använda. UPLC: er har lägre uppehållsvolymer men det beror på att extrakolumnvolymen minimeras. Att ha en låg volym är inte det enda prestandaattributet för ett UPLC-system. De erbjuder högre effektivitet än UPLC-system, men är också benägna att blockera. Kommentar: vet inte varifrån detta kommer. Om ett prov inte är förberett ordentligt är det möjligt att täppa till en sub 2-mikron UHPLC eller UPLC-kolumn. Det är kolonnen som kan bli igensatt, inte systemet. Artikeln UHPLC eller Core-Shell, som är vinnaren? diskuterar fördelarna med de relativa systemen mer detaljerat.

vad används UPLC-och UHPLC-system för?

UPLC och UHPLC har använts för många ändamål, inklusive juridiska, farmaceutiska och medicinska. Systemen är också viktiga verktyg inom forskning och tillverkning. Utan HPLC, UPLC och UHPLC skulle forskare kämpa för att upptäcka förekomsten av prestationshöjande läkemedel i proverna från idrottare, medan detektering av D-vitaminnivåer i blodserum skulle ta mycket längre tid än det gör idag. Kommentar: hastigheten, upplösningen och känsligheten hos uhplc-och UPLC-instrumenten gör dem idealiska för användning med MS. Överkomliga priser och användarvänlighet av en ny generation av MS instrument gör LC-MS mer praktiskt för fler laboratorier.

dessa tekniker utgör därför ett viktigt steg framåt. Naturligtvis utvecklas ännu snabbare, mer exakta tekniker när du läser den här artikeln. Men för närvarande är UPLC-och UHPLC-systemen fortfarande i framkant av mycket vetenskaplig strävan.på senare tid har framsteg inom både analytisk instrumentering och stationär faskemi lett till att kromatografer omprövar de system och metoder de använder dagligen. Artikeln optimera Core-Shell UHPLC kolumner för att förbättra Protein och peptid separationer behandlar detta mer i detalj.

*förändringar i rött tillhandahålls av
Waters Corporation
34 Maple Street
Milford
MA 01757
USA