hoewel Macon lange tijd als amateur had opgetreden en bekend stond om zijn showmanschap, was zijn eerste professionele optreden in 1921.op een school in Morrison, Tennessee, tijdens een Methodist Church benefiet. In 1923, tijdens een optreden voor the Shriners in Nashville, werd Macon gezien door Marcus Loew van Loews Theatres, die hem vijftien dollar aanbood als hij zou optreden in een theater in Alabama. Macon accepteerde en ging naar Alabama. Na de show werd hij benaderd door de manager van Loews Theatres in Birmingham, die hem wilde inhuren om daar op te treden. Macon ‘ s salaris was een paar honderd dollar per week. Dit leidde tot aanbiedingen van andere theaters in het Loew ‘ s Vaudeville circuit. Op de leeftijd van vijftig, Macon vond zichzelf een succesvolle entertainer. Een rivaal vaudeville circuit, de Keith-Albee-Orpheum Corporation, probeerde hem weg te nemen van het Loew ‘ s circuit, maar hij weigerde.in 1923 begon Macon een tournee door het zuidoosten van de Verenigde Staten, vergezeld door fiddler Sid Harkreader en vijf andere acts. Inmiddels had het meubelfabriek van de gebroeders Sterchi, distributeurs van Vocalion Records, Macon opgemerkt en zijn potentieel als opnamekunstenaar gerealiseerd. Op 8 juli 1924 maakten Macon en Harkreader hun eerste opnamen voor Vocalion in New York City. De sessie die meerdere dagen duurde en achttien nummers werden opgenomen. In 1925, Macon en Harkreader toegevoegd “Dancing Bob” Bradford, een buck danser aan hun act, hun tours op het Loew ‘ s circuit nu opgenomen komedie, buck-dancing en old time Muziek. Eind 1925 ontmoette Macon gitarist Sam McGee, die Macon ‘ s vaste partner zou worden. Op 6 November 1925 traden Macon en Harkreader op in het Ryman Auditorium—de toekomstige thuisbasis van de Grand Ole Opry— in een benefiet voor de politie van Nashville. De show duurde slechts drie weken voordat de WSM Grand Ole Opry werd opgericht.

Macon was een van de eerste artiesten op het nieuwe WSM-radiostation. Op 26 December 1925 verschenen Macon en Oom Jimmy Thompson samen in het WSM Saturday night-programma. Macon ‘ s carrière bij WSM duurde zesentwintig jaar, maar als hij bleef toeren, hij was niet een regelmatige performer in de jaren van de Grand Ole Opry. Begin 1927 richtte Macon de Fruit Jar Drinkers op, bestaande uit Macon, Sam McGee, Kirk McGee en Mazy Todd. De Fruitpotdrinkers registreerden voor het eerst op 7 mei 1927. Hoewel het repertoire van de groep voornamelijk traditionele liederen en fiddle numbers was, namen ze af en toe religieuze liederen op, waarvoor Macon de naam van de groep zou veranderen in the Dixie Sacred Singers.in december 1930 nam Macon op voor Okeh Records en later in 1934 voor Gennett Records. Op 22 januari 1935 begon hij met opnemen voor Bluebird Records met The Delmore Brothers en een paar jaar later in 1938 nam hij op met Glenn “Smoky Mountain” Stagner. Tussen 1930 en 1952 werd Macon vaak vergezeld door zijn zoon Dorris die gitaar speelde. In 1940 kreeg Macon— samen met Opry— oprichter George D. Hay, rijzende Opry-ster Roy Acuff en Dorris Macon-een uitnodiging van Hollywood om deel te nemen aan de Republic Pictures-film Grand Ole Opry. De film bevat zeldzame beelden van het optreden van Macon, waaronder een gedenkwaardig duet van “Take Me Back to My Carolina Home” met Dorris waarin de 69-jarige Macon uit zijn stoel springt en danst gedurende de tweede helft van het nummer. Hoewel Macon toerde met Bill Monroe in de late jaren 1940, hij was niet onder de indruk van de nieuwe bluegrass stijl, noch door de banjo plukken van Monroe ‘ s bandgenoot Earl Scruggs.