Articles

Escherichia coli O157:H7 napětí a virulence genové exprese na Římský salát pomocí komparativní PCR v reálném čase

Alimentárních epidemií připsat kontaminace čerstvých surovin s Escherichia coli O157:H7 jsou rostoucí obavy. Zejména listová zelenina, včetně salátu a špenátu, je náchylná ke kontaminaci zavlažovací vodou, hnojem a postupy zpracování a skladování potravin. Přežití E. coli O157:H7 a přirozenou mikroflóru na Římský salát skladovat při 4 ° C a 15 ° C během 9-ti denní období byla hodnocena deska se počítá. Dvou-krok reverzní transkripce srovnávací kvantitativní real-time PCR assay byla použita k vyhodnocení exprese genů kódující A podjednotky Shiga toxin 1 a 2 (stx1A a stx2A), intimin (eaeA), flagellin (fliC), sigmaS-obecné stres sigma faktor (rpoS) a železo superoxiddismutázy (sodB) v E. coli O157:H7. Výsledky ukazují, že snížení skladovací teploty z 15 stupňů C na 4 stupně C významně (P< 0.05) snížil růst Escherichia coli O157: H7 na římském salátu, životaschopné populace však zůstaly po skončení obou období skladování. Na konci doby skladování, 0.430 a 0.180 log snížení E. coli O157:H7 byla pozorována při 4 ° C a 15 ° C, resp. Při obou skladovacích teplotách se celkový počet aerobních destiček během trvání experimentu zvýšil. U stx2A bylo pozorováno zvýšení exprese E.coli O157:H7 násobně. Ačkoli stx1A vykazovala upregulaci pro všechny podmínky skladování, byla pozorována variabilní genová exprese po celou dobu skladování. Kromě toho byl fliC během skladování při 15 ° C regulován, zatímco transkripce při 4 ° C skladování se změnilo jen nepatrně. Vyjádření eaeA byla proměnná při 15 ° C s tendencí k down-regulaci, nicméně, tento gen byl mírně up-regulovaných, pokud je uchováván při 4 ° C. mírný upregulace rpoS a sodB byl také pozorován při 4 ° C. Na závěr naše výsledky naznačují, E. coli O157:H7 může být virulentnější při dlouhodobém skladování římského salátu, zejména pokud je skladován při chlazených teplotách.