UHPLC a UPLC jsou techniky kapalinové chromatografie používané k oddělení různých složek nalezených ve směsích. Komentář: předpoklad, jak je uvedeno znamená rozdíl mezi UHPLC a UPLC, když ve skutečnosti jsou stejné techniky. V 2004, Waters zahájila techniku známou jako UltraPerformance LC (UPLC) založený na sub 2-mikronové porézní částice a ochrannou známkou zkratkou UPLC. Když prodejci vstoupili na trh s podobnými nástroji, UHPLC byl vytvořen jako způsob, jak odkazovat na nástroje podobné UPLC, protože UPLC je ochranná známka Waters. Tyto dva termíny jsou chápány jako synonymní. Technologie umožňující zde pro UHPLC i UPLC nástroje jsou sub 2-mikronové částice; většina metod HPLC je vyvinuta na částicích o velikosti 2,5 – 5 mikronů. Menší submikronové částice vyžadují vyšší tlak pro práci s UHPLC nebo systémy UPLC musí být schopné pracovat nad 6,000 PSI, což je obvykle horní hranice konvenčních HPLC.

směs je látka obsahující dva nebo více chemických prvků a sloučenin, které nebyly během chemické reakce spojeny dohromady. Komentář: „kapalinová chromatografie“ je oddělení složek rozpuštěných společně v kapalině. Použitím kolony složky ve směsi interagují / difundují napříč kolonou a do jejích pórů nebo povrchu ve větší menší míře a oddělují se. Protože částice sub2 mikronů jsou tak malé, difuzní dráha mezi analyty vzorku a stacionární fází je kratší a účinnost je vyšší. Pevné jádro částice, které jsou nyní na vzestupu, jsou zapouzdřeny do povrchu malých částic tak difúzní cesty je stále menší a účinnost je vyšší, ALE stále závisí na „tloušťka) vrstvy částic kolem pevné „jádro“.
HPLC, UHPLC a UPLC předchůdce, se spoléhal na čerpadla, které prošly tlakovou kapalinou obsahující vzorek směsi přes savé materiály. Komentář: čerpadla jsou vyžadována jak u UHPLC, tak u UPLC. Když zatlačíte kapalinu přes zabalený sloupec, je vyžadováno čerpadlo, které vytváří protitlak. V některých případech je mobilní fáze natlakována před tím, než přijde do styku s analytickou kolonou, ale vzorek je zaveden později.

během posledních 6 let se do popředí dostaly UHPLC a UPLC. Oba UHPLC a UPLC umožnit vědci se potýkají s menší částice rychleji, než bylo dříve možné, nicméně, klíčové rozdíly mezi těmito dvěma systémy. Komentář: Spíše než muset poprat s menší částice, UHPLC a UPLC umožnit vědci se potýkají s více analytické problémy rychleji, než bylo dříve možné.

co je to UPLC?

systémy UPLC (ultra performance liquid chromatography) byly poprvé představeny v roce 2004. Téměř zdvojnásobení celkové provozní tlak (15 000 psi) s cílem získat rychlejší průtoky, UPLC vývojáři byli schopni dosáhnout stejné nebo lepší rozlišení LC separace v mnohem kratší časové rámce. Komentář: spíše než „zdvojnásobení celkového provozního tlaku za účelem dosažení rychlejších průtoků“ je lepší říci…“, aby bylo možné využít 2 mikronové částice, jsou vyžadovány vyšší tlaky.“Typické ID sloupce UPLC je 2.1 mm a obecně průtoky jsou nižší než HPLC, ale v důsledku zvýšení účinnosti, vysvětleného výše, se celková doba separace zkracuje. Z hlediska efektivity, přesnosti a produktivity to byla dobrá zpráva pro laboratoře po celém světě. UPLC je varianta HPLC, také pomocí sloupů a čerpadel. Komentář: ať už mluvíme o HPLC, UPLC nebo UHPLC, každá z těchto technik používá sloupce a čerpadla.

co je UHPLC?

naproti tomu UHPLC (ultra high performance liquid chromatography) pracuje v rozsahu 20 000 psi. Komentář: to prostě není pravda. Některé systémy UHPLC mohou jít tak vysoko, ale ne všechny. Obecně UPLC nástroje jsou nižší disperze, nižší objem (extra sloupec) systémy, které mohou pracovat při vyšších tlacích.? Na rozdíl od UPLC, název není ochrannou známkou, a může odkazovat na řadu systémů výrobců. Systémy UHPLC byly navrženy s ohledem na nízký objem prodlevy. Komentář: objem prodlevy je termín, který odkazuje na separace gradientu; extra objem sloupce a disperze jsou lepší termíny k použití. Uplc mají nižší objemy prodlevy, ale je to proto, že objem extra sloupce je minimalizován. Nízká hlasitost není jediným atributem výkonu systému UPLC. Nabízejí vyšší míru účinnosti než systémy UPLC, i když jsou také náchylné k zablokování. Komentář: nejste si jisti, odkud to pochází. Pokud vzorek není správně připraven, pak je možné ucpat sub 2-mikron UHPLC nebo UPLC sloupec. Je to sloupec, který se může ucpat, ne systém. Článek UHPLC nebo Core-Shell, který je vítězem? podrobněji pojednává o výhodách relativních systémů.

k čemu se používají systémy UPLC a UHPLC?

UPLC a UHPLC byly použity pro mnoho účelů, včetně právních, farmaceutických a lékařských. Systémy jsou také důležitými nástroji v oblasti výzkumu a výroby. Bez HPLC, UPLC a UHPLC, vědci se snaží zjistit přítomnost drogy zvyšující výkonnost ve vzorcích poskytnutých sportovci, zatímco detekci hladiny vitaminu D v séru by trvat daleko déle, než to dělá dnes. Komentáře: rychlost, rozlišení a citlivost UHPLC a UPLC nástroje, aby se ideálně hodí pro použití s PANÍ Cenová dostupnost a snadné použití nové generace nástrojů MS činí LC-MS praktičtější pro více laboratoří.

tyto technologie proto představují důležitý krok vpřed. Při čtení tohoto článku se přirozeně vyvíjejí ještě rychlejší a přesnější technologie. V současné době však systémy UPLC a UHPLC zůstávají na špici mnoha vědeckých snah.

v poslední době vedly pokroky v analytické přístrojové a stacionární fázové chemii chromatografy k přehodnocení systémů a metod, které denně používají. Článek optimalizující UHPLC sloupce Core-Shell pro zlepšení separace proteinů a peptidů se tím zabývá podrobněji.

* změny v červené barvě poskytované
Waters Corporation
34 Maple Street
Milford
MA 01757
USA