Úvod

Atopická dermatitida (AD) je běžné, nevyléčitelné, chronické zánětlivé kožní onemocnění s vysokou prevalencí u kojenců, které způsobuje značné snížení kvality života.1-4 navzdory své prevalenci a morbiditě v současné době existuje pro AD jen málo cílených terapií. Základem řízení je symptomatické úlevy založené na použití nespecifické protizánětlivé topické steroidy, inhibitory kalcineurinu, a systémová imunosupresiva, jako je azathioprin, cyklosporin, a prednisolon.4,5 tyto terapie jsou spojeny s nepříznivými vedlejšími účinky a existuje velká neuspokojená klinická potřeba rozvoje cílených AD terapií, které jsou účinné, ekonomické a bezpečné pro použití, zejména u mladších dětí.5

klíčová zpráva v 20066 prokázáno, že jakékoliv značky zatím identifikovány, ztráta-of-function mutace v genu pro epidermální bariéru bílkovin profilaggrin (FLG) ukazují nejsilnější asociace s AD.7,8 Profilaggrin, původně nazvaný „histidin-rich protein“, protože jeho velmi vysoká (~10%), histidin obsahu,9 je velký (>400 kDa) polypeptid syntetizován v epidermální granulární vrstvy. Akumuluje se v keratohyalinových granulích před defosforylací a zpracováním prostřednictvím meziproduktů s nižší hmotností na ~37 kDa filaggrinové monomery.10,11 Filaggrin agregáty cytokeratins 1 a 10 a jiné meziprodukty vláken v granulární vrstvy keratinocytů, „hroutí“ je jako součást epidermální terminál diferenciace procesu k formě corneocytes a zploštělé squames, které jsou kritické pro bariérové funkce kůže.12,13 Filaggrin je nakonec deiminated a štěpen proteázami, včetně kalikrein 5, kaspázy-14, elastáza-2, matripase, a prostatin, do jeho součásti hygroskopický aminokyseliny, které jsou hlavní složkou „přírodní hydratační faktor“ (NMF), který dále přispívá k funkci bariéry, přes hydrataci pokožky a zachování stratum corneum kyselost.14-16

navzdory genetické asociaci mezi mutacemi FLG a AD je nejsilnější ze všech markerů, 6 většina jedinců AD je divokého typu pro FLG.17 u těchto jedinců epigenetické účinky spojené se závažností onemocnění a zánětlivým prostředím cytokinů snižují zpracování filaggrinu a hladiny NMF, čímž narušují hydrataci pokožky a bariérovou integritu.18,19 abnormální proteolytické zpracování profilaggrinu na funkční monomery filaggrinu v důsledku nerovnováhy proteázy a antiproteázy může také hrát roli ve vývoji onemocnění u pacientů s FLG divokého typu.20 narušenou kožní bariéru, ať už v důsledku mutace FLG nebo epigenetically ohrožena profilaggrin zpracování, výsledky v xerózy, vniknutí alergenu, a AD nemoci, iniciace a exacerbace.21.

Hodně z aktuální výzkumná činnost je zaměřena na další pochopení zapojení filaggrin v etiologii AD a převedení těchto poznatků do nových terapeutických přístupů pro toto chronické a zakázání onemocnění.Této částky bylo 7,21 Otsuka et al22 promítán 1120 sloučenina knihovna bioactives a hlásil, že JTC801, čtyři-aminochinolinu derivát, měl schopnost zvýšit FLG, přepis a překlad v lidské kůži-ekvivalentní model. Genovou terapii, přístup byl použit úspěšně doručit filaggrin monomeru kódování postavit do FLG-nedostatečné (šupinatá ocas) modelu u myší, a tím obnovení normální kožní bariéry fenotyp.23

v tomto článku navrhujeme, že jednodušší nutriční suplementace l-histidinu může mít příznivý potenciál v AD.

l-histidin je proteinogenní aminokyselina, která není syntetizována savci. U lidských kojenců je považován za „nezbytný“ kvůli nízkým hladinám střevní mikroflóry syntetizující histidin a minimální aktivitě karnosinázy, která pomáhá při uvolňování volného l-histidinu z karnosinu.24 náš zájem o použití l-histidinu v AD byl stimulován několika pozorováními. Za prvé, u kojenců i dospělých vede dieta s nedostatkem histidinu k ekzematózní vyrážce.25 U hlodavců, 3H-histidin je rychle (1-2 hodiny) začleněna do profilaggrin v keratohyalin granule po intraperitoneální nebo intradermální injection14,26 a během 1-7 dní je vydána jako free NMF aminokyselin v horní stratum corneum.14 kromě toho jsou snížené hladiny stratum corneum volných NMF aminokyselin, včetně histidinu a jeho okyselujícího metabolitu kyseliny urokanové (UCA), spojeny se závažností onemocnění AD a genotypem FLG.27,28

Vzhledem k tomuto důkazy pro závislost filaggrin zpracování a NMF formace na vhodné úrovně l-histidin, my jsme předpokládali, že l-histidin by jak zvýšit filaggrin zpracování in vitro, orgánových analýzách, modelu lidské kůže a mají blahodárné účinky jako potravinový doplněk u pacientů s atopickou dermatitidou.

Metody

In vitro studie

Lidských keratinocytů kultury stavu,

Zvěčněn lidské HaCaT keratinocytes29 pasáží 35-41 (dar od Dr. J. Dřevo, University of Dundee; původu – německé Výzkumné Centrum Rakoviny (DKFZ), Heidelberg, Německo) byly nasazeny v šest-no buněčné kultivační destičky (Corning Incorporated, Corning, NY, USA) v D-MEM/F-12 střední s GlutaMAX (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) doplněném 10% fetálního bovinního séra a 1% penicilin/streptomycin. Jednovrstvé kultury byly typicky konfluentní po 48-72 hodinách. Ve dnech 15-21 byla kultivační média doplněna dalšími 1-5 mM aminokyselin (l-lysin, l-histidin nebo d-histidin; Sigma-Aldrich Co. , St. Louis, MO, USA). Buňky byly sklizeny a lyzovány laemmli pufrem (Sigma-Aldrich Co.) dne 21.

SDS-PAGE a Western-blotting

Celkový buněčný protein z HaCaT monovrstvy byl vyřešen tím, že 9% dodecyl sulfátu sodného polyakrylamidové gelové elektroforézy (SDS-PAGE) a Western blotting pomocí standardních protokolů. Byly použity primární protilátky proti následujícím antigenům: filaggrin (kozí polyklonální protilátka; Santa Cruz Biotechnology Inc., Dallas, TX, USA) a keratin 10 (králík monoklonální; Abcam, Cambridge, UK). Denzitometrická analýza byla provedena pomocí zobrazovacího systému VersaDoc (Bio-Rad Laboratories Inc., Hercules, CA, USA); všechny pásy byly korigovány na pozadí a normalizovány na keratin 10.

orgánových analýzách kůže-ekvivalentní modely a Lucifer Yellow penetrační test

Dospělé lidské dermální fibroblasty (HDFs; Thermo Fisher Scientific) pasáží 3-5 byly smíchány s krysí ocas Kolagenu I (Thermo Fisher Scientific) a nechá se nastavit v šest-no buněčné kultury desky. Po 20-30 minutách byly na apikální aspekt gelů naočkovány Hacaty pasáží 35-41. Na HaCaT buňky dosažení konfluence, celé kultury (včetně HDFs-s obsahem kolagenu struktury) byly umístěny na plastové mřížky, vytváří vzduch–kapalina rozhraní s apikální aspekt vystaveny vzduchu. Kultury ekvivalentní kůži byly udržovány celkem 19 dní a doplněny ve dnech 13-19 5 mM buď l-lysinu, l-serinu nebo l-histidinu (Sigma-Aldrich Co.). Vzorky byly dvakrát promyty v PBS, fixovány ve formalinu, vloženy do parafínu a rozřezány. Pro barvení hematoxylinem a eosinem byly použity standardní protokoly. Na den 19, kůže modely vystavoval keratin 10, involucrin, filaggrin, a loricrin (data nejsou prezentována), a to zejména v suprabazálních vrstvách, což naznačuje, epidermální-jako diferenciace.

Pro penetrační test, 50 µL 5 mM Lucifer Yellow CH disiřičitan barvivo (Sigma-Aldrich Co.) byl aplikován na apikální povrchu každého modelu kůže v centru v 5-minutových intervalech po dobu celkem 10 minut, předtím, než je smyta s PBS, fixovány formalínem, a vložené do parafínu. Odparafinované a hydratované příčné řezy 3 µm byly vizualizovány pomocí fluorescence při 455-495 / 505-555 nm. Lucifer žlutá je ve vodě rozpustné fluorescenční disulfonová kyselina aniontové barvivo často používané ke studiu morfologie neuronů. Byl použit k posouzení permeability bariéry myší a modelů ekvivalentních kůži.30-33

i když naše kůže model nevykazoval dobře zavedené epidermální stratum corneum pod hematoxylin a eosin barvení, minimální barvivo proniknutí pokožkou model byl vidět na 5 minut, což svědčí o funkční bariéru, tzn., že z lidské epidermis. Penetrace barviva nebyla v celém vzorku konfluentní. Proto byla průměrná procentuální penetrace barviva vypočtena ve třech po sobě jdoucích mikroskopických polích v každé sekci (z každého modelu kůže bylo skórováno celkem pět sekcí).

Klinické nutriční suplementace pilotní studie,

Témata

pro Dospělé (>18 let věku) pacienty s diagnózou AD podle „BRITSKÉ Strany Práce, Diagnostická Kritéria Atopické Dermatitidy“ 34 byli přijati. Kritéria pro vyloučení byly těhotenství nebo kojení, onemocnění jater, působení přirozeného nebo umělého ultrafialového záření, imunosuprese v důsledku nemoci nebo léky, nebo používat Čínské bylinné medicíny na 3 měsíce předcházejícího studia. Subjektům bylo povoleno pokračovat v používání nemedicinálních změkčovadel a přerušované záchranné terapie lokálních steroidních krémů, které byly zaznamenány ve formulářích kazuistiky při každé návštěvě.

Studie

Toto byla randomizovaná, double-blind, placebem kontrolované, zkřížené, nutriční doplněk pilotní studii, která zkoumala účinky l-histidin u dospělých pacientů s AD. Subjekty byly náhodně pomocí Výzkumu Randomizer (www.randomizer.org) buď do skupiny A nebo Skupiny B. Počáteční AD onemocnění, závažnost byla hodnocena vyškoleným dermatologie výzkum sestra pomocí validované Bodování Atopické Dermatitidy (SCORAD) opatření.35 subjekty byly také vyškoleny k provádění prvního týdenního sebehodnocení závažnosti onemocnění AD pomocí validovaného opatření ekzému orientovaného na pacienta (POEM).35 Po 2-týdenní wash-out perioda, ve které subjekty byly požádány, ne používat jakýkoliv léčivý přípravek, pro jejich REKLAMU, stejné opatření byly opakované a pacientů byly poskytnuty stejné sáčky s obsahem 4 g l-histidin (Skupina A), nebo 4 g placeba (erythritol); Skupinu B), který byl užíván jednou denně, se rozpustí v ranní ovocný nápoj. Pacienti se vrátil 4 a 8 týdny později a SCORAD byl proveden jeden, trénoval dermatologie výzkum sestra při každé návštěvě. Pacienti ve Skupině A pak přešli na placebo a ty ve Skupině B užívali l-histidin pro příštích 8 týdnů s SCORAD provádí vyškolení dermatologie výzkum sestra ve 4-týdenních intervalech a BÁSEŇ dotazníků byla dokončena v týdenních intervalech.

Regulační a etické schválení,

spojeného KRÁLOVSTVÍ pro Léky a Zdravotní Produkty Regulační úřad potvrdil, že tento nutriční suplementace pilotní studie na účinky aminokyselina, není klasifikován jako „Klinické Hodnocení Hodnoceného Léčivého Přípravku“. Bolton Výzkum Etická komise dala svolení pro studium (#08/H1009/52), která byla provedena v souladu s Helsinskou Deklarací z roku 1964 a EMEA Pokyny pro správnou Klinickou Praxi s písemný informovaný souhlas získán od všech předmětech.

statistika

analýza rozptylu (jednocestná nebo obousměrná, s Dunnettovými a Bonferroniho post hoc testy) a jednoduchá lineární regresní analýza byly použity pro studie in vitro. Ty byly provedeny pomocí GraphPad Prism verze 4.00 pro Windows (GraphPad software, San Diego, CA, USA). Údaje jsou uvedeny jako střední hodnoty ± směrodatná odchylka.

Statistická analýza klinické pilotní studie byl proveden nezávislý statistický analytik (StatSol, Sereetz, Německo) pomocí SPSS verze 15. Data jsou zobrazena jako průměrné ± standardní chyby a význam rozdílů mezi prostředky byl vyjádřen jako oboustranná přesná p-hodnota testů Wilcoxon rank-sum. V klinických I in vitro studiích byly p-hodnoty <0,05 považovány za významné.

Výsledky

l-histidin účinky na profilaggrin zpracování a funkce kožní bariéry in vitro,

přídavkem l-histidinu na jednovrstevné kultury HaCaT keratinocytů (N=6) způsobila pokles ve velkém 120 kDa profilaggrin intermediate11 a současné zvýšení 37 kDa filaggrin monomery (Obrázek 1). Tento nárůst v 37 kDa:120 kDa poměr (průměr 1.69, SD 0.46) byl l-histidin dávka (0-5 mM) závislé (P<0.01), ale není vidět, když keratinocyty byly inkubovány s 5 mM d-histidin (průměr 0.68, SD 0.13) nebo l-lysin (průměr 1.02, SD 0.37) (Obrázek 1).

Obrázek 1 L-histidinu zvyšuje filaggrin tvorbu bílkovin v splývající lidské (HaCaT) keratinocytů monovrstvy. A) reprezentativní západní bloty vykazující pokles 120 kDa filaggrinu a zvýšení 37 kDa filaggrinu po léčbě L-histidinem. (B) L-lysin a D-histidin neměl žádný významný účinek na filaggrin exprese proteinů, zatímco L-histidin zvýšil na 37 kDa až 120 kDa filaggrin poměr (P<0.01) ve srovnání s kontrolami. (C) L-histidin zvýšil poměr 37 kDa: 120 kDa filaggrinu v závislosti na dávce (R2=0,54, P<0,01). Chybové sloupce představují průměr ± SD, kde n=6. Všechny pásy byly standardizovány na úklid proteinu keratin 10 Kontrola zatížení. **p<0.01. zkratky: od, optická hustota; WB, Western blot.

zkoumat účinek l-histidin na epidermální bariérové funkce orgánových analýzách kůže-ekvivalentní kultur (Obrázek 2A) byly inkubovány s 5 mM l-histidin (průměr 3.60, SD 0.88), což vedlo k výraznému snížení pronikání Lucifer Žluté fluorescenční barvivo (N=5, P<0.01) ve srovnání s kontrolou (průměrný 7.67, SD 0.37). Stejná koncentrace l-lysinu (průměr 8,78, SD 1,55) nebo L-serinu (průměr 7,64, SD 2,00) neměla žádný vliv na penetraci barviva (obrázek 2B).

Obrázek 2 L-histidinu zvyšuje bariérovou funkci orgánových analýzách kůže model, jak je uvedeno po průniku Lucifer Žluté fluorescenční barvivo. (A) reprezentativní obraz orgánových analýzách kůže model s Luciferem Žluté barvivo vidět pod fluorescence a H&E barvení. B) modely kůže pěstované v 5 mM L-histidinu měly sníženou penetraci barviva (N=5; P<0,01), zatímco L-lysin a L-serin neměly žádný vliv na bariérovou funkci. Poznámka: * * p<0.01, n=5. zkratka: H& E, hematoxylin a eosin.

Klinické nutriční suplementace pilotní studie,

Subjektů demografie a AD závažnost

Dvacet čtyři dospělé s AD byly promítány a randomizováno do dvou léčebných skupin. Pacienti ve Skupině A obdržel l-histidin, v období léčby 1 z 8 týdnů, následované placebem v léčbě období 2, zatímco u pacientů ve Skupině B užívali placebo následované l-histidin (Obrázek 3A). Tři pacienti (jeden ve skupině A a dva ve skupině B) byli ztraceni ve studii po období vymývání (obrázek 3B). Zbývající pacienti vstupující do studie byl průměr (standardní chyba průměru ) věk 25,9 (1.6) let a 27,6 (1.6) let ve Skupinách a a B, v uvedeném pořadí; 55% pacientů ve Skupině A a 70% ve Skupině B byly ženy. Většina pacientů byli Běloši s jedním pacientem z Asie a jeden z Asijské/Kavkazské rasy ve Skupinách a a B, resp.

Obrázek 3 Klinické studie protokolu a údaje o pacientovi. (A) schéma znázorňující protokol studie, (B) pacienti vyplňovali dotazníky POEM týdně a (C) dispozice pacientů.Tam byla dobrá korelace mezi SCORAD a BÁSEŇ skóre (R2=0.62) ve studii pacientů ve Skupině A () (n=11) a Skupiny B () (n=10) v týdnu 0. Mezi oběma skupinami nebyl žádný rozdíl v průměrných skóre SCORAD nebo POEM (P=0,86). zkratky: Báseň, měření ekzému orientovaného na pacienta; SCORAD, bodování atopické dermatitidy; WO, vymývací období.

Oba zdravotníkem zaznamenal SCORAD a pacient-zaznamenal BÁSNĚ byly použity jako ověřena opatření AD závažnosti onemocnění.35 v týdnu 0 nebyl mezi skupinami a (N=11) a B (N=10 ) významný rozdíl v průměrných skóre (SEM ) SCORAD (31,9 a 28,3) a poem (18,4 a 16,7). U všech pacientů existovala silná korelace mezi skóre SCORAD a POEM v týdnu 0 (R2=0, 62) (obrázek 3C).

Účinky l-histidin nutriční suplementace na INZERÁT závažnost

Po l-histidin (období 1) doplnění, došlo k výraznému snížení z týdne 0 skóre SCORAD (34%, P= 0.0029 a 32%, P=0.0029; Obrázek 4A) a BÁSEŇ (39%, P=0.0020 a 39%, P=0.0010; Obrázek 4B), skóre ve Skupině A v týdnech 4 a 8, resp. Žádné významné snížení závažnosti onemocnění byl pozorován ve Skupině, které bylo podáváno placebo během období od 1. v týdnech 4 nebo 8 (SCORAD: -16%, P= 0.3223 a 6%, P=0.5391; BÁSEŇ: 2%, P=0.8438 a 16%, P=0.2695), respektive (Obrázek 4A a B). V období 2, tam byl důkaz, že předměty ve Skupině B, kteří přešli z placeba na l-histidin, ukázal zlepšení své REKLAMY závažnosti onemocnění, i když carry-over efekt l-histidin ve Skupině A po tuto dobu brání smysluplné analýzy studie po crossover.

Obrázek 4 Účinky L-histidin nutriční suplementace na INZERÁT závažnosti onemocnění. (A) SCORAD a (B) BÁSEŇ skóre (průměr ± SEM) byly významně sníženy ve Skupině A () pacientů v týdnech 4 a 8 (SCORAD, P=0.0029 a P=0.0029; BÁSEŇ, P=0.0020 a P=0.0010, v tomto pořadí) v období od 1, zatímco placebo neměl žádný vliv ve Skupině B () pacientů v období 1 (SCORAD, P=0.3223 a P=0.5391; BÁSEŇ, P=0.8438 a P=0.2695, respektive). Existuje jasný“přenosový“ účinek L-histidinu ve skupině a mezi týdny 8 a 12, což vylučuje smysluplnou statistickou analýzu v průběhu studijního období 2. zkratky: AD, atopická dermatitida; báseň, měření ekzému orientovaného na pacienta; SCORAD, bodování atopické dermatitidy; SEM, standardní chyba průměru; WO, vymývací doba.

Nežádoucí účinky

Potenciální nežádoucí účinky byly sledovány a zaznamenávány v průběhu studie. Nebyly zaznamenány žádné nežádoucí účinky přímo spojené s podáním l-histidinu nebo placeba.

Diskuse

Aktuální REKLAMNÍ terapie je založena na využití paliativní změkčovadel a protizánětlivé léky, jako jsou lokální kortikoidy, nebo inhibitorů kalcineurinu, s léčbu superinfekce, zejména Staphylococcus aureus a Herpes simplex, kdy to nastane. Pokud je lokální léčba neúspěšná, je nutná systémová léčba založená na silných lécích, jako jsou kortikosteroidy, methotrexát, azathioprin, cyklosporin A nebo mykofenolát mofetil. Mezi známé účinky dlouhodobého užívání systémových kortikosteroidů patří osteoporóza, katarakta, hypertenze a hyperglykémie. Imunosupresiva, jako je cyklosporin a, azathioprin mají také vážné potenciální vedlejší účinky, včetně hematologických abnormalit, predispozice k život ohrožující infekce, poškození jater a selhání ledvin, a proto vyžaduje intenzivní dohled dohled lékaře.5-36 Vzhledem k vysoké prevalenci AD (až 16% děti1 a 10% adults2 po celém světě), tyto nežádoucí účinky uložit značnou zátěž na jednotlivých pacientů a vysoké finanční náklady pro systémy zdravotní péče a společnost. V současné době probíhají klinické studie s biologickými látkami působícími na prvky imunitního systému, ale pokud budou účinné, budou drahé a pravděpodobně budou omezeny na nejzávažnější AD rezistentní na léčbu. Přetrvávají obavy o bezpečnost této třídy látek, zejména ohledně zvýšeného rizika infekce a malignity.5,36 velká neuspokojená klinické třeba proto zůstává pro bezpečné, pohodlné, cílené nesteroidní intervence vhodné pro dlouhodobé použití v řízení AD, a to zejména u dětí.

HaCaT monovrstvy pěstuje v l-histidin-obohaceného média byly spojeny s významně zvýšenou expresi 37 kDa filaggrin monomery relativní 120 kDa filaggrin intermediate. Žádné zvýšení exprese filaggrin monomery byl viděn s médii obohacen o l-lysin a d-histidin, strukturálně podobné, ale biologicky neaktivních izomerů l-histidin. Mechanismus, kterým l-histidin rozšířené filaggrin zpracování enantiomer-specifickým způsobem je nejasný, i když l-histidin je častým účastníkem enzymatické reactions37 vzhledem k amphotericity jeho imidazolu straně řetězce.

37 kDa filaggrin monomery jsou meziprodukty pro filaggrin proteolýzy, které jsou dále degradovány na menší filaggrin peptidové fragmenty proteázy včetně calpain-1 a kaspázy-14 a konečně do volné aminokyseliny tím, že bleomycin hydrolázy.38 Očekává se, že zvýšená tvorba monomerů 37 kDa filaggrinu l-histidinem zlepší agregaci keratinu a povede ke zvýšení hladin NMF složek volných aminokyselin. l-histidin je hygroskopický a tato schopnost zachytit a zadržet vodu z něj činí důležitou složku NMF.14 schopnost l-histidinu ke zvýšení filaggrin zpracování s následným zlepšení bariérové funkce kůže je podporován naše zjištění, že kožní ekvivalenty pěstuje v l-histidin-obohacená média jsou odolnější vůči pronikání Lucifer Žluté fluorescenční barvivo. Pozorovaný účinek může být způsoben buď zlepšení keratin agregace nebo zvýšená hladina NMF v kůži modely důsledku zvýšené substrátu (tj. více filaggrin monomery) dostupnost pro proteolytické degradaci, nebo obojí. U jedinců s wild-type FLG nebo heterozygotní ztráta-of-function mutace FLG, l-histidin, může zlepšit příznaky onemocnění tím, že zvyšuje filaggrin tvorbu a doplnění NMF výroby, zatímco u pacientů s homozygotní mutace FLG, l-histidin, může zvýšit množství NMF v kůži. Ve všech případech se očekává, že zvýšení tvorby filaggrinu a / nebo doplnění NMF zlepší funkci kožní bariéry a sníží zátěž AD.

použití primárních lidských keratinocytů namísto Hacatových buněk pro test bariérové funkce může být argumentováno jako „fyziologičtější“. 39, kteří ukázali, že HaCaT buňky, Kultivované na rozhraní vzduch-kapalina na různých maticích sloužících jako dermální ekvivalenty, lze použít k vytvoření vysoce diferencovaných organotypických struktur ekvivalentních kůži in vitro. Na rozdíl od primárních keratinocytů, které jsou normálně odvozeny ze vzorků lidské předkožky, má buněčná linie HaCaT standardizovanou kvalitu, protože je nezávislá na variacích dárců.

pilotní studie klinické nutriční suplementace naznačuje, že perorální L-histidin podávaný jednou denně po dobu 4 týdnů je spojen se zlepšením klinických příznaků a symptomů dospělých pacientů s AD. V obou klinik-zaznamenal (SCORAD) a pacient-zaznamenal (BÁSEŇ) opatření závažnosti onemocnění, byl tu ~40% pokles v REKLAMNÍ činnost, po 4 týdnech léčby, které je podobné jako hlášené z používání mid-potence (Skupina III) lokální kortikosteroidy.40 blahodárné účinky pozorované ve Skupině pacientů přetrvává po dobu několika týdnů po crossover od l-histidinu s placebem, což naznačuje delší prospěch l-histidin léčby. Důležité je, že nebyly hlášeny žádné nežádoucí účinky, které by byly způsobeny suplementací l-histidinem.

Jsme prokázali, že in vitro, l-histidin, koncentraci závislé zvýšení 37 kDa filaggrin monomeru, tvorbě a l-histidin, spojené zlepšení bariérové funkce kůže-ekvivalentní model. Toto pozorování koreluje s důkazy z pilotní klinické nutriční studie, že perorální L-histidin může mít terapeutický přínos v AD. Ačkoli existují omezení týkající se velikosti vzorku naší pilotní studie, pokud jsou konzistentní, výsledky naznačují, že perorální L-histidin jednou denně má podobné účinky v AD jako účinky hlášené pro lokální kortikosteroidy střední účinnosti (skupina III).40

Tyto připomínky, když v kombinaci s jeho ověřený bezpečnostní profil, naznačují, že l-histidin nutriční suplementace může být bezpečné, pohodlné, nesteroidní intervence vhodné pro dlouhodobé použití v řízení AD, a to zejména u dětí.

Poděkování

Tato studie byla podpořena granty od Skotské Zahraničí Výzkumný Student Award, University of Edinburgh College of Medicíny a Veterinárního lékařství, PhD Stipendium, a University of Manchester. CEMG je vedoucím výzkumným pracovníkem Národního institutu pro výzkum zdraví. Děkujeme Manchester Dermatology Center research nurses za řízení klinické části tohoto projektu a také děkujeme všem dobrovolníkům pacientů za účast v této studii.

Autor příspěvků

Všichni autoři přispěli k analýze dat, přípravě a kriticky reviduje papír, dal konečné schválení verze, která bude zveřejněna, a souhlasím s tím, být odpovědný za všechny aspekty práce.

Zpřístupnění

CEMG zprávy grantů z Zymogenetics, Stiefel, a Regeneron, granty a osobní poplatků od společnosti Novartis a Pfizer. NKG je zakládajícím ředitelem Curapel, spin-out společnosti University of Manchester vlastnící patenty v této oblasti. Ostatní autoři nehlásí žádné střety zájmů v této práci.

Brown SJ, McLean WHI. Ekzém genetika: současný stav znalostí a budoucí cíle. J Invest Dermatol. 129:543–552.

Brown SJ, McLean WHI. Jedna pozoruhodná molekula: filaggrin. J Invest Dermatol. 2012;132:751–762.

Epp N, Fürstenberger G, Müller K, et al. 12R-nedostatek lipoxygenázy narušuje funkci epidermální bariéry. Jiří Biol. 2007;177:173-182.

		Williams H, Robertson C, Stewart, et al. Celosvětové rozdíly v prevalenci příznaků atopického ekzému v mezinárodní studii astmatu a alergií v dětství. J. 1999;103:125–138.
		Rönmark EP, Ekerljung L, Lötvall J, et al. Ekzém u dospělých: prevalence, rizikové faktory a vztah k onemocněním dýchacích cest. Výsledky rozsáhlého průzkumu populace ve Švédsku. Br J Dermatol. 2012;166:1301–1308.
		Watson W, Kapur s. atopická dermatitida. Alergie Astma Clin Immunol. 2011; 7 (Suppl 1): S4.
		Weidinger S, Novak N. atopická dermatitida. Lanceta. 2016;387:1109–1122.
		Katoh N. budoucí perspektivy v léčbě atopické dermatitidy. J. Dermatol. 2009;36:367–376.
		Palmer CNA, Irvine AD, Terron-Kwiatkowski A, et al. Běžné varianty ztráty funkce epidermálního bariérového proteinu filaggrin jsou hlavním predispozičním faktorem atopické dermatitidy. Nat Genet. 2006;38:441–446.
			Irvine AD, McLean WHI, Leung DYM. Filaggrinové mutace spojené s kožními a alergickými onemocněními. N Engl J Med. 2011;365:1315–1327.
		Voorhees JJ, Chakrabartim SG, Bernstein IA. Metabolismus proteinu „bohatého na histidin“ při normální a psoriatické keratinizaci. J Invest Dermatol. 1968;51:344–354.
		ED Robertson, Jez L, Romanowska M, Leigh IM, Panteleyev AA. ARNT řídí expresi epidermálních diferenciačních genů prostřednictvím cest závislých na HDAC a EGFR. J Cell Sci. 2012;125:3320–3332.
		Lynley AM, Dale BA. The characterization of human epidermal filaggrin. A histidine-rich, keratin filament-aggregating protein. Biochim Biophys Acta. 1983;744:28–35.
		Gruber R, Elias PM, Crumrine D, et al. Filaggrin genotype in ichthyosis vulgaris predicts abnormalities in epidermal structure and function. Am J Pathol. 2011;178:2252–2263.
		Scott IR, Harding CR, Barrett JG. Histidine-rich protein of the keratohyalin granules. Zdroj volných aminokyselin, kyseliny urokanové a pyrrolidonkarboxylové kyseliny ve stratum corneum. Biochim Biophys Acta. 1982;719:110–117.
		Hoste E, Kemperman P, Devos M, et al. Kaspáza-14 je nutná pro degradaci filaggrinu na přírodní zvlhčující faktory v kůži. J Invest Dermatol. 2011;131:2233–2341.
		McAleer MA, Irvine AD. Multifunkční role filaggrinu při alergickém onemocnění kůže. J. 2013;131:280–291.
		Brown SJ, Relton CL, Liao H, et al. Filaggrin null mutace a dětský atopický ekzém: populační případová kontrolní studie. J. 2008;121:940–946.e3.
		Kezic S, O ‚ Regan GM, Yau N, et al. Hladiny produktů degradace filaggrinu jsou ovlivněny jak genotypem filaggrinu, tak závažností atopické dermatitidy. Alergik. 2011;66:934–940.
			Howell MD, Kim BE, Gao P, et al. Cytokinová modulace atopické dermatitidy filaggrinové kožní exprese. J Allergy Clin Immunol. 2009;124:R7–R12.
		Tan SP, Abdul-Ghaffar S, Weller RB, Brown SB. Protease-antiprotease imbalance may be linked to potential defects in profilaggrin proteolysis in atopic dermatitis. Br J Dermatol. 2012;166:1137–1140.
		Cabanillas B, Novak N. Atopic dermatitis and filaggrin. Curr Opin Immunol. 2016;42:1–8.
		Otsuka A, Doi H, Egawa G, et al. Možná nová terapeutická strategie pro regulaci atopické dermatitidy prostřednictvím upregulace exprese filaggrinu. J. 2014;133:139–146.e1-10.
			Stout TE, McFarland T, Mitchell JC, Appukuttan B, Stout JT. Rekombinantní filaggrin je internalizován a zpracován pro korekci nedostatku filaggrinu. J Invest Dermatol. 2014;134:423–429.
				Bando K, Shimotsuji T, Toyoshima H, Hayashi C, Miyai k. Fluorometrický test aktivity karnosinázy v lidském séru u normálních dětí, dospělých a pacientů s myopatií. Ann Clintonová. 1984; 21 (Pt 6): 510-514.
		Kopple JD, Swendseid ME. Důkaz, že histidin je esenciální aminokyselina u normálního a chronicky uremického člověka. J Clin Invest. 1975;55:881–891.
		Fukuyama K, Nakamura T, Benstein IA. Diferenciálně lokalizovaná inkorporace aminokyselin ve vztahu k epidermální keratinizaci u novorozených potkanů. Anat Rec. 1965;152:525–535.
		Tanaka M, Okada M, Zhen YX, et al. Snížený hydratační stav stratum corneum a snížený obsah aminokyselin na povrchu kůže u pacientů se sezónní alergickou rýmou. Br J Dermatol. 1998;139:618–621.
		Kezic S, O ‚ Regan GM, Yau N, et al. Hladiny produktů degradace filaggrinu jsou ovlivněny jak genotypem filaggrinu, tak závažností atopické dermatitidy. Alergik. 2011;66:934–940.
		Boukamp P, Petrussevska R, Breitkreutz D, Hornung J, Markham A, Fusenig N. Normal keratinization in a spontaneously immortalized aneuploid human keratinocyte cell line. J Cell Biol. 1988;106:761–771.
		McMahon A, Butovich IA, Kedzierski W. Epidermal expression of an Elovl4 transgene rescues neonatal lethality of homozygous Stargardt disease-3 mice. J Lipid Res. 2011;52:1128–1138.
		Herrmann T, Gröne H-J, Langbein L, et al. Narušená epidermální struktura u myší s časově kontrolovaným nedostatkem Fatp4. J Invest Dermatol. 2005;125:1228-1235.
		Jennemann R, Sandhoff R, Langbein L, et al. Integrita a bariérová funkce epidermis kriticky závisí na syntéze glukosylceramidu. J Biol Chem. 2007;282:3083-3094.
		Williams HC, Burney PG, Pembroke AC, Hay RJ. Britská pracovní skupina diagnostická kritéria pro atopickou dermatitidu. III. nezávislá validace nemocnice. Br J Dermatol. 1994;131:406–416.
		Schmitt J, Langan S, Williams HC. Jaké jsou nejlepší výsledky měření atopického ekzému? Systematický přehled. J. 2007;120:1389–1398.
		Walling HW, Swick BL. Aktualizace o léčbě chronického ekzému: nové přístupy a vznikající možnosti léčby. Clinton Vyšetřuje Dermatol. 2010;3:99.
		Meth-Cohn O, Barton D, Nakanishi k. komplexní chemie přírodních produktů. Londýn: Elsevier Science Ltd; 1999: 459.
		Kamata Y, Taniguchi A, Yamamoto M, et al. Neutrální cystein proteáza bleomycin hydroláza je nezbytná pro rozklad deiminovaného filaggrinu na aminokyseliny. J Biol Chem. 2009;284:12829–12836.
		Schoop VM, Mirancea N, Fusenig NE. Epidermal organization and differentiation of HaCaT keratinocytes in organotypic coculture with human dermal fibroblasts. J Invest Dermatol. 1999;112:343–353.
		Kirkup ME, Birchall NM, Weinberg EG, Helm K, Kennedy CTC. Acute and maintenance treatment of atopic dermatitis in children – two comparative studies with fluticasone propionate (0.05%) cream. J Dermatolog Treat. 2003;14:141–148.