Jsme využívali HIV virobiome, konkrétně obálka proteinu gp120, identifikovat vysoce účinný receptor-aktivní peptidy, které působí jako funkční antagonisté více chemokinový receptor. Toho bylo dosaženo hledáním sekvence gp120 pro malé lokální homologie se známými signalizačními peptidy, jako jsou neuropeptidy rodiny VIP / PACAP/GHRH .

identifikovali Jsme diskrétní oktapeptidový domény (peptid T stránky), v blízkosti V2 stonku gp120 a související peptidy odvozené od těchto sekvencí, které přednostně blok infekce R5-tropní HIV izolátů . Naše prvotní studie používá raném průchod pacienta izolovat, později prokázáno, že mají R5/X4 (dual-tropic) receptor fenotyp, i když žádný z chemokinový receptory, ani význam chemokinový receptor využití, byly známy v době této práce (cca 1985). Převládající protivirový účinek pro R5 vs X4 HIV izolátů vysvětluje počátku kontroverze týkající se nedostatku antivirové účinky s X4 laboratoře upraven izolátů .

Zatímco peptid T byl první receptorů cílené anti-virové infekce HIV (tato třída přišel být nazýván „entry-inhibitory“), jako epidemie AIDS rozšířen v polovině roku 1980 bylo zřejmé, že virus, zatímco stanovení infekce v CNS, nelze replikovat v neurony. Nicméně, hluboké kognitivní a motorické deficity byly hlášeny, čímž se velké stigma a utrpení této nemoci provádí v době. V našich počátečních zprávách jsme zaznamenali kortikální distribuci vazby gp120 na receptory v mozku primátů a předpokládali, že gp120 zabíjení citlivých neuronů by vysvětlovalo pozorované kognitivní deficity pacienta. Navrhli jsme, že peptid T, blokováním vazby gp120, později se ukázalo , že je na CCR5, by byl účinný při prevenci ztráty neuronů při infekci HIV, o které je nyní známo, že se vyskytuje velmi brzy po infekci.

Výhody v zánět a neurodegenerace

Úvodní studie, která ukázala, peptid T, a jeho degradaci odolné analogové D-ala1-peptid T-amide (DAPTA), byl ochranné na neurotoxické účinky gp120 v neuronálních kulturách , zčásti tím, že uvolňuje ochranné chemokines . Neuroprotektivní účinky přípravku DAPTA byly také prokázány u zvířat léčených gp120, kde byla obrácena ztráta synapsí a dendritického Arboru spolu se zpožděním chování . Neurotoxické účinky gp120 se proto ukázaly jako příčina ztráty kortikálních neuronů a dendritických patologií u neuro-AIDS. Mechanismy gp120 neurotoxicity byly postupně odhaleny nás a ostatní nepřímé, a týkající se aktivace mikroglie u gp120 , účinky, které jsou blokovány DAPTA . Aktivované mikroglie a astrocyty jsou nyní dobře oceňovány jako mediátory v různých neuropatologiích, které mohou analogy peptidu T léčit.

i když anti-virové aktivity těchto peptidů bylo původně předmětem vyšetřování, to se postupně začalo být jasné, že peptid T rodina peptidů měl užitečné imunomodulační a neuronální šetřící účinky mimo HIV, které by mohlo být využito terapeuticky, zvláště u neurodegenerativních onemocnění s zánětlivých patogenezi. Dapta snížila cytokiny M1 IL-1, Il-6, IL-8, IL-23, TNFa a zvýšila cytokiny M2, jako jsou IL-4 a IL-10 . Některé příklady možných přínosů léčby DAPTA zahrnují Alzheimerovu chorobu, neuropatie různého původu , bolest rakoviny, excitotoxicitu a mozkovou ischemii . Byly prokázány klinické přínosy pro neuro-AIDS (níže), potlačení růstového hormonu, příčinu vývojových zpoždění u pediatrických HIV, které DAPTA obnovila, stejně jako u kožních stavů nesouvisejících s HIV, jako je psoriáza .

Klinické studie výsledky v neuro-aids

Peptid T, nebo více správně DAPTA, vstoupil do lidských klinických studiích pro neuro-AIDS koncových bodů v roce 1986. Následně bylo hlášeno zlepšení vyšetření mozku MRI a kognitivních testů . Kognitivní přínosy u neuro-AIDS byly potvrzeny v dalším kontrolovaném testování, které ukázalo významnou skupinu (aktivní vs. placebo, p=.003) a čas (p=.001) účinky, bez toxicity. Tři stránky DBPC studii v 215 randomizovaných subjektů uvnitř nosní sprej DAPTA (2 mgs, TID) byla provedena v roce 1990. Hlavním parametrem byla změna v globální kognitivní skóre na 6 měsíců na baterie 23 testů. I když nebyl nalezen žádný významný rozdíl mezi skupinou DAPTA a placebem na globálním kognitivním skóre, 2 ze 7 domén, pracovní paměť (s. 04) a rychlost zpracování informací (p=.008), se ukázalo zlepšení ve skupině DAPTA. Léčebný účinek byl také hlášen u pacientů, jejichž počty CD4 buněk byly ve výchozím stavu vyšší než 200 buněk/µL (non-AIDS).

celkově byla tato kohorta minimálně kognitivně narušena (MMSE=28). Mezi těmi s větším a klinicky významným kognitivním deficitem >0.5 o globální Z-skóre, předem plánovaná analýza podskupin ukázala, že DAPTA byla spojena s lepší výkon při zhoršení bylo častější v placebové skupině (P=.02) . Ačkoli antivirová měření nebyla v této studii primárním cílovým parametrem, tyto údaje byly hlášeny a ukázaly, že DAPTA snížila virovou zátěž (-0,54 log, p<.03) . Zjištění, anti-virové účinky v této studii je pozoruhodné, jak pacienti nebyli do studie zařazeni na základě virové zátěže, tam byl žádné dávky optimalizace pro anti-virové efekt, jejich R5 nebo X4 virové fenotypy, které by se zjistit, citlivost na anti-virové efekt byl neznámý, a protože studie byla provedena v pre-HAART éry, DAPTA byl v podstatě testován v monoterapii.

v nemocnici fáze 2 studie DAPTA v 15 nebo 1.5 mg/den po dobu 4 týdnů v devět IV uživatele drog s počátkem AIDS demence také ukázal zlepšení neurokognitivních výkon, při vyšší dávce ve srovnání s nižší dávce nebo placebem (P<.05) . V další studii, výhody na funkční zobrazování mozku byla zaznamenána u 39-letý muž s AIDS, Komplex Demence, kteří obdrželi 12 týdnů intranazální DAPTA (0,4 mg TID, 1.2 mgs za den). Tato studie prokázala, že 34 z 35 oblastí mozku, které mají nízké FDG činnosti, ukázal remise po terapii , v souladu s MRI a kognitivní přínosy zjištěné ve fázi 1 a 2 studií. (op.cit., vysoko).

Perorálně aktivní peptidy,

Zatímco DAPTA je výrazně chráněna proti degradaci v plazmě je rychle stravitelné v žaludku . Kromě toho bylo jeho klinické použití primárně nosním sprejem, který vyžaduje dlouhodobé skladování tekutého léčivého přípravku. Bylo prokázáno, že DAPTA ztrácí aktivitu agregací při skladování. Agregace léku produkt byl zájem v DBPC studii, jak jsou uložené produkt byl použit pro několik let trvalo na dokončení studie a želírovací studijní medikace byla hlášena u pacientů. To omezilo další klinický vývoj přípravku DAPTA. Abychom překonali tuto významnou překážku, vytvořili jsme analog DAPTA (RAP-103), který je plně chráněn proti degradaci a zachovává pikomolární účinnost.

studie proof-of-concept u potkanů ukázala, že perorální podání RAP-103 (0 .05-1mg/kg) na 7 dnů zcela zabraňuje mechanickou alodynií a inhibuje rozvoj tepelné hyperalgesia po částečné ligace sedacího nervu u potkanů . V této studii jsme dále ukázali, že DAPTA a RAP-103 zablokoval oba CCR2, stejně jako úzce související chemokinový receptor CCR5. Navíc, RAP-103 může snížit páteře microglial aktivace a infiltrace monocytů, a inhibují zánětlivé cytokinové odpovědi vyvolané periferní nervové zranění, příčinou vzniku neuropatické bolesti.

Naše zjištění naznačují, že cílení CCR2/CCR5 by měla poskytnout větší účinnost, než cílení CCR2 nebo CCR5 sám, a že dual CCR2/CCR5 funkční antagonista RAP-103 má potenciál pro klinické použití v neuropatické a dalších bolestivých stavů. Protože tento analogový akcií více DAPTA mechanismy ke snížení microglial aktivace, posunu cytokinové rovnováhy, chrání neurony a náhradní dendritických stromů, je hlavním kandidátem pro další klinický vývoj ve více neuroinflammatory podmínky již bylo řečeno, pro jaké výhody v pre-klinické testování na zvířatech modely byly zobrazeny, jak je uvedeno v mnoha citací v této recenzi.