Struktura, funkce, a imunogenní buněčné smrti: adenovirus jako příklad

Adenovirus biologie byl studován v detailu, a to je dobře rozuměl. Adenoviry mohou být použity jako příklad viru při popisu onkolytických virů jako celku. I když existuje přirozeně mnoho rozdílů s různými viry, mnoho faktorů je do určité míry podobné, ale ne všechny viry jsou přirozeně onkolytické.

k dnešnímu dni je popsáno 57 odlišných sérotypů adenoviru a rozděleno do 7 podskupin: A až G . Zatímco adenoviry spouštějí infekce typu běžné chřipky, představují jednu z nejvšestrannějších platforem pro léčbu rakoviny. Zejména sérotyp 5 (skupina C) je nejčastěji používanou páteří pro návrh onkolytického viru . Jeho struktura zahrnuje dvacetistěnná ve tvaru kapsidový (složený hlavně, nainstalujte a užívejte si, penton, vlákniny a bílkovin) okolní neobalené dvouvláknové DNA . Adenoviry mají schopnost infikovat buňky nezávisle na jejich stavu dělení.

infekce nádorových buněk se iniciuje připojením knoflíku virových vláken k receptorům umístěným na povrchu nádorových buněk. Tato interakce je zprostředkována různými receptory v závislosti na sérotypu viru. Například, sérotyp 5 adenoviry vázat přednostně na coxsackie – a adenovirus receptor CXADR , zatímco sérotyp 3 adenoviry vázat desmoglein-2, CD46 nebo CD80/86 . Některé z těchto receptorů se často nacházejí na rakovinných buňkách, zatímco bohužel některé, jako je CXADR, jsou downregulovány v mnoha pokročilých nádorech . Dochází k druhé interakci mezi virovými pentonovými proteiny a integriny nádorových buněk, což vede k internalizaci viru . Adenoviry mohou používat i několik dalších receptorů, jak je uvedeno v tabulce 2. Kroků proces trvá virové DNA do jádra, kde transkripce časných virových proteinů (E1–E4) začíná. Následující výraz pozdní proteiny, tisíce nových virových potomků objeví, narušuje buněčné membrány po několika dnech a nově vytvořené viry infikovat nové buňky, dokud se imunitní systém nakonec zastaví tento proces .

i když ne objevil až v léčbě pacientů, jako lýzu buňky je vysoce imunogenní proces . Tento faktor má zásadní význam vzhledem k tomu, že se zdá, že většina rakovin se dokáže skrýt před naším imunitním systémem. Imunogenní buněčná smrt odhaluje více antigenů spojených s nádorem pro prezentaci imunitnímu systému prostřednictvím aktivovaných zralých dendritických buněk. Vysoký počet virových genomů aktivaci imunologických nebezpečí signalizace přes poškození související molekulární vzorec (VLHKÝ) a patogen-associated molecular pattern (PAMP) receptory. Tyto procesy tvoří recept, který retargets adaptivní imunitní systém, včetně cytotoxických CD8+ T buněk a pomocné CD4+ T buněk, směrem k nádoru, tak zrušení místní imunosuprese . Za zmínku, anti-adenovirová T buněčná imunita je polyfunkční Vykreslování zvýšenou kvalitu na celkové probíhající protinádorové odpovědi . Současně adenovirová infekce také zprostředkovává aktivaci přirozených zabijáckých buněk, které dále přispívají k protinádorové imunitní odpovědi . Tvorba antivirových protilátek stejně stimuluje odpověď spuštěním cytotoxicity závislé na protilátkách (obr. 1).

Moderní onkolytický viry

Dnes, adenoviry, herpes viry, spalničky viry, coxsackie viry, polioviry, reoviruses, poxviruses, a viry Newcastleské choroby, mimo jiné, jsou některé z onkolytický viry v rámci preklinických a klinického vývoje pro léčbu rakoviny . Nádorově preferenční replikace může být“ přirozená “ vzhledem k defektním mechanismům virového snímání většiny rakovinných buněk . Některé rakovinné buňky také obsahují zvýšenou expresi receptorů vstupu viru a zdá se, že některé viry nepotřebují specifické receptory pro vstup . Abnormální funkce intracelulárních signálních drah, jako je interferon, mohou být využívány některými viry . Stejně jako mnoho jiných viry, adenoviry jsou přirozeně náchylné k replikaci agresivně v nádorových buňkách a jejich wild type verze by mohla teoreticky být použity v léčbě rakoviny, jako tomu bylo v historické série . Lepší výsledky pacientů se však očekávají racionálním návrhem virů, které je činí tumor selektivními („onkolytickými“). V posledních letech byly adenoviry rozsáhle změněny tak, aby spojily vysokou protinádorovou účinnost s minimální toxicitou .

Stávajících technik molekulární biologie nám umožňují (a) vyberte položku receptory vysoce exprimován na nádory, (b) upřesnit bezpečnosti tím, že omezí replikaci nádorových buněk, a (c) vložit konkrétní terapeutické transgeny pro zvýšení účinnosti. Tyto přístupy jsou popsány níže a shrnuty v tabulce 3.

Zvýšení nádor tropismu

Efektivní vstup onkolytického viru do nádorových buněk je předpokladem pro následné oncolysis. Naopak limitujícím faktorem může být nízká exprese receptoru. Aby se zabránilo hlavolam nízké exprese CXADR na nádory buněk, sérotyp 5 adenoviry může být upraven tak, aby obsahovat arginylglycylaspartic kyselina (RGD) peptidy v jejich vlákna knoflíky. Ukázalo se, že taková modifikace je užitečná pro zvýšení účinnosti a snížení toxicity adenovirů . Klinické provádění těchto modifikovaných onkolytický adenoviry, jako DNX-2401 (sérotyp 5 adenovirus s RGD modifikace), ukázal slibné výsledky ve fázi I klinické studie, kde 20% gliomů u pacientů se ukázalo odolné odpovědi .

Podobně, výměna sérotypu 5 vlákniny knoflík s jedním patřící k sérotypu 3 poskytuje značné zlepšení protinádorové účinnosti, při zachování atraktivní systémové kinetika a bezpečnost všudypřítomné sérotyp 5 . 5/3 chimerismus) umožňuje částečné překonání již existujících neutralizačních protilátek proti Ad5 . Je třeba poznamenat, že otázka protilátek je složitá a ve skutečnosti výchozí titry neutralizačních protilátek nezabránily protinádorové účinnosti u lidí . Velké množství viru, které jsou produkovány nádory do krevního řečiště, může jednoduše překonat neutralizační protilátky produkované do krve. U infekcí adenovirem divokého typu vstupuje do krve pouze malé množství adenoviru. Neutralizační protilátky jsou navrženy tak, aby blokovaly takový virus, nikoli obrovské množství produkované nádory infikovanými onkolytickým virem. Nicméně, v epidemiologické analýzy, nedostatek protilátek v základní ovlivnily přežití statisticky významně , ale ne v klinicky významným způsobem, jako reakce a dlouhé přežití může být viděn, bez ohledu na výchozí titry protilátek. Zajímavé je, že postupná intravenózní léčba změnou viru nebo sérotypu může změnit .

Jako vyjádření Ad5 receptor CXADR se objeví omezení pro účinnost v rámci pokročilých nádorů, plně sérotyp 3-založeno onkolytický adenoviry byly postaveny . Tento virus vstupuje prostřednictvím mechanismů zprostředkovaných bez CXADR, včetně desmogleinu 2, který je vysoce exprimován v pokročilých solidních nádorech . Dobrá bezpečnost a známky účinnosti byly pozorovány u pacientů léčených plně adenovirem sérotypu 3 . Dále byla použita metoda přímé evoluce ke generování chimérického viru Ad3 / Ad11p, který byl použit v několika studiích pod názvem ColoAd1 .

Bezpečnost, omezení replikace nádorových buněk

Pro dosažení efektivního šíření vstup viru a minimalizovat virus související nežádoucí účinky, adenoviry byly upraveny tak, aby se dosáhlo zvýšené nádorové selektivity. Strategie zaměstnaných patří transkripční kontrola adenovirus časné proteiny jako je E1A nebo E1B. O E1A gene 24-base pair smazání produkuje zmutoval E1A proteinu, které nelze vázat na retinoblastom protein, čímž se zabrání zdravé buňky od vstupu v syntéze („S“) fáze. To blokuje replikaci adenovirové DNA v klidových normálních tkáních . Naproti tomu replikativní potenciál zůstává v nádorových buňkách neporušený, protože všudypřítomné defekty v dráze p16/Rb zajišťují, že rakovinné buňky trvale zůstávají ve fázi syntézy .

skutečnost, že nádorové buňky obsahují několik aktivních onkogeny vedlo k poznání, že jejich výsledné proteiny by mohla být využita pro kontrolu transkripce DNA adenoviru. Například aktivita telomerázy je známým rysem rakovinných buněk, zatímco aktivita ve zdravých buňkách je minimální . Proto, adenovirus replikace byla úspěšně umístěna pod kontrolou lidská telomerasová reverzní transkriptázy (hTERT) pořadatel vykazuje protinádorovou účinnost u pokročilých nádorů . Podobně, p53 , karcinoembryonální antigen (CEA) a prostatický specifický antigen (PSA) byly využity k ovládání výraz začátku adenovirus proteiny. V důsledku defektů dráhy Rb/p16 mají rakovinné buňky vysoké hladiny intracelulárního volného E2F, které lze použít pro specificitu nádoru, když je promotor E2F vložen pro kontrolu replikace viru .

transgeny, zvyšující účinnost

povaha virů jim umožňuje unést hostitelskou buňku za vzniku virových proteinů. To umožňuje terapeutické využití se zavedením terapeutických transgenů do genomu adenoviru. Předtím, než uznání onkolytický adenoviry jako imunoterapie, jedním z nejčastějších změny bylo vložení cytosin deaminázy a herpes simplex-odvozené thymidinu kinázy . Kombinované podávání onkolytický adenoviry s ganciklovirem a/nebo 5-fluorcytosinu (5-FC) prekursory způsobil nádor buněčné smrti v důsledku jejich konverze do cytotoxické sloučeniny transduced nádorové buňky .

v poslední době, zvýšená uznání imunitního systému jako důležitou součást v účinnost onkolytický viry led vědci vnímat onkolytický adenoviry jako silný vozidla pro imunitní faktory. Přidání cytokin transgenového faktoru stimulujícího kolonie granulocytů (GMCSF) do adenovirového genomu je běžně používanou modifikací. V tomto přístupu, replikace viru je doprovázen GMCSF výroby, které výsledky v náboru a zrání dendritických buněk (DCs), a následné penetrace T buňky s nádorem spojených antigenů vydané oncolysis . CGTG-102 (dříve Ad5/3-D24-GMCSF, v současné době ONCOS-102), je onkolytický adenovirus vyjádření GMCSF. Pacient údaje potvrzují, že tento pojem se uvádí zvýšení periferní úrovní T-buněk proti tumor-asociovaný antigen . Tato zjištění naznačují, že dendritické buněčné primování u lidí, jak bylo předpovězeno zavedeným mechanismem účinku GMCSF . Zvýšená infiltrace CD8+ T buněk nalezená v nádorových biopsiích po léčbě pacientů s pokročilým nádorovým onemocněním s ONCOS-102 zdůrazňuje imunologickou účinnost tohoto přístupu . Nicméně, pleiotropní účinky GMCSF může ohrozit protinádorové imunity jako cytokin může unwantedly stimulovat myeloidní odvozené supresorové buňky (MDSCs) a tumor-asociovaných makrofágů (Tam), jak známo, že inhibují T buněk a nk buněk (NK) činností . Objevující se lidská data však naznačují, že viry produkující GMCSF mohou být bezpečné a účinné .

Za GMCSF, kombinovaná exprese IL-12 a decorin v onkolytický adenovirus povoleno využití protinádorové imunity ve špatně imunogenní myší rakovinu prsu modelu, prostřednictvím cytotoxických T buněk, infiltrace a transformace růstový faktor beta (TGFb) snížení . Coexpression CD40L a 4-1BBL o onkolytický adenovirus má také ukázaly slibné výsledky, vzhledem k jeho schopnost podporovat zničení pankreatických nádorů, přes repolarizace mikroprostředí nádoru. Taková polarizace umožnila uvolňování atraktantů T buněk a imunitních stimulačních cytokinů, což umožnilo silné protinádorové odpovědi T buněk . Výroba OX40L zprostředkované pomocí onkolytický adenovirus (d24-RGDOX) podporoval zvýšenou nádor ovládání pomocí vysoce funkční efektorových T buněk a epitop šíření .

protilátky mohou být také vloženy jako transgeny, aby se zvýšila účinnost onkolytické viroterapie. Například anti-CTLA4, inhibitor kontrolního bodu, byl úspěšně vložen do onkolytické adenovirové platformy. Jeho použití v myších modelech a ex vivo kulturách mononukleárních buněk periferní krve pacientů s rakovinou (Pbmc) vedlo ke zvýšené protinádorové aktivitě T buněk . Více nedávno, dual cílené protilátky zaměřené T buněk a rakoviny-specifické antigeny buněčného povrchu, jako jsou epidermální růstový faktor receptor (EGFR) , FR-v , familiární adenomatózní polypóza (FAP) a CD44v6 , prokázaly slibné předklinické výsledky .

kromě toho byly studovány i další přístupy. Patří mezi ně vyzbrojení fusogenními molekulami, protilátkami, engagery T buněk a iontovými kanály schopnými koncentrace radioaktivního jódu. Zatímco v těchto případech nejsou transgeny nutně imunologicky aktivní a onkolytická platforma vede k imunostimulaci. Je důležité si uvědomit, že klinické údaje naznačují, že onkolytický adenovirus single-agent účinnosti bylo často poněkud omezené. Bylo navrženo několik bariér, které ovlivňují onkolytické adenovirové terapie. Patří mezi ně antivirové interferony, které mohou být produkovány stromem nádoru, i když samotné rakovinné buňky takovou schopnost postrádají . Mezi další důvody patří stromální bariéry, hypoxie, hyperbarické, nekrotické a kyselé oblasti . Nicméně, některé z těchto překážek, které byly řešeny v přepracované adenoviry podmíněně se replikující v reakci na hypoxické faktory nebo kyselé mikroprostředí nádoru .

alternativně byly onkolytické adenoviry vyzbrojeny hyaluronidázou, enzymem, který degraduje kyselinu hyaluronovou, která brání šíření viru. Zejména léčba řady preklinických nádorových modelů in vivo umožnila zvýšenou protinádorovou účinnost. Neutralizační protilátky zůstávají problémem pro onkolytické imunoterapie. Nicméně, použití bispecifické adaptéry přesměrovat antivirové neutralizační protilátky mohou nabídnout atraktivní přístup ke zvýšení účinnosti onkolytický adenovirus terapie . Povlak onkolytický adenoviry nádor s deriváty bylo hlášeno, že umožňují pro úspěšné doručení částic do nádoru s silné protinádorové odpovědi .

moderní Terapii Access Program (ATAP)

Mezi lety 2007 a 2012, 290 pokročilým nádorovým onemocněním, pacienti byli léčeni 10 různých onkolytický viry (Tabulka 4) v celkové výši 821 léčby. Bylo zveřejněno dlouhodobé sledování těchto pacientů . Léčba byla prováděna v rámci individualizovaného léčebného programu podle směrnice EU o pokročilých terapiích. I když bylo pozorováno mnoho objektivních odpovědí, nelze vyvodit žádné definitivní závěry týkající se přínosu celkového přežití, protože nebyla k dispozici žádná spolehlivá kontrolní skupina. Některé analýzy kontrolních případů, které byly provedeny, však naznačují přínos přežití .

Při zohlednění omezení nonrandomized dat, některé zajímavé nálezy objevily . Jedním z nejdůležitějších pozorování bylo, že všechny podané viry objevil docela v bezpečí u pacientů s pokročilou rakovinou. Dobrou snášenlivost byla vidět napříč různými sérotypy virů, včetně různých kapsidový úpravy, a různé imunologické odjišťovací zařízení (tj., GMCSF nebo CD40L). Současné nízké dávky cyklofosfamidu a temozolomidu byly také dobře snášeny . První z nich byl použit ke snížení regulačních T buněk. Ten se zaměřil na zvýšenou indukci autofagie v infikovaných rakovinných buňkách, protože se zdá, že je důležitým mediátorem smrti onkolytických buněk. Replikace viru by navíc mohla být zvýšena souběžným blokováním kalciových kanálů . Nebyla pozorována žádná úmrtí pacientů související s léčbou . Typické příznaky podobné chřipce, jako je horečka a únava, byly pozorovány u většiny pacientů několik dní po léčbě. Tyto nálezy byly potvrzeny v několika následných klinických studiích . Příznaky podobné chřipce a horečka by mohly být účinně sníženy acetaminofenem (paracetamolem).

Systémová dodávka onkolytický virus

Biodistribuce studie s adenoviry u hlodavců jsou nespolehlivé, protože většina zvířat nedostatek vstup receptory nebo jejich distribuci orgánů se liší od lidí. Od pacientů s ATAP jsme byli schopni shromáždit důležité informace o biodistribuci virů u lidí . Mnoho lidí má neutralizační protilátky proti různým sérotypům adenoviru, i když často při nízkém počátečním titru . Protože se však při typické léčbě podávají stovky miliard virů, již existující protilátky nemusí být schopny zcela zablokovat intravenózní podání. Při následné intravenózní léčbě se stejným sérotypem je situace nejasnější, což je jeden z důvodů, proč se intratumorální podání běžně používá u onkolytických virů. Je třeba poznamenat, že bylo navrženo, že antivirová imunita pomáhá vytvářet protinádorovou imunitu .

u lidí bylo zjištěno, že adenovirus je schopen cestovat krví k metastázám navzdory neutralizujícím protilátkám . U některých virů se zdá, že mechanismus souvisí s vazbou na krevní buňky . Zajímavé je, že adenoviry v krvi (údaje qPCR) byly nejčastěji zjištěny z krevních sraženin, zatímco někteří pacienti měli významné množství viru v séru. Také protilátková odpověď pacienta s rakovinou se lišila . Odpovědi na léčbu nebo dlouhé přežití jsou pozorovány bez ohledu na titry neutralizujících protilátek, i když je třeba poznamenat, že většina pacientů byla léčena intratumorálně .

je zajímavé, že jsme léčili sedm pacientů s adenovirem sérotypu 3 pouze intravenózním podáním. Byly pozorovány známky naznačující replikaci viru, včetně prodloužených a / nebo stoupajících titrů viru v krvi. To bylo pozorováno také u pacientů, kteří měli již existující protilátky proti viru. Také 5 ze 6 hodnotitelných pacientů vykazovalo známky možného přínosu. Tato data naznačují, že viry mohou být schopny vstoupit do nádorů také intravenózní cestou . To bylo později potvrzeno v pitevní studii, kde bylo prokázáno, že neinjektované nádory mají onkolytický adenovirus .

Viry, které již obdrželi regulační schválení pro léčbu rakoviny

Z klinického hlediska, využití viry pro léčbu rakoviny v moderní době je v plenkách. Zpočátku byly použity viry divokého typu, ale tento přístup by mohl vést k nežádoucím účinkům způsobeným replikací viru v normálních tkáních. Nicméně, Rigvir (ECHO-7 virus) , onkolytický pikornavirus s některé vrozené nádorové selektivity, byl poprvé schválen onkolytický virální terapie produkt pro rakovinu schválen 2004 v Lotyšsku a později v několika dalších zemích. Druhý onkolytický virus byl racionálně navržen pro selektivitu nádoru. Pojmenovaný H101 (Oncorine), tento adenovirus se v Číně používá od roku 2005 k léčbě solidních nádorů . Je třeba poznamenat, že oba tyto viry postrádají aktivační zařízení.

potvrzení, že využití stávajících imunitní systém vyvíjet protinádorové funkcí by mohl poskytnout slibný přístup k léčbě rakoviny povoleno vědci využít imunologické schopnosti onkolytický viry . Například přidání imunologických transgenů, jako je GMCSF, bylo populárním přístupem. Talimogene laherparepvec (také známý jako T-vec, Imlygic®) je herpes simplex-1 virus kódování pro GMCSF, a byl jedním z prvních onkolytický viry navržen tak, aby imunologickou podporu. Jeho klinická aplikace nakonec vedla k randomizované klinické studii fáze III (OPTiM). V tomto klinickém stadiu IIIB/C a IV metastazující pacienti s neresekovatelným melanomem, kteří dostávali intratumorální T-vec, měli 19,3% trvalou odpověď, z čehož více než 80% bylo úplných odpovědí . Skutečnost, že subkutánní podání GM-CSF nabídl nižší účinnost (o 1,4% odolné rychlost odezvy, což je o 0,7% kompletní odpověď) led schválení Food and Drug Administration (FDA) v roce 2015, následuje Evropská Agentura pro léčivé Přípravky (EMA) .

Tento mezník schválení v Západních zemích povzbudil optimismus v lékařské komunitě, aby i nadále rozvíjet a zlepšovat onkolytický viry pro léčbu rakoviny, včetně adenoviry. Později v podobné populaci pacientů byl pembrolizumab kombinován s virem, což vedlo k odpovědi u 62% pacientů, z nichž 33% bylo kompletní. Podle očekávání byla u nádorů po léčbě pozorována vysoká přítomnost infiltrace cytotoxických T buněk . Nedávná klinická studie fáze II u pacientů s pokročilým melanomem prokázala, že T-vec zvýšil míru odpovědi ipilimumabu ve srovnání se samotným ipilimumabem (38% vs. 18%). Z vědomí, a na rozdíl od kombinace checkpoint inhibitory , nežádoucí účinky nebyly ještě umocněn. To naznačuje, že onkolytické viry mohou být kombinovány s inhibicí kontrolního bodu bez problematického snížení bezpečnosti.

Onkolytický adenovirem studie

V době psaní této recenze (Březen 2020), jsme provedli průzkum clinicaltrials.org, což vede k 101 výsledky hodnocení. Omezením vyhledávání na“ onkolytický adenovirus “ fáze I–II pokusy, přišli jsme s 41 výsledky; z toho 10 bylo dokončeno a 15 nábor. V těchto dokončených nebo náborových studiích bylo použito šestnáct různých onkolytických virů. Nebyly nalezeny žádné klinické studie aktivní fáze III. Je zajímavé, že 6 ze 16 virů bylo nedávno zveřejněno v letech 2019-2020, což naznačuje rostoucí zájem a dostupné financování studií onkolytického adenoviru (Tabulka 5).

Použití onkolytický viry v hematologické malignity

Pozorování hematologických nádorových regresí následující virus infekce byly pozorovány na začátku minulého století . Poznámky, hodnocení odpovědi bylo možné u hematologických malignit, mikroskopií a mobilní počítání, když to není pravda pro většinu solidních nádorů v té době. To mohlo způsobit nadměrné zastoupení hematologické rakoviny v rané literatuře, kvůli pozorovací zaujatosti. Nelze však popřít, že mnoho zpráv naznačuje regresi hematologických nádorů po virových infekcích. Jako takový, existuje silné zdůvodnění domnívat se, že onkolytické viry by mohly být použity také u hematologických malignit. Ne všechny viry jsou však vhodné pro léčbu nádorů krevních buněk. Například adenovirus se nezdá být schopen lýzovat bílé krvinky .

Podle posledních publikací, rostoucí zájem směrem k onkolytický viry je přítomna také v hematologické oblasti, jako několik viry jsou studována v preklinických nastavení . Bylo však Publikováno pouze několik studií . Hledání z clinicaltrials.gov neodhalil žádné výsledky studií na „hematologickém novotvaru“ a „onkolytických virech“ (Březen 2020). Hledání „mnohočetného myelomu“ a „onkolytických virů“ však našlo dvě studie.

Na závěr, k dnešnímu dni, tam bylo několik studií s onkolytický viry v hematologických nádorů. Některé pozoruhodné snahy zahrnují rané fáze studií s reovirem , spalničkami a virem vezikulární stomatitidy (VSV) u mnohočetného myelomu . V současné době nábor vSv studie (NCT03017820)zahrnuje také pacienty s relabující akutní myeloidní leukémií a lymfomem T buněk. Nebyly nalezeny žádné hematologické studie s onkolytickým adenovirem.

Omezení a novější strategie pro zlepšení účinnosti onkolytický viry

Vyzbrojování s imunostimulační cytokiny byla jedna populární metoda pro generování imunologické součinnosti s účinky oncolysis. Klinický přínos tohoto přístupu byl pozorován ve studii fáze III OPTiM, kde 1 ze 6 pacientů dosáhlo úplné odpovědi na onkolytický virus talimogene laherparepvec. Medián trvání těchto úplných odpovědí ve skupině s virem nebyl dosažen a 8 z 9 pacientů přežilo více než 5 let .

kombinace onkolytických virů s inhibicí kontrolního bodu aktivující T buňky může zlepšit protinádorovou účinnost léčby onkolytickým adenovirem. Zejména nádory s nízkým množstvím imunologických buněk— “ studené nádory— – mohou být účinně imunitně aktivovány onkolytickými adenoviry. Díky tomu jsou nádory „horké“ a podporují účinky inhibitorů kontrolních bodů . Byl předložen klinický důkaz o účinnosti kombinace onkolytických virů s inhibitory kontrolního bodu . V randomizované studii fáze II (n = 198) kontrolní stanoviště inhibitor (ipilimumab) bylo v kombinaci s onkolytický virus talimogene laherparepvec, ukazuje objektivní odpovědi u 39% pacientů, ve srovnání s 18% v kontrolní inhibitor-pouze ruku .

kromě melanomu, nejnovější publikace naznačují, klinické aktivity také v dalších nádorů, jako jsou metastatický sarkom, kde je stejná kombinace vyústila v 30% míra objektivní odpovědi v jednoramenné studii . Kromě toho, že bezpečnostní profil těchto úprav bylo dobré a onkolytický viry, nezdá se, že zvýšení frekvence závažných nežádoucích účinků.

i když se zdá, že tyto kombinace přinášejí u některých pacientů zvýšenou účinnost a dlouhodobý přínos, ne všichni mají prospěch, a zjevně existuje role pro další zlepšení. Kombinace chemoterapie nebo radiační terapie racionálním způsobem ke zlepšení léčebných výhod a zdá se, že i tyto konvenční terapie mají imunologickou složku . Jasný klinický důkaz na podporu tohoto přístupu je však v současné době omezený.

kombinace jiných terapií, jako je adoptivní buněčná terapie nebo cílená terapie, může také vést k lepší léčbě. Stále nám však chybí mnoho informací o imunitních účincích u jednotlivých nádorů. Tento nedostatek znalostí ztěžuje pochopení, kteří pacienti by měli největší prospěch z toho, jaké léčebné kombinace. To by mohla být v současné době největší výzva v oboru. Klasický zkušební design není vhodný pro pochopení mechanismů na individuální úrovni nádoru a pacienta.

TILT-123 studie

ideální léčba rakoviny by měla být tak dobré, že většina pacientů by jednoznačně přínosem, zatímco vedlejší účinky by měly být snesitelné. Náš vlastní příspěvek k tomuto hledání je románkolytický adenovirus, navržený speciálně s ohledem na T buňky. Ad5/3-E2F-D24-hTNFa-IRES-hIL2 (TILT-123) je založen na dobře rozuměl a bezpečný adenoviru sérotypu 5, ale jeho vlákna knoflík byl změněn na sérotyp 3 knoflík pro lepší pouze geny do nádorových buněk . Replikace viru je přísně omezena na rakovinné buňky tím, dual control (E2F promotér a D24 smazání) a energie virus je optimalizován tím, že dva transgeny, které byly vybrány v data-driven způsobem . Chimérické 5/3 adenoviry také představují nejlepší nativní stimulátor T buněk, mezi klinicky relevantními onkolytickými adenoviry .

kombinace, která se ukázala jako nejlepší přístup pro nábor a aktivaci T buněk, byla interleukin-2 (IL-2) a faktor nekrózy nádorů alfa (TNFa). IL-2 je nutný pro růst a přežití T buněk a TNFa je silným induktorem obchodování s T buňkami a nádorové apoptózy . V preklinických modelech, podávání cytokinů-kódování adenoviry zvýšení protinádorové účinnosti tři formy adoptivní T-buněčná terapie: T buněčný receptor (TCR)-modifikovaných T buněk , AUTO T buněčné terapie , a tumor-infiltrující lymfocyty (TIL) terapie .

tento výsledek vyplynul z následujícího: (1) lepší infiltrace převedeny buněk indukovaná pomocí TNFa, (2) lepší aktivitu cytotoxických T buněk indukovaná IL-2, a (3) celkové snížení imunní supresivní podskupin včetně regulačních T buněk (Tregs), MDSCs a M2 makrofágů v mikroprostředí nádoru . Křečci nesoucí nádory pankreatu léčeni TILT-123 vykazovali známky zlepšené protinádorové účinnosti ve srovnání se zvířaty léčenými til nebo samotným TILT-123 . Kombinace IL-2 a TNFa kódování adenoviry a anti-PD-1 terapie také podporovat dlouhodobé přežití 100% v preklinických modelech ložisko melanomu, nádoru model .

Další studie s virem prokázána abscopal efekt v non-injekčně nádorů, ukazuje na systémovou povahu imunitní odpovědi generované lokální léčba . Kromě toho terapie TILT-123 u zvířat léčených TIL prokázala ochrannou imunitu vůči opětovné výzvě nádoru . Důležité je, že tato data demonstrují potenciál TILT-123 doladit a překonat výzvy adoptivní buněčné terapie založené na T buňkách. První pokus s tímto pokročilým onkolytickým adenovirem Nyní probíhá (NCT04217473).