Popis

RNAlater RNA Stabilizačního Roztoku stabilizuje a chrání buněčné RNA v neporušené, nezmražených vzorků tkáně, což eliminuje potřebu, aby okamžitě zpracovat tkáňové vzorky nebo pro zmrazení vzorků v tekutém dusíku pro pozdější zpracování. Kusy tkáně mohou být sklizeny a ponořeny do stabilizačního roztoku RNA RNA pro skladování, aniž by byla ohrožena kvalita nebo množství RNA získané po následné izolaci RNA. Výhody použití Rnalater RNA stabilizační roztok:
• Účinnost—stabilizace RNA na 1 den při 37°C, 1 týden při 25°C, 1 měsíc při 4°C, nebo na dobu neurčitou při teplotě -20°C
• Jednoduchost—jediný činidlo, které okamžitě inaktivuje RNases a stabilizuje RNA do tkání nebo buněk
• Pohodlí—není potřeba zmrazit vzorků v tekutém dusíku nebo rush vzorky do laboratoře mrazák
• Mobilita—ideální pro tkáně sbírka „v terénu“
• Univerzálnost—kompatibilní s mnoha RNA izolaci postupy, včetně většiny RNA isolation kit
Aplikace
RNAlater RNA Stabilizačního Roztoku byla testována na různých savčí tkáně, rostliny, E.coli, Xenopus, ryby a Drosophila. To je ideální pro:
• Chrání RNA integrity v tkáních bohatých na RNases
• Sběr vzorků z různých časových bodech, aniž by se museli zpracovat vzorky pro každý čas ihned
• Archivace tkání pro budoucí microdissection
• Ponoření zvířete dutin nebo orgánů pro stabilizaci RNA během zdlouhavých postupů disekce
• Sběr vzorků na lokalitách (např., nemocnice, studijní místa, raketoplán), kde bezprostřední RNA izolace není možné.
• Poštovné vzorky na mokrém ledu nebo i při pokojové teplotě, pokud dodáván přes noc
RNAlater RNA Stabilizačního Roztoku řízení
členitý tkáně (méně než 0,5 cm v jednom rozměru), je prostě ponořený v přibližně 5 svazků RNAlater roztoku při pokojové teplotě. Roztok proniká buňkami a stabilizuje RNA. Vzorek pak může být skladován na dobu neurčitou při -20°C (tkáň nezmrzne), při 4°C po dobu až jednoho měsíce nebo při 25°C po dobu až jednoho týdne. Pro izolaci RNA je tkáň jednoduše odstraněna z roztoku RNAlater a ošetřena, jako by byla právě sklizena. Většina tkání může být přenesena přímo do lyzačního pufru a homogenizována. Vzorky ošetřené roztokem RNAlater a poté zmrazené mohou být rozemleté maltou a paličkou nebo rozmrazeny a zpracovány jako čerstvá tkáň bez obav z prasknutí buněk a uvolňování RNáz, protože Rnázy již byly inaktivovány. Buňky mohou být točil ven a pak přidán do lyzačního pufru, nebo v některých případech, RNAlater roztoku mohou být přidány spolu s buňkami přímo do lyzačního pufru.
Kompatibilní s různými postupy
RNAlater RNA Stabilizačního Roztoku je kompatibilní s one-step RNA izolace metod, jako TRIzol Reagent; s sklo závazné metody, například Qiagen je RNeasy nebo Ambion RNAqueous kit; s kyselinou fenolovou extrakcí metody, například Ambion Zcela RNA kit, a s metodami, které používají oligo(dT) výběr mRNA, jako je Ambion Poly(A)Purista™ kit. Interní výzkum, stejně jako nedávno publikovaný nezávislý výzkum, naznačuje, že použití roztoku stabilizace RNA RNA pro ukládání tkání neovlivňuje výsledek následných experimentů s analýzou exprese RNA ve srovnání s jinými metodami zpracování.