Articles

Zvládnutí Mikrotom

Popis Mikrotom

Obecně platí, mikrotomy jsou zapojeny do procesu přípravy vzorků biologického materiálu k vyšetření pod mikroskopem. Konkrétně rozřezávají materiál na extrémně tenké kousky, aby se vešly do mikroskopického sklíčka a byly studovány vědci. Drží materiál na místě, zatímco velmi ostrý skleněný nebo kosočtverečný nůž jej rozřezává na kousky o tloušťce několika desítek mikronů.

historie Mikrotomie a Mikrotomového zařízení

Když byl mikroskop vynalezen, vědci potřebovali krájet materiál. Před vytvořením mikrotomu vědci ručně řezali kusy materiálu, které chtěli zkontrolovat pomocí žiletky. Tento způsob přípravy vzorků ke studiu byl zdlouhavý a obtížný, takže přirozeně bylo třeba vymyslet alternativu.

Cummings, výrobní společnost, navržen ruční krájení nástroje vyrobené ze dřeva v roce 1770. Tyto nástroje byly používány výhradně v botanice pro řezání rostlin. Pak termín „mikrotom“ byl vytvořen v roce 1839 Chevalierem.

ve skutečnosti to však byl Rudolf Thoma, kdo navrhl úplně první oficiální mikrotom, nazvaný „Thoma microtome“. Odtud se mikrotom vyvinul do různých typů a stylů, používaných pro různé účely.

nejoblíbenější typy Mikrotomových strojů

1. Rotační

nejvšestrannější a nejčastěji používaná verze. Pracuje rotačním způsobem. Nůž je nehybný a zůstává ve vodorovné poloze. Samotné tělo stroje se otáčí kolem čepele a krájí se. Například stroj má vzorek jen nad nožem, pak se pohybuje směrem dolů přes nůž, krájení kus tkáně z, pak stroj táhne zpět a pohybuje se směrem nahoru, před zahájením znovu. Tím se vytvoří tkáňové plátky o velikosti 1-60 mikrometrů.

2. Sledge

pracuje tak, že drží vzorek stále v „raketoplánu“, který pak postupuje a ustupuje přes čepel. Plátky že tento stroj vyrábí, jsou podobné v tloušťce rotační mikrotom, nicméně, to řezy tkání, které jsou mnohem „tvrdší“ a jsou proto těžko plátek – větší tlak je kladen na vzorku tak hladký řez může být provedena. Biologové používají tento typ stroje pro řezání kostí a dalších obtížných materiálů.

3. Vibrační

vibrační čepel je určující charakteristikou tohoto stroje. To umožňuje řezání tvrdých a tvrdých vzorků bez použití tlaku, který by vštípil jiný mechanismus se stacionární čepelí. Tento stroj vyrábí plátky o tloušťce 30-50 mikrometrů.

4. Pila

Pokud není možné přesně a efektivně řezat sáňkový mikrotom, je nutný stroj na bázi pily. Podobně jako u saní se tento mikrotom používá, když jsou materiály extrémně tvrdé, jako jsou kosti nebo zuby, a vyžadují větší sílu. K řezání se používá rotující pila. Tento mikrotom produkuje plátky o tloušťce minimálně 30 mikrometrů.

5. Laser

laser se používá pro přesné řezání, aniž by se skutečně dotkl vzorku. Díky nejmodernější technologii umožňuje tento stroj bezkontaktní krájení bez tepelného poškození. Laserový stroj krájí tkáně o tloušťce 10-100 mikrometrů. Jedná se také o automatický stroj, kde by ostatní byly klasifikovány jako ruční.

Vlastnosti & Části Mikrotom

Existují různé mikrotomy, ale všechny se skládají ze tří hlavních částí:

  1. Základní (mikrotom těla)
  2. Nůž nástavec a čepel
  3. Materiál nebo tkáně držák

Některé mikrotomy mít více funkcí, jako kancelářskou svorku držet zařízení na místě. Některá zařízení se používají ručně, zatímco jiná jsou automatická, takže specifické vlastnosti by se v těchto mikrotomech lišily.

bez ohledu na použitý stroj, mikrotomie v podstatě jde dolů na nůž. Ostrá čepel bez skvrn je nezbytná pro přesné a účinné krájení vzorku. Obvykle, nože jsou buď rovinné konkávní, klínovitý, nebo dláta ve tvaru vzory.

Jak Provozovat Mikrotom Stroje

ještě předtím, Než pomocí mikrotom, vzorky musí být začleněny, což znamená, že by měl být kladen na více tuhé fixační. K tomu je třeba vzorek pokrýt voskem nebo epoxidem. To se pak umístí do formy, aby se ochladilo a ztvrdlo, takže je připraveno k krájení.

pak se u většiny mikrotomových strojů řezá řez posunutím držáku materiálu směrem k čepeli, zatímco nůž je pevně držen. Skutečný krájecí pohyb, ať už je ve svislé nebo vodorovné rovině, je kombinován s předběžným mechanismem, takže držák materiálu se pohybuje po každém řezu. Vzdálenost, kterou se držák pohybuje, lze zvolit pomocí nastavení měřítka na těle stroje.

pokyny pro péči

nejdůležitější instrukcí je každodenní čištění přístroje. Pokud jej pravidelně nečistíte, nůž se může zrezivět a bude těžší a těžší efektivně krájet vzorky. Jak již bylo řečeno, měli byste vždy odstranit nůž před čištěním.

je také nezbytné odstranit odpad z nože a stroje. To lze provést pomocí suchého štětce. Nečistěte vnější povrchy alkoholem nebo xylenem, protože stroj pravděpodobně není odolný vůči těmto rozpouštědlům a je třeba se vyhnout expozici xylenu. Doporučuje se odstraňovač parafínu, jemné komerční domácí čisticí prostředky nebo mýdlo a voda.

je nesmírně důležité zajistit, aby během čištění nevnikla do přístroje žádná tekutina. To by mohlo ohrozit účinnost stroje a mohlo by potenciálně poškodit vnitřní fungování mikrotomu.

Pro finální péče instrukce, stejně jako u většiny vědeckých zařízení, je doporučeno mít nástroje kontrolovány alespoň jednou za rok kvalifikovaným servisním technikem.

Závěrem lze říci, že existuje mnoho různých druhů mikrotomových strojů komerčně dostupných. Před zakoupením stroje je důležité pochopit typ úlohy nebo vzorku, který potřebuje krájení. Porozumění komponentám a způsobu, jakým konkrétní řezy stroje jsou také nezbytné pro výběr správného mikrotomu.

  1. Gudrun Lang (2006). Histotechnik. Praxislehrbuch für die Biomedizinische Analytik.(Histology: practical textbook for analytical biomedicine). Springer, Wien/New York. ISBN 978-3-211-33141-5.
  2. https://www.leicabiosystems.com/pathologyleaders/steps-to-better-microtomy-flotation-section-drying/
  3. https://www.sciencedirect.com/topics/neuroscience/microtome
  4. https://biomedizin.unibas.ch/fileadmin/user_upload/biomedizin/core_facilities/histology/Guides/Paraffin_methods.pdf
  5. https://www.labmanager.com/lab-health-and-safety/2010/06/microtome-safety#.XV6kn5NKiL8
  6. https://brainresearchlab.com/information/microtome-knife-use-and-care/
  7. http://www.microbehunter.com/parts-of-a-microtome/
  8. https://www.labce.com/spg605374_instrumentation_for_microtomy_rotary_microtome_par.aspx