Articles

Escherichia coli O157:H7 stress og virulensgenekspression på Romainsalat ved hjælp af komparativ realtids PCR

fødevarebårne udbrud tilskrevet kontaminering af friske produkter med Escherichia coli O157:H7 er et voksende problem. Især er bladgrønne grøntsager, herunder salat og spinat, modtagelige for forurening med vandingsvand, gødning og fødevareforarbejdnings-og opbevaringspraksis. Overlevelsen af E. coli O157:H7 og naturlig mikroflora på Romaine salat opbevaret ved 4 grader C og 15 grader C over en 9-dages periode blev evalueret ved pladetællinger. En totrins revers-transkription sammenlignende kvantitativ realtids-PCR-analyse blev anvendt til at evaluere ekspression af gener, der koder for a-underenheden af Shiga-toksin 1 og 2 (stks1a og stks2a), intimin (eaeA), flagellin (fliC), sigmaS-generel stress sigma-faktor (RPO ‘ er) og jernsuperilte-dismutase (sodB) i E. coli O157:H7. Resultater indikerer, at reduktion af opbevaringstemperaturen fra 15 grader C til 4 grader C signifikant (P<0.05) reducerede væksten af Escherichia coli O157:H7 på Romainsalat, men levedygtige populationer forblev efter afslutningen af begge opbevaringsperioder. Ved afslutningen af opbevaringsperioden blev der observeret et fald på 0,430 og 0,180 log i E. coli O157:H7 ved henholdsvis 4 grader C og 15 grader c. Under begge opbevaringstemperaturer steg det samlede antal aerobe plader i løbet af eksperimentets varighed. En stigning i E. coli O157:H7 foldekspression blev observeret med stks2a. Selvom stc1a udviste opregulering for alle opbevaringsbetingelser, variabel genekspression blev observeret i hele opbevaringsperioden. Derudover blev fliC opreguleret under opbevaring ved 15 grader C, mens transkription ved 4 grader C-opbevaring kun ændrede sig lidt. Ekspression af eaeA var variabel ved 15 grader C med en tendens til nedregulering, men dette gen var lidt opreguleret, når det blev opbevaret ved 4 grader C. En lille opregulering af RPO ‘ er og sodB blev også observeret ved 4 grader C. afslutningsvis antyder vores resultater E. coli O157:H7 kan blive mere virulent med langvarig opbevaring af Romaine salat, især når den opbevares ved køletemperaturer.