UHPLC og UPLC er begge væskekromatografiteknikker, der anvendes til at adskille de forskellige komponenter, der findes i blandinger. Kommentar: forudsætningen som nævnt indebærer en forskel mellem UHPLC og UPLC, når de faktisk er de samme teknikker. I 2004 lancerede farvande teknikken kendt som UltraPerformance LC (UPLC) baseret på sub 2-mikron porøse partikler og varemærket forkortelsen UPLC. Da leverandører kom ind på markedet med lignende instrumenter, blev UHPLC opfundet som en måde at henvise til instrumenter, der ligner UPLC, da UPLC er et vandmærke. De to udtryk forstås som synonyme. Den muliggør teknologi her for både UHPLC og UPLC instrumenter er sub 2-mikron partikler; de fleste HPLC metoder er udviklet på partikler mellem 2,5 – 5 mikron i størrelse. De mindre sub 2-mikron partikler kræver et højere tryk for at arbejde med, så UHPLC-eller UPLC-systemer skal være i stand til at fungere over 6.000 PSI, hvilket typisk er den øvre grænse for konventionelle HPLC ‘ er.

en blanding er et stof, der omfatter to eller flere kemiske grundstoffer og forbindelser, som ikke er blevet bundet sammen under en kemisk reaktion. Kommentar: “væskekromatografi” er adskillelsen af komponenter opløst sammen i en væske. Ved at bruge en søjle interagerer/diffunderer komponenterne i blandingen over søjlen og ind i dens porer eller overflade i større eller mindre grad og adskilles. Da sub 2 mikronpartikler er så små, er diffusionsvejen mellem prøveanalyterne og den stationære fase kortere, og effektiviteten er højere. Faste kernepartikler, som nu er stigende, er indkapslet af en overflade af små partikler, så diffusion stien er mindre stadig, og effektiviteten er højere, men afhænger stadig af “tykkelsen) af laget af partikler omkring den faste “kerne”.
HPLC, UHPLC og UPLC ‘ s forgænger, var afhængige af pumper, der førte en væske under tryk indeholdende en prøveblanding gennem absorberende materialer. Kommentar: pumper er påkrævet med både UHPLC og UPLC. Når du skubber en væske gennem den pakkede søjle, kræves der en pumpe, der producerer modtryk. I nogle tilfælde er den mobile fase under tryk, inden den kommer i kontakt med den analytiske kolonne, men prøven introduceres senere.

i løbet af de sidste 6 år er UHPLC og UPLC kommet frem. Både UHPLC og UPLC gør det muligt for forskere at kæmpe med mindre partikler hurtigere, end det tidligere var muligt, men der findes vigtige forskelle mellem de to systemer. Kommentar: i stedet for at skulle kæmpe med mindre partikler, gør UHPLC og UPLC det muligt for forskere at kæmpe med mere analytiske udfordringer hurtigere, end det tidligere var muligt.

Hvad er UPLC?

UPLC (ultra performance væskekromatografi) systemer blev først introduceret i 2004. Ved næsten at fordoble det samlede driftstryk (til 15.000 psi) for at opnå hurtigere strømningshastigheder var UPLC-udviklere i stand til at opnå lige eller bedre opløsning LC-separationer i meget kortere tidsrammer. Kommentar: i stedet for at “fordoble det samlede driftstryk for at opnå hurtigere strømningshastigheder” er det bedre at sige … “for at drage fordel af 2 mikronpartikler kræves højere tryk.”Det typiske ID for en UPLC-kolonne er 2.1 mm og generelt strømningshastigheder er lavere end HPLC, men på grund af effektivitetsforøgelsen, forklaret ovenfor, reduceres den samlede separationstid. Med hensyn til effektivitet, nøjagtighed og produktivitet var dette gode nyheder for laboratorier over hele verden. UPLC er en variant af HPLC, også ved hjælp af kolonner og pumper. Kommentar: uanset om vi taler om HPLC, UPLC eller UHPLC, anvender hver af disse teknikker kolonner og pumper.

hvad er UHPLC?

derimod fungerer UHPLC (ultra high performance væskekromatografi) i området 20.000 psi. Kommentar: dette er simpelthen ikke sandt. Nogle UHPLC-systemer kan gå så højt, men ikke alle. Generelt er UPLC-instrumenter lavere dispersion, lavere volumen (ekstra kolonne) systemer, der kan fungere ved højere tryk.? I modsætning til UPLC er navnet ikke varemærkebeskyttet og kan henvise til en række producenters systemer. UHPLC-systemer blev designet med et lavt opholdsvolumen i tankerne. Kommentar: Dvælevolumen er et udtryk, der refererer til gradientseparationer; ekstra kolonnevolumen og spredning er bedre udtryk at bruge. UPLC ‘ er har lavere dvælevolumener, men det skyldes, at volumenet med ekstra kolonne minimeres. At have et lavt volumen er ikke den eneste ydeevneattribut for et UPLC-system. De tilbyder højere effektivitetshastigheder end UPLC-systemer, men er også tilbøjelige til blokering. Kommentar: Ikke sikker på, hvor dette kommer fra. Hvis en prøve ikke er forberedt korrekt, så er det muligt at tilstoppe en sub 2-mikron UHPLC eller UPLC kolonne. Det er kolonnen, der kan blive tilstoppet, ikke systemet. Artiklen UHPLC eller Core-Shell, som er vinderen? diskuterer fordelene ved de relative systemer mere detaljeret.

hvad bruges UPLC-og UHPLC-systemer til?

UPLC og UHPLC er blevet brugt til mange formål, herunder juridiske, farmaceutiske og medicinske. Systemerne er også vigtige redskaber inden for forskning og fremstilling. Uden HPLC, UPLC og UHPLC ville forskere kæmpe for at opdage tilstedeværelsen af præstationsfremmende stoffer i prøverne fra atleter, mens detektering af D-vitaminniveauer i blodserum ville tage langt længere tid end det gør i dag. Kommentar: hastigheden, opløsningen og følsomheden af UHPLC og UPLC instrumenter gør dem ideelt egnet til brug med MS. Den overkommelige pris og brugervenlighed af en ny generation af MS-instrumenter gør LC-MS mere praktisk til flere laboratorier.

disse teknologier repræsenterer derfor et vigtigt skridt fremad. Naturligvis udvikles endnu hurtigere og mere præcise teknologier, når du læser denne artikel. Imidlertid, for tiden, UPLC-og UHPLC-systemer forbliver på forkant med meget videnskabelig bestræbelse.

på det seneste har fremskridt inden for både analytisk instrumentering og stationær fasekemi ført til, at kromatografer revurderer de systemer og metoder, de bruger dagligt. Artiklen optimering kerne-Shell UHPLC kolonner til forbedring af Protein og peptid separationer omhandler dette mere detaljeret.

*ændringer i rød leveret af
Vand Corporation
34 Maple Street
Milford
MA 01757
USA