beskrivelse af Microtome

generelt er mikrotomer involveret i processen med at forberede prøver af biologisk materiale, der skal undersøges under et mikroskop. Specifikt skærer de materiale i ekstremt tynde stykker, så de kan passe ind i et mikroskopglas og studeres af forskere. Det holder materialet på plads, mens et meget skarpt glas eller en diamantkantet kniv skiver det i stykker et par titalls mikron tykke.

historien bag Mikrotomi og Mikrotomenheden

da mikroskopet blev opfundet, havde forskere brug for at skære materiale. Før mikrotomet blev oprettet, ville forskere manuelt skære stykker materiale, de ønskede at inspicere ved hjælp af et barberblad. Denne metode til fremstilling af prøver til undersøgelse var kedelig og vanskelig, så det var naturligvis nødvendigt at opfinde et alternativ. Cummings, en fremstillingsvirksomhed, designede manuelle skæreinstrumenter lavet af træ i 1770. Disse instrumenter blev udelukkende brugt i botanik til skæreanlæg. Derefter blev udtrykket” mikrotom ” opfundet i 1839 af Chevalier.

det var dog faktisk Rudolf Thoma, der designede det allerførste officielle mikrotom, kaldet “Thoma microtome”. Derfra udviklede mikrotomet sig til forskellige typer og stilarter, der blev brugt til forskellige formål.

mest populære typer Mikrotommaskiner

1. Rotary

den mest alsidige og ofte anvendte version. Det fungerer på en roterende måde. Kniven er ubevægelig og forbliver i vandret position. Maskinens krop selv roterer rundt om bladet og skærer som det går. For eksempel holder maskinen prøven lige over kniven, så bevæger den sig nedad over kniven, skærer et stykke væv af, så trækker maskinen tilbage og bevæger sig opad, før den starter igen. Dette producerer vævsskiver på 1-60 mikrometer.

2. Sledge

virker ved at holde prøven stadig i “shuttle”, som derefter går frem og trækker sig tilbage over bladet. Skiverne, som denne maskine producerer, har samme tykkelse som et roterende mikrotom, men det skærer væv, der er meget “hårdere” og derfor er svære at skære – der lægges mere pres på prøven, så der kan laves et glat snit. Biologer bruger denne type maskine til at skære knogler og andre vanskelige materialer.

3. Vibrerende

et vibrerende blad er den definerende egenskab ved denne maskine. Dette gør det muligt at skære hårde og hårde prøver uden at anvende det tryk, som en anden mekanisme med et stationært blad ville indgyde. Denne maskine producerer skiver fra 30-50 mikrometer tykke.

4. Sav

Når en slædemikrotom ikke kan skære præcist og effektivt, er en savbaseret maskine nødvendig. I lighed med en slæde bruges dette mikrotom, når materialer er ekstremt hårde, som knogler eller tænder, og kræver mere kraft. En roterende sav bruges til at skære. Dette mikrotom producerer skiver, der mindst er 30 mikrometer tykke.

5. Laser

en laser bruges til præcis skæring uden faktisk at røre prøven. På grund af den nyeste teknologi muliggør denne maskine ikke-kontaktskæring uden at forårsage termisk skade. Lasermaskinen skiver væv mellem 10-100 mikrometer tykke. Dette er også en automatisk maskine, hvor de andre ville blive klassificeret som manuel.

funktioner & dele af Mikrotomet

der er forskellige mikrotomer, men de består alle af tre hoveddele:

1. Base (microtome body)
2. knivfastgørelse og kniv
3. materiale eller vævs holder

nogle mikrotomer har flere funktioner, som en skrivebordsklemme til at holde maskinen på plads. Nogle enheder bruges manuelt, mens andre er automatiske, så de specifikke funktioner vil variere i disse mikrotomer.

uanset hvilken maskine der bruges, kommer mikrotomi stort set alt ned til kniven. Et skarpt, pletfrit blad er vigtigt for nøjagtigt og effektivt at skære en prøve. Generelt er knivene enten plane konkave, kileformede eller mejselformede designs.

Sådan betjenes en Mikrotomemaskine

før du selv bruger et mikrotom, skal prøver indlejres, hvilket betyder, at de skal sættes i et mere stift fikseringsmiddel. For at gøre dette skal prøven være dækket af voks eller Epoksi. Dette placeres derefter i en form for at afkøle og hærde, hvilket gør den klar til at skære.

derefter skæres en sektion med de fleste mikrotommaskiner ved at føre materialeholderen mod bladet, mens kniven holdes stift stille. Den faktiske skærebevægelse, hvad enten den er på et lodret eller vandret plan, kombineres med forskudsmekanismen, så materialeholderen flyttes efter hver skive. Afstanden, som holderen flyttes, kan vælges ved hjælp af en skalaindstilling på maskinens krop.

plejeinstruktioner

den vigtigste instruktion er at rengøre instrumentet dagligt. Hvis du ikke rengør det regelmæssigt, kan kniven blive rusten, og det bliver sværere og sværere at skære prøver effektivt. Når det er sagt, skal du altid fjerne kniven inden rengøring.

det er også vigtigt at fjerne affald fra klingen og maskinen. Dette kan gøres ved hjælp af en tør pensel. Rengør ikke de ydre overflader med alkohol eller kylen, da maskinen sandsynligvis ikke er resistent over for disse opløsningsmidler, og udsættelse for kylen bør undgås. Paraffinfjerner, milde kommercielle husholdningsrengøringsmidler eller sæbe og vand anbefales.

det er yderst vigtigt at sikre, at der ikke kommer væske ind i instrumentets inderside under rengøring. Dette kan kompromittere maskinens effektivitet og potentielt skade mikrotomets indre funktion.

for den endelige plejeinstruktion, som med de fleste videnskabelige udstyr, anbefales det at få instrumentet inspiceret mindst en gang om året af en kvalificeret servicetekniker.

afslutningsvis er der mange forskellige slags mikrotommaskiner kommercielt tilgængelige. Det er vigtigt at forstå den type job eller prøve, der skal skæres, før du køber en maskine. At forstå komponenterne og den måde, en bestemt maskine skiver på, er også vigtig for at vælge det rigtige mikrotom.Gudrun Lang (2006). Histotechnik. Praxislehrbuch für die Biomedizinische Analytik.(Histology: practical textbook for analytical biomedicine). Springer, Wien/New York. ISBN 978-3-211-33141-5.