tekst

kloning og ekspression

nonacronym ‘Vgf8a,’ eller Vgf, er navnet givet af Levi et al. (1985) til et gen opdaget i PC12-rottefeokromocytomcellelinjen ved aktivering af disse celler til en neuronal fænotype ved hjælp af nervevækstfaktor (NGF; 162030). Levi et al. (1985) klonet rotte Vgf8a.

Canu et al. (1997) bemærkede, at rotte Vgf koder for et forudsagt 70-kD polypeptid, der deler ligheder med secretogranin/chromogranin-familien (se 118920) og findes i sekretoriske granuler af undergrupper af neuroner og endokrine celler. Udtryk for Vgf er udviklingsmæssigt reguleret. Hos det voksne dyr reguleres både mRNA og proteinniveauer i forskellige områder af hjernen som reaktion på forskellige stimuli (til gennemgang, se Ferri og Possenti (1996)). Canu et al. (1997) klonet humant VGF, som koder for et udledt 616-aminosyreprotein indeholdende en 22-aminosyresignalsekvens. Northern blot-analyse af humane væv detekterede et VGF-transkript på 2,7 kb kun i hjernen.

Bartolomucci et al. (2006) erklærede, at rotte Vgf koder for et 617-aminosyreforløberprotein, der forarbejdes til kortere neuropeptider. 62, der er opkaldt efter dets første 4 aminosyrer og det samlede antal rester, er et stort VGF-peptid i rottens centralnervesystem. Bartolomucci et al. (2006) identificerede et andet rottepeptid, TLK-21, der stammer fra den samme region af VGF-forløberen som TLK-62. ved massespektrometrisk analyse af C-terminalt amiderede peptider udskilt fra en human medullær skjoldbruskkirtelcarcinomcellelinie, Yamaguchi et al. (2007) identificeret NERP1 og NERP2. 26-og 38-aminosyrepeptiderne har molekylmasser på henholdsvis 2,7 og 4,1 kD og er afledt af VGF-rester 281 til 306 og 310 til 347. Begge peptider blev amideret før sekretion. Yamaguchi et al. (2007) fandt, at rotte Nerp1 og Nerp2, som indeholder henholdsvis 25 og 38 aminosyrer, blev stærkt udtrykt i rottehypotalamus. Immunhistokemisk analyse detekterede rottepeptiderne i supraoptiske kerner (SON) og i både de magnocellulære og parvocellulære divisioner af paraventrikulære kerner (PVN). Immunogold elektronmikroskopi afslørede kolokalisering af rotte Nerp ‘er med vasopressin (AVP; 192340) i lagergranuler, men Nerp’ erne blev sjældent kolokaliseret med oksitocin (167050).

Levi et al. (1985) bestemte dosis-responskurven for induktion af rotte Vgf8a af NGF. Canu et al. (1997) bemærkede, at rotte Vgf også reguleres af hjerneafledt neurotrofisk faktor (BDNF; 113505) og neurotrophin-3 (NTF3; 162660) i primære kulturer af kortikale eller hippocampale neuroner (til gennemgang, se Ferri og Possenti (1996)).

Bartolomucci et al. (2006) viste, at kronisk intracerebroventrikulær injektion af TLK-21 øgede hvileenergiudgifter og rektal temperatur hos mus. Disse virkninger blev parallelt med øget adrenalin og opregulering af beta-1 adrenerg receptor (ADRB1; 109630) i brunt fedtvæv og Ppar-delta (PPARD; 600409), Adrb3 (109691) og afkobling af protein-1 (UCP1; 113730) i hvidt fedtvæv. Hos mus fodret med en fedtrig diæt forhindrede TLP – 21 stigninger i krops-og hvide fedtvævsvægte samt hormonelle ændringer forbundet med et fedtholdigt regime. TLP-21 udøvede sine virkninger ved at stimulere autonom aktivering af binyremedulla og fedtvæv.

Ved hjælp af mikroarray-analyse, Hunsberger et al. (2007) fandt, at motion opreguleret ekspression af Vgf i mus hippocampus, en hjerneområde impliceret i humør og antidepressive reaktioner. Administration af et syntetisk VGF-afledt peptid producerede et antidepressivt respons hos mus, og omvendt producerede mutation af Vgf hos mus de modsatte virkninger.

Yamaguchi et al. (2007) fandt ud af, at Vgf mRNA blev opreguleret i rotten PVN og SON som reaktion på vandmangel. De fandt også, at nerp1 og Nerp2 undertrykte vasopressinfrigivelse induceret ved intracerebroventrikulær injektion af hypertonisk NaCl eller angiotensin II (106150) hos rotter. Nerp ‘ er undertrykte også basal og angiotensin II-induceret vasopressinsekretion fra hypothalamiske eksplantater in vitro. Bioaktivitet af Nerp ‘ er krævede C-terminal amidation. Anti-Nerp-antistoffer annullerede plasma – vasopressinreduktion som reaktion på vandbelastning, hvilket indikerer, at Nerp ‘ er er potente endogene suppressorer af vasopressinfrigivelse. Yamaguchi et al. (2007) konkluderede, at Nerp ‘ er modulerer kropsvæskehomeostase.

Canu et al. (1997) demonstrerede, at det humane VGF-gen med en enkelt kopi spænder over 6 kb genomisk DNA og indeholder 2 eksoner. Hele VGF-proteinet kodes af ekson 2, mens ekson 1 kun indeholder 5-prime ikke-oversat sekvens. Den strukturelle organisering af det humane gen svarer til den, der er beskrevet for rotte-VGF-genet (Salton et al., 1991), og både de oversatte og de ikke-oversatte regioner viser en høj grad af sekvenshomologi til rottegenet.

Ved fluorescens in situ hybridisering, Canu et al. (1997) tildelte VGF-genet til 7k22.

Hahm et al. (1999) fandt ud af, at homosygøse VGF-null-mus var små, hypermetaboliske, hyperaktive og infertile. VGF-null mus viste markant reduceret leptin (LEP; 164160) niveauer og fedtdepoter og ændret proopiomelanocortin (POMC; 176830), neuropeptid Y (NPY; 162640) og AgRP (602311) ekspression. Vgf mRNA blev induceret i hypothalamiske bueformede kerner af fastede normale mus. Hahm et al. (1999) foreslog, at VGF kan have en rolle i reguleringen af energihomeostase.