beskrivelse

rnalater RNA Stabiliseringsopløsning stabiliserer og beskytter cellulært RNA i intakte, ufrosne vævsprøver, hvilket eliminerer behovet for straks at behandle vævsprøver eller at fryse prøver i flydende nitrogen til senere behandling. Vævsstykker kan høstes og nedsænkes i Rnalater RNA-Stabiliseringsopløsning til opbevaring uden at bringe kvaliteten eller mængden af RNA opnået efter efterfølgende RNA-isolering i fare. Fordele ved at bruge RNALATER RNA Stabiliseringsløsning:
• effektivitet—stabiliser RNA i 1 dag ved 37 kg C, 1 uge ved 25 kg C, 1 måned ved 4 kg C eller på ubestemt tid ved -20 kg C
• enkelhed—et enkelt reagens, der straks inaktiverer Rnaser og stabiliserer RNA i væv eller celler
• bekvemmelighed—ingen grund til at fryse prøver i flydende nitrogen eller haste prøver tilbage til laboratoriefryser
• mobilitet—perfekt til vævsopsamling ‘i marken’
• alsidighed—kompatibel med mange RNA-isolationsprocedurer, inklusive de fleste RNA-isolationssæt
applikationer
> rnalater RNA stabiliseringsopløsning er blevet testet på en række forskellige E. coli, Ksenopus, fisk og Drosophila. Det er ideelt til:
• Beskyttelse af RNA-integritet i væv rig på Rnaser
• indsamling af prøver fra forskellige tidspunkter uden at skulle behandle prøverne fra hvert tidspunkt med det samme
• arkivering af væv til fremtidig mikrodissektion
• nedsænkning af dyrehulrum eller organer for at stabilisere RNA under lange dissektionsprocedurer
• indsamling af prøver på steder (f. eks. hvor øjeblikkelig RNA-isolering ikke er mulig
• forsendelse af prøver på våd is eller endda ved stuetemperatur, hvis de sendes natten over
rnalater RNA-Stabiliseringsopløsningsprocedure
det dissekerede væv (mindre end 0,5 cm i en hvilken som helst dimension) er simpelthen nedsænket i cirka 5 volumener RNAlater-opløsning ved stuetemperatur. Opløsningen gennemsyrer cellerne, stabiliserer RNA ‘ et. Prøven kan derefter opbevares på ubestemt tid ved -20 kr C (vævet fryser ikke), ved 4 kr C i op til en måned eller ved 25 kr C i op til en uge. Til RNA-isolering fjernes vævet simpelthen fra rnalater-opløsningen og behandles som om det netop var blevet høstet. De fleste væv kan overføres direkte til en lysisbuffer og homogeniseres. Prøver behandlet med rnalater-opløsning og derefter frosset kan formales med mørtel og støder eller optøes og behandles som frisk væv uden bekymring for cellebrud og frigivelse af Rnaser, da Rnaserne allerede er inaktiveret. Celler kan spindes ud og derefter tilsættes til lysisbuffer, eller i nogle tilfælde kan RNAlater-opløsning tilsættes sammen med cellerne direkte til lysisbufferen.RNALATER RNA-Stabiliseringsløsning er kompatibel med et-trins RNA-isoleringsmetoder, såsom Trisol-reagens; med glasbindingsmetoder, såsom Siagen ‘ s RNeasy eller Ambion RNA-kittet; med syrefenolekstraktionsmetoder, såsom Ambion ToTALLY RNA-kit; og med metoder, der bruger oligo(dT) udvælgelse af mRNA, såsom Ambion Poly(A)Puristkit. Intern forskning, såvel som for nylig offentliggjort uafhængig forskning, indikerer, at brugen af RNALATER RNA-Stabiliseringsopløsning til vævslagring ikke påvirker resultatet af efterfølgende RNA-ekspressionsanalyseforsøg sammenlignet med andre behandlingsmetoder.