Escherichia coli O157:H7 Stress- und Virulenzgenexpression auf Römersalat mit vergleichender Echtzeit-PCR
Lebensmittelbedingte Ausbrüche, die auf die Kontamination von Frischwaren mit Escherichia coli O157: H7 zurückzuführen sind, sind ein wachsendes Problem. Insbesondere grünes Blattgemüse, einschließlich Salat und Spinat, ist anfällig für Kontaminationen durch Bewässerungswasser, Gülle sowie Lebensmittelverarbeitungs- und Lagerpraktiken. Das Überleben von E. coli O157:H7 und natürliche Mikroflora auf Römersalat gelagert bei 4 Grad C und 15 Grad C über einen Zeitraum von 9 Tagen wurde durch Plattenzählungen ausgewertet. Ein zweistufiger Reverse-Transkriptions-vergleichender quantitativer Echtzeit-PCR-Assay wurde verwendet, um die Expression von Genen zu bewerten, die für die A-Untereinheit von Shiga-Toxin 1 und 2 (stx1A und stx2A), Intimin (eaeA), Flagellin (fliC), sigmaS – general Stress Sigma factor (RPOs) und Eisen-Superoxid-Dismutase (sodB) in E. coli O157: H7 kodieren. Ergebnisse zeigen, dass die verringerung der lagerung temperatur von 15 grad C zu 4 grad C deutlich (P<0.05) verringerte das Wachstum von Escherichia coli O157: H7 auf Römersalat, jedoch blieben nach dem Ende beider Lagerzeiten lebensfähige Populationen erhalten. Am Ende der Lagerzeit wurde eine Abnahme von 0,430 und 0,180 log in E. coli O157: H7 bei 4 Grad C bzw. 15 Grad C beobachtet. Bei beiden Lagertemperaturen stieg die Gesamtzahl der aeroben Platten über die Dauer des Experiments an. Ein Anstieg der E. coli O157:H7-fachen Expression wurde mit stx2A beobachtet. Obwohl stx1A für alle Lagerbedingungen eine Hochregulierung aufwies, wurde während der gesamten Lagerzeit eine variable Genexpression beobachtet. Darüber hinaus wurde fliC während der Lagerung bei 15 Grad C hochreguliert, während sich die Transkription bei 4 Grad C Lagerung nur geringfügig änderte. Die Expression von eaeA war bei 15 Grad C variabel mit einer Tendenz zur Herunterregulierung, jedoch war dieses Gen leicht hochreguliert, wenn es bei 4 Grad C gelagert wurde. Eine leichte Hochregulierung von RPOs und sodB wurde auch bei 4 Grad C beobachtet. Zusammenfassend deuten unsere Ergebnisse darauf hin E. coli O157:H7 kann bei längerer Lagerung von Römersalat virulenter werden, insbesondere bei Kühltemperaturen.