RESUMEN: Se investigó el desarrollo de resistencia a la ampicilina (ácido aminofenilacetamidopenicilánico) y a la penicilina G seleccionando variantes resistentes de cepas de Escherichia coli. La resistencia se produjo de manera gradual. Las cepas progenitoras contenían pequeñas cantidades de penicilinasa y la producción de la enzima por variantes resistentes aumentó en relación con el aumento de la resistencia. Se obtuvieron pruebas de que la producción de penicilinasa era responsable de este aumento de la resistencia. Mediante el uso de variantes resistentes y organismos resistentes a la ampicilina de origen natural, se encontró que la producción de pequeñas cantidades de penicilinasa era suficiente para conferir un alto grado de resistencia a las bacterias gramnegativas examinadas. En contraste, las bacterias grampositivas requerían cantidades mucho mayores de penicilinasa para una resistencia de alto grado. Se sugiere que una razón importante para esta diferencia es la compleja pared celular que contiene lípidos de las bacterias gramnegativas, que ralentiza la penetración de la penicilina y permite que pequeñas cantidades de penicilinasa protejan la célula. Se encontró que la penicilinasa de todos los organismos gramnegativos investigados era una β-lactamasa y era más activa contra la penicilina G que contra la ampicilina. Esto proporciona una explicación para la mayor actividad de la ampicilina contra bacterias gramnegativas.