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Escherichia coli O157:H7 expresión génica de estrés y virulencia en lechuga romana mediante PCR comparativa en tiempo real

Los brotes transmitidos por alimentos atribuidos a la contaminación de productos frescos con Escherichia coli O157:H7 son una preocupación creciente. En particular, las verduras de hoja verde, incluidas la lechuga y la espinaca, son susceptibles a la contaminación por el agua de riego, el estiércol y las prácticas de procesamiento y almacenamiento de alimentos. La supervivencia de E. coli O157:La H7 y la microflora natural en lechuga romana almacenada a 4 grados C y 15 grados C durante un período de 9 días se evaluaron mediante recuentos de platos. Se empleó un ensayo de PCR en tiempo real comparativo cuantitativo de transcripción inversa de dos pasos para evaluar la expresión de genes que codifican para la subunidad A de la toxina Shiga 1 y 2 (stx1A y stx2A), intimina (eaeA), flagelina (fliC), sigmaS factor factor sigma de estrés general (RPOs) y superóxido dismutasa de hierro (sodB) en E. coli O157:H7. Los resultados indican que la reducción de la temperatura de almacenamiento de 15 grados C a 4 grados C es significativa (P< 0.05) redujo el crecimiento de Escherichia coli O157:H7 en lechuga romana, sin embargo, las poblaciones viables permanecieron después del final de ambos períodos de almacenamiento. Al final del período de almacenamiento, se observó una disminución de 0,430 y 0,180 log de E. coli O157:H7 a 4 grados C y 15 grados C, respectivamente. Bajo ambas temperaturas de almacenamiento, el recuento total de placas aeróbicas aumentó durante la duración del experimento. Se observó un aumento de la expresión de E. coli O157:H7 con stx2A. Aunque stx1A mostró una regulación al alza para todas las condiciones de almacenamiento, se observó una expresión génica variable durante todo el período de almacenamiento. Además, fliC se reguló al alza durante el almacenamiento a 15 grados C, mientras que la transcripción a 4 grados C solo cambió ligeramente. La expresión de eaeA fue variable a 15 grados C con una tendencia a la regulación a la baja, sin embargo, este gen se reguló ligeramente al alza cuando se almacenó a 4 grados C. También se observó una ligera regulación al alza de RPOs y sodB a 4 grados C. En conclusión, nuestros resultados sugieren E. coli O157:H7 puede volverse más virulento con el almacenamiento prolongado de lechuga romana, particularmente cuando se almacena a temperaturas refrigeradas.