Descripción

La solución de estabilización de ARN RNAlater estabiliza y protege el ARN celular en muestras de tejido intactas y descongeladas, eliminando la necesidad de procesar inmediatamente muestras de tejido o congelar muestras en nitrógeno líquido para su procesamiento posterior. Las piezas de tejido se pueden recolectar y sumergir en una Solución de Estabilización de ARN más larga para almacenarlas sin poner en peligro la calidad o cantidad de ARN obtenida después del aislamiento posterior del ARN. Ventajas del uso de la solución de estabilización de ARN RNAlater:
• Eficacia: estabilice el ARN durante 1 día a 37°C, 1 semana a 25°C, 1 mes a 4°C o indefinidamente a -20°C
• Simplicidad: un reactivo único que inactiva inmediatamente las RNasas y estabiliza el ARN dentro de los tejidos o las células
• Conveniencia: no es necesario congelar muestras en nitrógeno líquido ni enviar muestras al congelador del laboratorio
• Movilidad: perfecta para la recolección de tejidos «en el campo»
• Versatilidad: compatible con muchos procedimientos de aislamiento de ARN, incluidos la mayoría de los kits de aislamiento de ARN
la solución de estabilización de ARN más larga se ha probado en una variedad de tejidos de mamíferos, plantas, E. coli, Xenopus, peces y Drosophila. Es ideal para:
• Proteger la integridad del ARN en tejidos ricos en RNasas
* Recoger muestras de diferentes puntos de tiempo sin tener que procesar las muestras de cada punto de tiempo inmediatamente
* Archivar tejidos para futuras microdisecciones
* Sumergir cavidades u órganos de animales para estabilizar el ARN durante procedimientos de disección prolongados
* Recoger muestras en lugares (p. ej., hospitales, sitios de campo, el transbordador espacial) donde no es posible el aislamiento inmediato del ARN
• Envío de muestras en hielo húmedo o incluso a temperatura ambiente si se envían durante la noche
Procedimiento de solución de estabilización de ARN más ter
El tejido disecado(menos de 0,5 cm en cualquier dimensión) simplemente se sumerge en aproximadamente 5 volúmenes de solución más TER a temperatura ambiente. La solución penetra las células, estabilizando el ARN. La muestra se puede almacenar indefinidamente a -20°C (el tejido no se congela), a 4°C hasta un mes o a 25°C hasta una semana. Para el aislamiento del ARN, el tejido simplemente se extrae de la solución RNAlater y se trata como si acabara de ser cosechado. La mayoría de los tejidos pueden transferirse directamente a un tampón de lisis y homogeneizarse. Las muestras tratadas con solución RNAlater y luego congeladas se pueden moler con mortero o descongelar y procesar como tejido fresco sin preocuparse por la ruptura celular y la liberación de RNasas, ya que las RNasas ya se han inactivado. Las células se pueden girar y luego agregar al tampón de lisis, o en algunos casos, se puede agregar una solución más rápida junto con las células directamente al tampón de lisis.Compatible con una variedad de procedimientos La solución de estabilización de ARN más larga es compatible con métodos de aislamiento de ARN en un solo paso, como el reactivo TRIzol; con métodos de unión de vidrio como el RNeasy de Qiagen o el kit Ambion RNAqueous; con métodos de extracción de fenol ácido como el kit Ambion ToTALLY RNA; y con métodos que usan selección de ARNm oligo(dT), como el kit Ambion Poly(A)Purist™. La investigación interna, así como la investigación independiente recientemente publicada, indica que el uso de la Solución de estabilización de ARN RNAlater para el almacenamiento de tejidos no afecta el resultado de los experimentos de análisis de expresión de ARN posteriores en comparación con otros métodos de procesamiento.