Picardo teki elokuvadebyyttinsä Eddie Quistina, sarjamurhaaja-ihmissutena Joe Danten elokuvassa ulvonta (1981). Hänellä oli myös toistuva rooli komediasarja Alice ja pelataan lääkäri episodi Golden Girls. Hän näytteli useita rooleja Danten perheen tieteiselokuvassa Explorers (1985) ja esiintyi myöhemmin Danten elokuvissa The ’Burbs, Looney Tunes: Back in Action, Matinee, Gremlins 2: The New Batch, Small Soldiers ja Innerspace. Picardo näyttelee usein rooleja proteesikerrosten alla, hän on näytellyt myös suolla asuvaa Meg Mucklebonesia Ridley Scottin elokuvassa Legend. Hänellä oli myös pieni rooli hautausurakoitsijana John Landisin elokuvassa Amazon Women on the Moon. Hän ääninäyttelee pfishiä kahdessa Pfish & Chip shortseja, kuten Cartoon Networkin What-a-Cartoon! Näyttää. Picardo kuvaa myös Total Recall-elokuvassa robottimaisen Johnny Cabin ääntä ja kasvoja. Hän esiintyi yhden jakson ER vuonna 1995 kuin Abraham Zimble (Kausi 2 – episodi 6, ”Days Like This”).

vuonna 1993 Picardolla oli lyhyt rooli Joe ”The Meat Man” Mortonina, teurastajana ja Tim Allenin hahmon naapurina komediasarjassa ”Home Improvement”.

tässä 2001, hän vieraili pääosassa 7 päivää episodi ”Revelation”, väitetään olevan aikamatkaaja seitsemän vuotta tulevaisuudessa.

vuonna 2007 hän esitti Principal Whitea elokuvassa Ben 10: Race Against Time. Tässä 2007, hän näytteli independent elokuva ohjaaja Russ Emanuel, P. J., rinnalla John Heard ja Vincent Pastore. Hän näytteli myös Russ Emanuelin elokuvassa Chasing The Green vuonna 2008 yhdessä William Devanen, Jeremy Londonin ja Ryan Hurstin kanssa.

Picardo esiintyi Kojakilla vuoden 1977 jaksossa E-Ring, median edustajana Pentagonissa, raivostuneena isänä Cold Casessa ja poliisina CSI: NY: ssä. Hän oli toistuva vieraileva tähti kaksi jaksoa Kausi 7 Smallville.

virkaatekevänä Picardo oli vuosina 1999-2015 Planetary Societyn johtokunnan jäsen; vuodesta 2015 alkaen hänet valittiin itse johtokuntaan.

muita uran kohokohtia ovat esiintyminen Leonard Bernsteinin messussa sen Euroopan-debyyttikiertueella, esiintyminen Yalen Yliopistoseuran Orpheuksen kanssa & Bacchus a cappella-lauluryhmässä perustutkintoa suorittavana sekä esiintyminen kymmenissä muissa televisio-ja elokuvarooleissa, kuten elokuvassa viimeiset päivämme lapsina.

Picardo esitti lokin äänen Xbox 360-videopelissä liian inhimillisenä. Vuonna 2009 hän esiintyi myös elokuvissa Pushing Daisies, Chuck ja Castle. Myös 2009, hän soitti pääroolin riippumaton psykologinen trilleri elokuva Sensored. Tässä 2010, Picardo oli cameo viimeisessä jaksossa henkilöt tuntematon, jäsenenä ”ohjelman”hallintoneuvoston. Picardo myös ääninäyttelee Robert McNamaraa Call of Duty: Black Opsissa kampanjassa ja ” Zombitilassa ”suoritettuaan kampanjan yhdellä kartalla,”FIVELLÄ”. Picardo esiintyi neljä jaksoa Mentalist alkaen 2012 kautta 2013 Jason Cooper, komisario kultti johtaja Bret Styles.

Picardo esiintyi myös Supernaturalin kuudennen kauden jaksossa ”Clap Your Hands if you Believe” Menninkäisenä.

toukokuussa 2014 Cartoon Hangover ilmoitti Picardon vierailevaksi ääninäyttelijäksi ”Bravest Warriorsin”toisella tuotantokaudella jaksossa ” The Parasox Pub”.

vuonna 2017 Picardo esitti luutnantti Kitanin isää Orvillen ensimmäisen kauden jaksossa ”Tulimyrsky”, ja uusi roolinsa vuoden 2019 jaksossa ”koti”.

Picardo esiintyi omana itsenään Schooledin jaksossa.

Star TrekEdit

vuosina 1995-2001 hänellä oli Emergency Medical hologrammin (EMH) rooli televisiosarjassa Star Trek: Voyager. Ennen kuin Picardo hyväksyttiin tähän rooliin, hän koe – esiintyi aluksi Neelixin rooliin. Myöhemmin hän myös ohjasi kaksi jaksoa.

hänellä oli lisäkappaleita EMH: n roolista vuoden 1996 elokuvassa Star Trek: First Contact ja vuoden 1997 Star Trek: Deep Space Nine jaksossa ”Doctor Bashir, I Presume?”Hän esitti myös tohtori Lewis Zimmermania, EMH: n luojaa, Deep Space Ninen ja Voyagerin jaksoissa.

vuonna 2002 Picardo kirjoitti hologrammin käsikirjan, jonka julkaisi Pocket Books.

vuosina 2007 ja 2008 Star Trek: The Music oli usean kaupungin kiertue John de Lancien kanssa. Picardo ja de Lancie kertoivat orkesteriesityksen ympärille ja kertoivat Star Trekin musiikin historiasta.

vuonna 2015 Picardo Uusi tohtori Lewis Zimmermanin roolin fanisarjan Star Trek: Renegades pilottijaksossa.

StargateEdit

vuonna 2004 hän alkoi näytellä International Oversight Advisory (IOA)-jäsen Richard Woolseya sekä Stargate SG-1: ssä että Stargate Atlantiksessa. Hänen ensiesiintymisensä noissa sarjoissa oli Tähtiportti SG – 1: n jaksossa ”Heroes (Part 2)”.

5.helmikuuta 2008 ilmoitettiin, että Picardo liittyisi Stargate Atlantiksen vakituiseen näyttelijäkaartiin sarjan viidennelle ja viimeiselle tuotantokaudelle. Hän otti tehtäväkseen Atlantiksen retkikunnan komentajan tehtävän.