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Escherichia coli O157:H7 expression du gène de stress et de virulence sur la laitue romaine à l’aide d’une PCR comparative en temps réel

Les épidémies d’origine alimentaire attribuées à la contamination de produits frais par Escherichia coli O157:H7 sont une préoccupation croissante. En particulier, les légumes verts à feuilles, y compris la laitue et les épinards, sont susceptibles d’être contaminés par l’eau d’irrigation, le fumier et les pratiques de transformation et d’entreposage des aliments. La survie d’E. coli O157:H7 et la microflore naturelle de la laitue romaine entreposée à 4 degrés C et 15 degrés C sur une période de 9 jours ont été évaluées par dénombrement des plaques. Un test comparatif de PCR quantitative en temps réel à transcription inverse en deux étapes a été utilisé pour évaluer l’expression de gènes codant pour la sous-unité A de la Shiga-toxine 1 et 2 (stx1A et stx2A), de l’intimine (eaeA), de la flagelline (fliC), du facteur sigma de stress général (RPOs) et de la superoxyde dismutase de fer (sodB) chez E. coli O157:H7. Les résultats indiquent que la réduction significative de la température de stockage de 15 degrés C à 4 degrés C (P< 0.05) a réduit la croissance d’Escherichia coli O157:H7 sur la laitue romaine, cependant, des populations viables sont restées après la fin des deux périodes d’entreposage. À la fin de la période de stockage, une diminution de 0,430 et 0,180 log d’E. coli O157:H7 a été observée à 4 degrés C et 15 degrés C, respectivement. Sous les deux températures de stockage, le nombre total de plaques aérobies a augmenté pendant la durée de l’expérience. Une augmentation de l’expression du pli d’E. coli O157:H7 a été observée avec stx2A. Bien que stx1A ait présenté une régulation à la hausse pour toutes les conditions de stockage, une expression génique variable a été observée tout au long de la période de stockage. De plus, le fliC était régulé à la hausse pendant le stockage à 15 degrés C, tandis que la transcription à 4 degrés C ne changeait que légèrement. L’expression de l’eaeA était variable à 15 degrés C avec une tendance à la régulation à la baisse, cependant, ce gène était légèrement régulé à la hausse lorsqu’il était stocké à 4 degrés C. Une légère régulation à la hausse des RPOs et des sodB a également été observée à 4 degrés C. En conclusion, nos résultats suggèrent E. coli O157:H7 peut devenir plus virulent avec l’entreposage prolongé de la laitue romaine, en particulier lorsqu’elle est conservée à des températures réfrigérées.