Don est le fils de l’ancien arbitre de Premier League Philip Don. Il a participé aux Jeux de la jeunesse de Londres où il a représenté Hounslow au triathlon. Il a participé au premier triathlon olympique aux Jeux olympiques d’été de 2000. Il a pris la dixième place avec un temps total de 1 h 49 min 28,85sec.

Lors du deuxième triathlon olympique aux Jeux Olympiques d’été de 2004, il a été classé dix-huitième avec un temps total de 1 h 54 min 42,13sec. Don a été sélectionné de manière controversée pour les Jeux Olympiques de Pékin en 2008 malgré une interdiction pour des tests de dépistage de drogues manqués hors compétition. Aux Jeux olympiques de Pékin, Don n’a pas réussi à terminer après avoir quitté la natation à la 48e place (sur 55) et a été retiré de la course par les officiels pour avoir été trop en retard sur la jambe de vélo. L’équipe britannique a admis plus tard qu’il était malade avant la course de Pékin.

Le 3 septembre 2006 à Lausanne, Don devient Champion du Monde après avoir terminé 17 secondes devant Hamish Carter. Après la nage, il était dans le groupe de tête sur le vélo mais a manqué la pause initiale. Il a comblé l’écart seul et a pris le groupe de tête au 5e tour sur 6, puis a pris la tête avec Carter sur la course, se dégageant à mi-parcours.

Cependant, sa performance a été éclipsée par une interdiction de trois mois quelques semaines plus tard pour avoir manqué trois tests de dépistage de drogues hors compétition dans un délai de 18 mois avant la course. L’interdiction a expiré le 25 décembre 2006, mais un byelaw signifiait que Don restait inéligible pour la sélection olympique. Le vendredi 25 mai 2007, Don a été autorisé par l’Association Olympique britannique à être sélectionné pour les futurs Jeux Olympiques après avoir fait appel d’une interdiction pour avoir manqué des tests antidopage. Le comité d’appel du BOA, tout en autorisant Don à participer à de futurs Jeux Olympiques, lui reproche d’être « indiscutablement négligent et irresponsable ».

Don a remporté le Triathlon de Londres 2007 en un temps de 1 heure 42 minutes 1 seconde le 5 août 2007. Il a établi un nouveau record du monde Ironman avec 7: 40:23 lors du Championnat d’Amérique du Sud Ironman à Florianopolis, au Brésil, le 28 mai 2017

Deux jours avant les Championnats du Monde Ironman 2017, Tim Don a été heurté par une voiture alors qu’il roulait le long de l’autoroute Queen K près de l’aéroport international de Kona à Hawaï. Il a subi une fracture du bourreau au cou. Il a passé 3 mois à récupérer dans un corset Halo. Six mois après sa blessure, il est revenu pour participer au marathon de Boston 2018 où il a terminé dans un temps de 2: 49: 42.