a mikrotom elsajátítása
A mikrotom leírása
általában a mikrotomok részt vesznek a mikroszkóp alatt vizsgálandó biológiai anyagok mintáinak előkészítésében. Pontosabban, rendkívül vékony darabokra szeletelik az anyagot, így elférnek egy mikroszkóp tárgylemezen, és a kutatók tanulmányozzák őket. Az anyagot a helyén tartja, miközben egy nagyon éles üveg vagy gyémánt szélű kés néhány tíz mikron vastag darabokra szeleteli.
A Mikrotómia és a Mikrotóm eszköz története
a mikroszkóp feltalálásakor a tudósoknak anyagot kellett szeletelniük. A mikrotom létrehozása előtt a tudósok borotvapengével kézzel vágtak le olyan anyagdarabokat, amelyeket meg akartak vizsgálni. A minták tanulmányozásra való előkészítésének ez a módszere unalmas és nehéz volt, ezért természetesen alternatívát kellett találni.
a Cummings gyártó cég 1770-ben fából készült kézi metszőeszközöket tervezett. Ezeket az eszközöket kizárólag növénytanban használták növények vágására. Ezután a “mikrotom” kifejezést 1839-ben Chevalier alkotta meg.
valójában azonban Rudolf Thoma volt az, aki megtervezte a legelső hivatalos mikrotomot, az úgynevezett “Thoma mikrotomot”. Innentől kezdve a mikrotom különböző típusokká és stílusokká fejlődött, amelyeket különböző célokra használtak.
A mikrotom gépek legnépszerűbb típusai
1. Rotary
a legsokoldalúbb és leggyakrabban használt változat. Rotációs módon működik. A kés mozdulatlan, vízszintes helyzetben marad. A gép teste maga forog a penge körül, szeletelve, ahogy megy. Például a gép a mintát közvetlenül a kés felett tartja, majd lefelé mozog a kés felett, levágva a szövet egy darabját, majd a gép visszahúzódik és felfelé mozog, mielőtt újra elindulna. Ez 1-60 mikrométer szövetszeleteket eredményez.
2. Sledge
úgy működik, hogy a mintát még mindig a “shuttle” – ben tartja, amely ezután előrehalad és visszahúzódik a penge felett. A gép által előállított szeletek vastagsága hasonló a rotációs mikrotomhoz, azonban sokkal “keményebb” szöveteket vág, ezért nehéz szeletelni-nagyobb nyomást gyakorolnak a mintára, így sima vágás végezhető. A biológusok ezt a típusú gépet használják csont és más nehéz anyagok vágására.
3. Rezgő
a rezgő penge a gép meghatározó jellemzője. Ez lehetővé teszi a kemény és kemény minták vágását anélkül, hogy olyan nyomást gyakorolna, amelyet egy másik mechanizmus, álló pengével, csepegtetne. Ez a gép 30-50 mikrométer vastag szeleteket állít elő.
4. Fűrész
Ha egy szánkó mikrotom nem tud pontosan és hatékonyan vágni, akkor fűrészalapú gépre van szükség. A szánkóhoz hasonlóan ezt a mikrotomot akkor használják, amikor az anyagok rendkívül kemények, mint a csontok vagy a fogak, és nagyobb erőt igényelnek. A szeleteléshez forgó fűrészt használnak. Ez a mikrotom legalább 30 mikrométer vastag szeleteket állít elő.
5. Lézer
a lézert a pontos vágáshoz használják anélkül, hogy ténylegesen megérintenék a mintát. A legmodernebb technológiának köszönhetően ez a gép lehetővé teszi az érintés nélküli szeletelést anélkül, hogy termikus károkat okozna. A lézergép 10-100 mikrométer vastag szöveteket szeletel. Ez is egy automata gép, ahol a többiek kézi besorolásúak lennének.
jellemzők & a mikrotom részei
különböző mikrotomok vannak, de mindegyik három fő részből áll:
- alap (mikrotóm test)
- Késrögzítés és penge
- anyag-vagy szövettartó
néhány mikrotomnak több funkciója van, például egy asztali bilincs a gép helyben tartásához. Egyes eszközöket manuálisan használnak, míg mások automatikusak, így a sajátosságok ezekben a mikrotomokban különböznek.
a használt géptől függetlenül a mikrotómia alapvetően minden a késhez vezet. Az éles, hibamentes penge elengedhetetlen a minta pontos és hatékony szeleteléséhez. Általában, a kések vagy sík homorúak, ék alakú, vagy véső alakú minták.
hogyan kell működtetni egy mikrotom gépet
mielőtt még mikrotomot használna, a mintákat be kell ágyazni, ami azt jelenti, hogy merevebb fixálóba kell helyezni őket. Ehhez a mintát viasszal vagy epoxival kell lefedni. Ezt azután egy öntőformába helyezzük, hogy lehűljön és megkeményedjen, így készen áll a szeletelésre.
ezután a legtöbb mikrotom gépnél egy szakaszt úgy vágnak le, hogy az anyagtartót a penge felé tolják, miközben a kést mereven mozdulatlanul tartják. A tényleges szeletelési mozgást, függetlenül attól, hogy függőleges vagy vízszintes síkban van-e, az előmechanizmussal kombinálják, úgy, hogy az anyagtartót minden szelet után mozgatják. A tartó mozgatásának távolsága a gép testén lévő skálabeállítás segítségével választható ki.
ápolási utasítások
a legfontosabb utasítás a készülék napi tisztítása. Ha nem tisztítja rendszeresen, a kés rozsdásodhat, és egyre nehezebb lesz a minták hatékony szeletelése. Ennek ellenére tisztítás előtt mindig távolítsa el a kést.
szintén fontos a hulladék eltávolítása a pengéről és a gépről. Ezt száraz ecsettel lehet elvégezni. Ne tisztítsa a külső felületeket alkohollal vagy xilollal, mivel a gép valószínűleg nem ellenáll ezeknek az oldószereknek, és kerülni kell a xilolnak való kitettséget. Paraffinlemosó, enyhe kereskedelmi háztartási tisztítószerek, vagy szappan és víz ajánlott.
rendkívül fontos, hogy a tisztítás során ne kerüljön folyadék a készülék belsejébe. Ez veszélyeztetheti a gép hatékonyságát, és potenciálisan károsíthatja a mikrotom belső működését.
a végső gondozási utasításhoz, mint a legtöbb tudományos berendezésnél, ajánlott, hogy a műszert évente legalább egyszer szakképzett szerviztechnikus ellenőrizze.
összefoglalva, sok különböző típusú mikrotom gépek kereskedelmi forgalomban kapható. Fontos megérteni, hogy milyen típusú munkát vagy mintát kell szeletelni a gép megvásárlása előtt. Az alkatrészek és az adott gép szeletelésének megértése szintén elengedhetetlen a megfelelő mikrotom kiválasztásához.
- Gudrun Lang (2006). Histotechnik. Praxislehrbuch für die Biomedizinische Analytik.(Histology: practical textbook for analytical biomedicine). Springer, Wien/New York. ISBN 978-3-211-33141-5.
- https://www.leicabiosystems.com/pathologyleaders/steps-to-better-microtomy-flotation-section-drying/
- https://www.sciencedirect.com/topics/neuroscience/microtome
- https://biomedizin.unibas.ch/fileadmin/user_upload/biomedizin/core_facilities/histology/Guides/Paraffin_methods.pdf
- https://www.labmanager.com/lab-health-and-safety/2010/06/microtome-safety#.XV6kn5NKiL8
- https://brainresearchlab.com/information/microtome-knife-use-and-care/
- http://www.microbehunter.com/parts-of-a-microtome/
- https://www.labce.com/spg605374_instrumentation_for_microtomy_rotary_microtome_par.aspx