az UHPLC és az UPLC egyaránt folyadékkromatográfiás technikák, amelyeket a keverékekben található különböző komponensek elválasztására használnak. Megjegyzés: az előfeltevés az uhplc és az UPLC közötti különbséget jelenti, amikor valójában ugyanazok a technikák. 2004-ben a Waters elindította az UltraPerformance LC (UPLC) néven ismert technikát, amely 2 mikron alatti porózus részecskékre épül, és az UPLC rövidítést védte. Mivel a gyártók hasonló eszközökkel léptek piacra, az UHPLC-t úgy alakították ki, hogy az UPLC-hez hasonló eszközökre utaljon, mivel az UPLC Waters védjegy. A két kifejezést szinonimának kell tekinteni. Mind az UHPLC, mind az UPLC eszközök esetében az alaptechnológia a 2 mikron alatti részecskék; a legtöbb HPLC módszert 2,5 – 5 mikron méretű részecskékre fejlesztették ki. A kisebb, 2 mikron alatti részecskéknek nagyobb nyomásra van szükségük a működéshez, így az UHPLC vagy UPLC rendszereknek képesnek kell lenniük 6000 PSI felett működni, ami általában a hagyományos HPLC-k felső határa.

a keverék olyan anyag, amely két vagy több kémiai elemet és vegyületet tartalmaz, amelyek nem kötődnek egymáshoz a kémiai reakció során. Megjegyzés: a” folyadékkromatográfia ” a folyadékban együtt oldódó komponensek szétválasztása. Egy oszlop használatával a keverékben lévő komponensek kisebb-nagyobb mértékben kölcsönhatásba lépnek/diffundálnak az oszlopon és annak pórusaiba vagy felületébe, és elválasztódnak. Mivel a 2 mikron alatti részecskék olyan kicsiek, a diffúziós út a mintanalitok és az állófázis között rövidebb, és a hatékonyság nagyobb. A szilárd magrészecskéket, amelyek most emelkednek, kis részecskék felülete kapszulázza, így a diffúzió az út még kisebb, a hatékonyság pedig nagyobb, de még mindig a szilárd “mag “körüli részecskeréteg”vastagságától” függ.
a HPLC, az UHPLC és az UPLC elődje olyan szivattyúkra támaszkodott, amelyek mintakeveréket tartalmazó túlnyomásos folyadékot juttattak át abszorbens anyagokon. Megjegyzés: szivattyúk szükségesek mind UHPLC, mind UPLC esetén. Amikor folyadékot nyom át a csomagolt oszlopon, szivattyúra van szükség, amely ellennyomást eredményez. Bizonyos esetekben a mozgó fázist nyomás alá helyezzük, mielőtt érintkezésbe kerülnénk az analitikai oszloppal, de a mintát később vezetjük be.

az elmúlt 6 évben az UHPLC és az UPLC került előtérbe. Mind az UHPLC, mind az UPLC lehetővé teszi a tudósok számára, hogy a korábban lehetségesnél gyorsabban megbirkózzanak a kisebb részecskékkel, azonban a két rendszer között kulcsfontosságú különbségek vannak. Megjegyzés: ahelyett, hogy kisebb részecskékkel kellene megküzdeniük, az UHPLC és az UPLC lehetővé teszi a tudósok számára, hogy gyorsabban küzdjenek meg az analitikai kihívásokkal, mint korábban lehetséges volt.

mi az UPLC?

az uplc (ultra performance liquid chromatography) rendszereket először 2004-ben vezették be. A teljes üzemi nyomás majdnem megduplázásával (15 000 psi-re) a gyorsabb áramlási sebesség elérése érdekében az UPLC fejlesztői sokkal rövidebb időkeretek alatt képesek voltak egyenlő vagy jobb felbontású LC elválasztásokat elérni. Megjegyzés: ahelyett, hogy “megduplázza a teljes üzemi nyomást a gyorsabb áramlási sebesség elérése érdekében”, jobb azt mondani … ” a 2 mikronos részecskék előnyeinek kihasználása érdekében nagyobb nyomásra van szükség.”Az UPLC oszlop tipikus azonosítója 2.1 mm és általában az áramlási sebesség alacsonyabb, mint a HPLC, de a fent ismertetett hatékonyságnövekedés miatt a teljes elválasztási idő csökken. A hatékonyság, a pontosság és a termelékenység szempontjából ez jó hír volt a laboratóriumok számára az egész világon. Az UPLC a HPLC egyik változata, amely oszlopokat és szivattyúkat is használ. Megjegyzés: függetlenül attól, hogy HPLC-ről, UPLC-ről vagy UHPLC-ről beszélünk, mindegyik technika oszlopokat és szivattyúkat alkalmaz.

mi az az UHPLC?

ezzel szemben az uhplc (ultra high performance liquid chromatography) a 20 000 psi tartományban működik. Megjegyzés: Ez egyszerűen nem igaz. Néhány UHPLC rendszer ilyen magasra mehet, de nem minden. Általában az UPLC eszközök alacsonyabb diszperziós, alacsonyabb térfogatú (extra oszlop) rendszerek, amelyek nagyobb nyomáson működhetnek.? Az UPLC-vel ellentétben a név nincs védjeggyel ellátva, és számos gyártó rendszerére utalhat. Az UHPLC rendszereket alacsony tartózkodási térfogat szem előtt tartásával tervezték. Megjegyzés: a tartózkodási térfogat olyan kifejezés, amely gradiens elválasztásokra utal; az extra oszlop térfogata és a diszperzió jobb kifejezés. Az uplc-knek alacsonyabb a tartózkodási térfogata, de ez azért van, mert az oszlopon kívüli térfogat minimálisra csökken. Az alacsony hangerő nem az UPLC rendszer egyetlen teljesítményjellemzője. Magasabb hatékonyságot kínálnak, mint az UPLC rendszerek, bár hajlamosak az elzáródásra is. Megjegyzés: Nem tudom, honnan származik. Ha a minta nincs megfelelően előkészítve, akkor lehetséges egy 2 mikronos UHPLC vagy UPLC oszlop eltömődése. Ez az oszlop eltömődhet, nem a rendszer. A cikk UHPLC vagy Core-Shell, amely a győztes? részletesebben tárgyalja a relatív rendszerek előnyeit.

mire használják az UPLC és UHPLC rendszereket?

az UPLC-t és az UHPLC-t számos célra használják, beleértve a jogi, gyógyszerészeti és orvosi célokat. A rendszerek a kutatás és a gyártás területén is fontos eszközök. HPLC, UPLC és UHPLC nélkül a tudósok küzdenének a teljesítménynövelő gyógyszerek jelenlétének kimutatásával a sportolók által biztosított mintákban, míg a vérszérum D-vitamin szintjének kimutatása sokkal hosszabb ideig tart, mint ma. Megjegyzés: az UHPLC és UPLC műszerek sebessége, felbontása és érzékenysége ideálissá teszi őket MS-sel való használatra. Az MS műszerek új generációjának megfizethetősége és könnyű használata praktikusabbá teszi az LC-MS-t több laboratórium számára.

Ezek a technológiák ezért fontos előrelépést jelentenek. Természetesen még gyorsabb, pontosabb technológiákat fejlesztenek ki, amikor elolvassa ezt a cikket. Egyelőre azonban az UPLC és az UHPLC rendszerek továbbra is a tudományos törekvések élvonalában vannak.

az utóbbi időben mind az analitikai műszerek, mind az állófázisú kémia fejlődése arra késztette a kromatográfusokat, hogy újraértékeljék a napi rendszerességgel használt rendszereket és módszereket. Az optimizing Core-Shell Uhplc Columns for Improving Protein and peptid Separations című cikk részletesebben foglalkozik ezzel.

*változások piros által biztosított
Waters Corporation
34 Maple Street
Milford
MA 01757
USA