a HIV virobiomot, különösen a gp120 borítékfehérjét használtuk ki, hogy azonosítsuk a rendkívül erős receptor-aktív peptideket, amelyek több kemokin receptor funkcionális antagonistájaként működnek. Ezt úgy sikerült elérni, hogy a gp120 szekvenciában Kis Helyi homológiákat kerestek az ismert jelátviteli peptidekhez, például a VIP/PACAP/GHRH család neuropeptidjeihez .

azonosítottunk egy diszkrét oktapeptid domént (peptid t hely) a gp120 v2 szárának közelében, és ezekből a szekvenciákból származó rokon peptideket, amelyek előnyösen blokkolják az R5-tropikus HIV izolátumok fertőzését . Kezdeti vizsgálataink egy korai áthaladó beteg izolátumot használtak, később kimutatták, hogy van egy R5/X4 (kettős tropikus) receptor fenotípus, bár a kemokin receptorok egyike sem, sem a kemokin receptor hasznosítás jelentősége, e munka idején (1985 körül) ismertek voltak. Az R5 vs X4 HIV izolátumok domináns antivirális hatása magyarázza a vírusellenes hatások hiányával kapcsolatos korai vitákat az X4 laboratóriumi adaptált izolátumokkal .

míg a peptid T volt az első receptor célzott vírusellenes HIV (ezt az osztályt “belépési inhibitoroknak” nevezték), mivel az AIDS-járvány az 1980-as évek közepén kibővült, nyilvánvalóvá vált, hogy a vírus, miközben fertőzést hoz létre a központi idegrendszerben, nem replikálódik az idegsejtekben. Ennek ellenére mély kognitív és motoros deficitekről számoltak be, ami növelte a betegség nagy megbélyegzését és szenvedését abban az időben. Első jelentéseinkben megfigyeltük, hogy a gp120 agykérgi eloszlása kötődik a főemlős agy receptoraihoz, és feltételeztük, hogy az érzékeny neuronok gp120 elpusztítása magyarázza a megfigyelt beteg kognitív deficitjét. Azt javasoltuk, hogy a T peptid a gp120 kötésének blokkolásával, amely később CCR5-nek bizonyult, hatékony lenne a HIV-fertőzés neuronális veszteségének megelőzésében, amelyről ma már ismert, hogy a fertőzés után nagyon korán jelentkezik.

előnyök a neuroinflammációban és a neurodegenerációban

kezdeti vizsgálatok azt mutatták, hogy a T peptid és annak d-ala1-peptid T-amid (DAPTA) degradációval szemben ellenálló analógja védelmet nyújtott a gp120 neurotoxikus hatásaival szemben neuronális kultúrákban, részben védő kemokinek felszabadításával . A dapta neuro-védő hatását gp120-mal kezelt állatoknál is kimutatták, ahol a szinapszisok és a dendritikus arbor elvesztése, valamint a viselkedési késleltetések megfordultak . A gp120 neurotoxikus hatásai ezért kimutatták, hogy a neuro-AIDS-ben az agykérgi idegsejtek elvesztésének és a dendritikus patológiáknak az oka. A gp120 neurotoxicitás mechanizmusai fokozatosan kiderült, hogy közvetettek, és a gp120 által a mikroglia aktiválódásával kapcsolatosak, amelyeket a DAPTA blokkolt . Az aktivált mikrogliákat és asztrocitákat ma már a különböző neuropatológiák mediátorainak tekintik, amelyeket a peptid t analógok kezelhetnek.

bár ezeknek a peptideknek a vírusellenes hatása volt a vizsgálat kezdeti tárgya, fokozatosan világossá vált, hogy a peptid t peptidcsaládnak hasznos immunmoduláló és neuronális megtakarító hatása volt a HIV-n túl, amelyet terápiásán ki lehet használni, különösen neurodegeneratív körülmények között gyulladásos patogenezissel. A DAPTA csökkentette az IL-1, Il-6, IL-8, IL-23, TNFa citokineket, és növelte az M2 citokineket, mint például az IL-4 és az IL-10 . Néhány példa a DAPTA kezelés lehetséges előnyeire: Alzheimer-kór , különböző eredetű neuropátiák , rákos fájdalom, excitotoxicitás és stroke/agyi ischaemia . Klinikai előnyöket mutattak ki a neuro-AIDS (lent), a növekedési hormon elnyomása, a fejlődési késések oka a gyermekkori HIV-ben , amelyet a DAPTA helyreállított, valamint a nem HIV-vel kapcsolatos bőrbetegségekben, például a pikkelysömörben .

klinikai vizsgálati eredmények a neuro-aids-ben

a peptid T, vagy helyesebben a DAPTA 1986-ban lépett be a neuro-AIDS végpontokra vonatkozó humán klinikai vizsgálatokba. Ezt követően az MRI agyi vizsgálatok és a kognitív tesztek javulását jelentették . A neuro-AIDS kognitív előnyeit további kontrollált vizsgálatok igazolták, amelyek szignifikáns csoportot mutattak (aktív vs. placebo, p=.003) és az idő (p=.001) hatások, toxicitás nélkül. A három helyszínen dbpc vizsgálat 215 randomizált alanyok intra-orrspray DAPTA (2 mgs, TID) végeztünk a korai 1990-es. a fő végpont volt változás a globális kognitív pontszám 6 hónap egy akkumulátor 23 tesztek. Míg nem találtak szignifikáns különbséget a dapta és a placebo csoport között a globális kognitív pontszámban, 2 a 7 doménből, a munkamemória (04.oldal) és az információfeldolgozás sebessége (p=.008), javulást mutatott a DAPTA csoportban. Kezelési hatásról számoltak be azoknál a betegeknél is, akiknek a CD4-sejtszáma a vizsgálat megkezdésekor 200 sejt/6CL felett volt (nem AIDS).

Összességében ez a kohorsz kognitív szempontból minimálisan károsodott (MMSE=28). Azonban a nagyobb és klinikailag szignifikáns kognitív deficittel rendelkezők > 0.5 a globális Z-pontszám alapján egy előre megtervezett alcsoport-elemzés azt mutatta, hogy a DAPTA a teljesítmény javulásával járt, míg a romlás gyakoribb volt a placebo csoportban (P=.02) . Bár a vírusellenes mérések nem voltak elsődleges végpontok ebben a vizsgálatban, ezeket az adatokat jelentették, és azt mutatták, hogy a dapta csökkentette a vírusterhelést (-0,54 log, p<.03) . A vírusellenes hatás megállapítása ebben a vizsgálatban figyelemre méltó, mivel a betegeket nem a vírusterhelés alapján vonták be, nem volt dózisoptimalizálás a vírusellenes hatás szempontjából, R5 vagy X4 vírusfenotípusuk, amely meghatározná az anti-vírus hatással szembeni érzékenységet, ismeretlen volt, és mivel a vizsgálatot a HAART előtti korszakban végezték, a DAPTA-t lényegében monoterápiában tesztelték.

a dapta kórházi 2.fázisú vizsgálata 15 vagy 1 éves korban.5mg / nap 4 hétig kilenc IV kábítószer-használók korai AIDS demencia is javult neurokognitív teljesítmény, a magasabb dózis, mint az alacsonyabb dózis vagy a placebo (p<.05) . Egy további vizsgálatban a funkcionális agyi képalkotás előnyeit jelentették egy 39 éves AIDS demencia komplexben szenvedő férfiban, aki 12 hetes intranazális DAPTA-t kapott (0,4 mg naponta, 1,2 mgs naponta). Ez a tanulmány kimutatta, hogy 34 35 agyi régiók alacsony FDG aktivitást mutatott remisszió terápia után, összhangban az MRI és a kognitív előnyök azonosított fázis 1 és 2 vizsgálatok. (op. cit., fent).

orálisan aktív peptidek

míg a dapta lényegében védett a plazma lebomlásától, a gyomorban gyorsan emészthető . Ezenkívül klinikai alkalmazását elsősorban orrspray-vel végezték, amely folyékony gyógyszerkészítmény hosszú távú tárolását igényli. Kimutatták, hogy a dapta tárolás közben összesítéssel elveszíti aktivitását. A gyógyszer összesítése aggodalomra adott okot a DBPC vizsgálatban, mivel a tárolt terméket a vizsgálat befejezéséhez szükséges évekig használták, és a betegek beszámoltak a vizsgálati gyógyszerek gélesedéséről. Ez korlátozta a dapta további klinikai fejlődését. Ennek a jelentős akadálynak a leküzdésére létrehoztunk egy analóg DAPTA-t (RAP-103), amely teljes mértékben védett a lebomlástól, és megtartja a pikomoláris potenciát.

egy patkányokon végzett proof-of-concept vizsgálat azt mutatta, hogy a rap-103 (0.05-1mg / kg) 7 napig teljesen megakadályozza a mechanikai allodynia kialakulását és gátolja a termikus hiperalgézia kialakulását az ülőideg részleges ligálása után patkányokban . Ebben a tanulmányban azt is megmutattuk, hogy a DAPTA és a RAP-103 blokkolta mind a CCR2-t, mind a szorosan kapcsolódó kemokin receptor CCR5-et. Ezenkívül a RAP-103 csökkentheti a gerinc mikroglia aktiválódását és a monocita infiltrációt, és gátolhatja a perifériás idegkárosodás által kiváltott gyulladásos citokin válaszokat, ami a neuropátiás fájdalom oka.

eredményeink azt sugallják, hogy a ccr2/CCR5 célzásának nagyobb hatékonyságot kell biztosítania, mint a ccr2 vagy a CCR5 célzása önmagában, és hogy a kettős ccr2/CCR5 funkcionális antagonista RAP-103 klinikai alkalmazásra képes neuropátiás és egyéb fájdalomállapotokban. Mivel ez az analóg több DAPTA-mechanizmust oszt meg a mikroglia aktivációjának csökkentésére, a citokin egyensúlyának megváltoztatására, a neuronok védelmére és a dendritikus arbor tartalékára, ez elsődleges jelölt a további klinikai fejlődésre a már tárgyalt többszörös neuroinflammatorikus körülmények között, amelyek előnyeit a preklinikai állatkísérleti modellek kimutatták, amint azt a felülvizsgálat számos idézete megjegyzi.