leírás

RNAlater RNS stabilizációs oldat stabilizálja és védi a sejtes RNS-t ép, nem fagyott szövetmintákban, így nincs szükség a szövetminták azonnali feldolgozására vagy a minták folyékony nitrogénben történő fagyasztására későbbi feldolgozás céljából. A szövetdarabok összegyűjthetők és rnalater RNS stabilizáló oldatba meríthetők tárolás céljából anélkül, hogy veszélyeztetnék a későbbi RNS izolálás után kapott RNS minőségét vagy mennyiségét. Az RNAlater RNS stabilizációs oldat használatának előnyei:• hatékonyság—stabilizálja az RNS—t 1 napig 37 db C, 1 hét 25 db C, 1 hónap 4 db C, vagy a végtelenségig -20 dB C• egyszerűség—egyetlen reagens, amely azonnal inaktiválja az Rnázokat és stabilizálja az RNS—t a szövetekben vagy sejtekben• kényelem—nem kell fagyasztani a mintákat folyékony nitrogénben vagy rohanás minták vissza a laborba fagyasztó• mobilitás-tökéletes szövetgyűjtés ‘a területen’• sokoldalúság-kompatibilis számos RNS izolációs eljárások, beleértve a legtöbb RNS izolációs készletek
Alkalmazások br> az rnalater RNS stabilizációs oldatot különféle Emlősök szövetei, növények, E. coli, Xenopus, hal és Drosophila. Ez ideális:
* védelme RNS integritását szövetekben gazdag Rnázok• br > * minták gyűjtése különböző időpontokban anélkül, hogy feldolgozza a mintákat minden időpontban azonnal
• archiválás szövetek jövőbeli microdissection
• alámerülő állati üregek vagy szervek stabilizálása RNS során hosszadalmas boncolási eljárások
• minták gyűjtése helyeken (pl.* szállítás minták nedves jégen,vagy akár szobahőmérsékleten, ha szállítják éjszakán át
RNAlater RNS stabilizációs oldat eljárás
a boncolt szövet (kevesebb, mint 0,5 cm bármely dimenzióban) egyszerűen elmerül körülbelül 5 térfogat rnalater oldatot szobahőmérsékleten. Az oldat áthatolja a sejteket, stabilizálja az RNS-t. A minta ezután határozatlan ideig tárolható -20-on (a szövet nem fagy), 4-nél (C) egy hónapig, vagy 25-nél (C) egy hétig. Az RNS izolálásához a szövetet egyszerűen eltávolítják az RNAlater oldatból, és úgy kezelik, mintha éppen betakarították volna. A legtöbb szövet közvetlenül átvihető egy lízis pufferbe és homogenizálható. Az RNAlater oldattal kezelt, majd lefagyasztott mintákat habarccsal és mozsárral őrölhetjük, vagy felolvaszthatjuk és friss szövetként feldolgozhatjuk anélkül, hogy aggódnánk a sejtrepedés és az Rnázok felszabadulása miatt, mivel az Rnázokat már inaktiváltuk. A sejteket ki lehet forgatni, majd hozzáadni a lízis pufferhez, vagy bizonyos esetekben RNAlater oldatot adhatunk a sejtekkel együtt közvetlenül a lízis pufferhez.
kompatibilis a különböző eljárások
RNAlater RNS stabilizációs megoldás kompatibilis egylépéses RNS izolálási módszerek,mint például a TRIzol reagens; üveg kötési módszerek, mint a Qiagen RNeasy vagy az Ambion Rnaqueous kit; savas fenol extrakciós módszerek, mint például az Ambion teljesen RNS kit; és módszerekkel, amelyek segítségével oligo(dT) kiválasztása mRNS, mint például a Ambion Poly (A)Purist kit. A házon belüli kutatás, valamint a közelmúltban közzétett független kutatás azt jelzi, hogy az rnalater RNS stabilizáló oldat alkalmazása a szövetek tárolására nem befolyásolja a későbbi RNS expressziós elemzési kísérletek eredményét más feldolgozási módszerekhez képest.