Morfologia komórki Mioepitelialnej: charakterystyka Immunohistochemiczna od fazy spoczynkowej do fazy ruchliwej
Streszczenie
Mioepitelium jest obecne w guzach sutka psów jako spoczynkowe i proliferacyjne nadbasalne oraz wrzecionowate i gwiaździste komórki śródmiąższowe. Celem pracy była ocena zespołu markerów do identyfikacji czterech różnych typów morfologicznych komórek mioepitelialnych w normalnym i nowotworowym gruczole sutkowym oraz zbadanie zmian immunohistochemicznych z fenotypu nabłonkowego na mezenchymalny. Cytokeratyna 19 (CK19), cytokeratyna 5/6 (CK5/6), cytokeratyna 14 (ck14), receptor estrogenowy (ER), białko p63, wimentina (VIM) i przeciwciała α-aktyny mięśni gładkich (Alfa-SMA) zastosowano w 29 nowotworach (3 łagodne i 3 złośliwe guzy mioepitelialne, 7 raków w łagodnych i mieszanych guzach i 16 złożonych rakach) oraz w prawidłowej tkance gruczołów sutkowych. Wszystkie te przeciwciała testowano również na 3 tkankach sutka pochodzących od zwierząt bez patologii sutka. Markery mioepitelialne były dobrze wyrażone w komórkach nadbasalnych i stopniowo traciły w typach ruchliwych, a komórki gwiaździste zachowywały jedynie ekspresję VIM typową dla mezenchymy. Oznaczono kilka spoczynkowych i ruchliwych komórek mioepitelialnych. Na podstawie naszych wyników proponujemy przejście z mioepitelialnych komórek immotylowych do migrujących komórek podobnych do fibroblastów. To przejście i charakterystyka panelu immunohistochemicznego dla spoczynkowych i ruchliwych komórek mioepitelialnych rzucają więcej światła na biologiczne zachowanie komórek mioepitelialnych.
1. Wprowadzenie
guzy gruczołu sutkowego u psów tworzą się zarówno przez nabłonek (nabłonek i mioepithelium), jak i mezenchymalne składniki. Pochodzenie komórek mezenchymalnych jest nadal przedmiotem dyskusji. Podwyższona częstotliwość guzów wykazujących proliferację komórek mioepitelialnych lub podstawnych jest unikalną cechą guzów sutka psów .
w normalnym gruczole sutkowym lumina jest ograniczona przez wewnętrzną warstwę spolaryzowanych komórek nabłonkowych spoczywających na dwóch zewnętrznych lub podstawnych warstwach komórek nabłonkowych i mioepitelialnych . Zarówno komórki podstawne, jak i mioepitelialne syntetyzują błonę podstawną kanałów i pęcherzyków i tworzą strukturalną barierę między komórkami nabłonka luminalnego a otaczającą zrębem . W kanałach komórki mioepitelialne tworzą prawie ciągłą warstwę komórek zorientowanych równolegle do długiej osi kanałów. Warstwa ta otacza komórki nabłonka luminalnego i oddziela je od błony podstawnej i zrębu. W pęcherzykach płucnych komórki mioepitelialne są nieciągłe, tworząc siatkę podobną do koszyka wokół pęcherzyków płucnych, umożliwiając niektórym komórkom nabłonka luminalnego bezpośredni kontakt z błoną Piwniczną . W związku z tym mioepithelium nie tylko znajduje się w idealnej pozycji do komunikowania się między tymi dwoma przedziałami, ale jest również umieszczony w celu zapewnienia ważnych sygnałów regulacyjnych dla utrzymania prawidłowej struktury komórkowej .
opierając się na immunohistochemii, trzy warstwy komórek normalnego gruczołu sutkowego wykazują różne markery: nabłonek luminalny jest znakowany przez CK19, a komórki podstawne i komórki mioepitelialne są barwione przez CK5 / 6 i CK14 i p63, Alfa-SMA i VIM . Komórki mioepitelialne są elementami kurczliwymi wykazującymi połączoną immunoprofilię nabłonka i mięśni gładkich. Markery wymienione powyżej są wyrażone w cytoplazmie, z wyjątkiem P63, który jest markerem jądrowym . Warstwa komórek mioepitelialnych jest jedynym źródłem supresora nowotworowego p63, który jest znacząco hamowany na proliferację i inwazję powiązanych komórek nowotworowych . Ponadto, podstawowe komórki mioepitelialne w normalnym gruczole sutkowym są czasami znakowane przez przeciwciało ER, które jest używane do klasyfikacji molekularnej opartej na guzach sutka psów .
różne morfologie komórek mioepitelialnych można rozpoznać w guzach złożonych i mieszanych psów: spoczynkowych i proliferacyjnych nadbasalnych komórkach mioepitelialnych oraz wrzecionowatych i gwiaździstych ruchomych śródmiąższowych komórkach mioepitelialnych. Komórki nadbasalne znajdują się między błoną podstawną a nabłonkiem luminalnym i wykazują spłaszczone wrzeciono (komórki spoczynkowe) lub morfologię wielokątną (komórki proliferacyjne). Komórki śródmiąższowe są często rozmieszczone w stałych gniazdach przyłączonych do elementów nabłonkowych lub izolowane w śródmiąższu . Wrzecionowate i gwiaździste komórki mioepitelialne różnicują się w kierunku bardziej ogólnego fenotypu kurczliwego .
śródmiąższowe komórki mioepitelialne mogą ostatecznie stać się komórkami podobnymi do fibroblastów, wykazując jedynie immunoreaktywność VIM . Różnicowanie mioepitelialne może doprowadzić do powstania różnych tkanek mezenchymalnych, w tym chrząstki i kości w mieszanym guzie ssaka.
nabycie typowych cech komórek mezenchymalnych prawdopodobnie pochodzi z przejścia nabłonkowo-mezenchymalnego (EMT). EMT jest zjawiskiem biologicznym, które pozwala spolaryzowanej komórce nabłonkowej, która normalnie wchodzi w interakcję z błoną podstawną za pośrednictwem jej powierzchni podstawowej, poddać się wielu zmianom biochemicznym, umożliwiając jej przyjęcie cech i funkcji komórek mezenchymalnych .
artykuł skupi się na różnych aspektach komórek mioepitelialnych i guzów sutka u psów, w szczególności (1) Charakterystyka czterech różnych typów morfologicznych komórek mioepitelialnych w normalnym i nowotworowym gruczole sutkowym przy użyciu panelu przeciwciał oraz (2) zmiany immunohistochemiczne w komórkach mioepitelialnych od nabłonka do fenotypu mezenchymalnego.
2. Materiały i metody
2.1. Próbki
okazy gruczołu sutkowego 29 samic psów zostały pobrane z bazy danych Służby Anatomopatologicznej Wydziału Medycyny Weterynaryjnej w Bolonii. Badani należeli do różnych ras: kundel (𝑛=13), owczarek niemiecki (𝑛=3), Pudel (𝑛=3), yorkshire terrier (𝑛=3), jamnik (𝑛=2), setter (𝑛=1), indeks (𝑛=1), cocker spaniel (𝑛=1), sznaucer (𝑛=1), Siberian husky (𝑛=1); wszystkie były kobietami, średni wiek 9.20±2.28 lat (średnia ± SD). Guzy składały się z: 3 łagodnych guzów mioepitelialnych, 3 złośliwych guzów mioepitelialnych, 7 raków w łagodnych guzach mieszanych i 16 raków złożonych (ostatnie dwie grupy różnicowano na podstawie obecności chrząstki i/lub kości w guzach mieszanych). Ponadto oceniono 29 próbek z prawidłowych gruczołów sutkowych tej samej linii nowotworowej oraz 3 próbki sutkowe z 3 zdrowych samic bez guza.
guzy zostały sklasyfikowane według Misdorp et al. i Goldschmidt et al. do łagodnych guzów mioepitelialnych: rzadki nowotwór złożony z komórek mioepitelialnych ułożonych w krótkie wiązki zmieszanych z pozakomórkowym włóknistym materiałem bazofilowym; złośliwe guzy mioepitelialne: różne od łagodnego wariantu z bardziej polimorficznymi komórkami mioepitelialnymi; złożony rak: rak składający się zarówno z nabłonka luminalnego, jak i mioepitelialnego; rak w łagodnym guzie: guz z ogniskami złośliwych komórek nabłonkowych lub wyraźnymi guzkami takich komórek, występującymi razem z komórkami mezenchymalnymi, które wytworzyły chrząstkę i / lub kość prawdopodobnie w połączeniu z tkanką włóknistą.
2.2. Immunohistochemia
wycięto cztery odcinki grubości µm z bloków osadzonych w parafinach formaliny zawierających reprezentatywne próbki nowotworu. Na tych tkankach wykonano immunohistochemię dla następujących markerów: CK19, ER, CK5 / 6, CK14, Vim, Alpha-SMA, p63.
sekcje odparafinowano w toluenie i nawodniono. Endogenną peroksydazę blokowano przez zanurzenie w 0,3% nadtlenku wodoru przez 20 minut. Sekcje następnie płukano w buforze Tris. Pobieranie antygenu przeprowadzono z buforem cytrynianowym (2,1 g monohydratu kwasu cytrynowego / litr wody destylowanej), pH 6,0 (z wyjątkiem CK5 / 6 i ER, w których zastosowano EDTA, pH 8,0) i ogrzewano przez dwa 5 minut w kuchence mikrofalowej o mocy 750 W, a następnie chłodziono w temperaturze pokojowej przez 20 minut. Pierwotne przeciwciała podsumowano w tabeli 1. Wszystkie pierwotne przeciwciała inkubowano przez noc w temperaturze 4°C, a następnie stosując komercyjną technikę streptawidyny-biotyny-peroksydazy (Lsab Kit, DAKO, Amsterdam, Holandia). Jako chromogen stosowano diaminobenzydynę (0,05% Przez 10 minut w temperaturze pokojowej). Szkiełka przeciwstawiono hematoksyliną Papanicolaou.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
jako kontrolę negatywną, pierwotne przeciwciało zastąpiono nieistotnym, dopasowanym izotypowo przeciwciałem do kontroli niespecyficznego wiązania przeciwciała wtórnego. Dodatnie kontrole tkanek przy użyciu tych samych protokołów IHC obejmowały prawidłowe gruczoły sutkowe psów (przeciwciała anty-CK19, -ER, -ck14, -VIM, Alfa-SMA, -P63) i skórę psów (anty-CK5/6).
liczbę komórek dodatnich dla każdego markera obliczono częściowo: − = brak komórek zabarwionych, ± = mniej niż 5% komórek dodatnich, + = 5-50% komórek dodatnich, ++ = więcej niż 50% komórek dodatnich. Przypadki uznano za pozytywne dla ER, gdy barwienie jądrowe obserwowano w co najmniej 5% komórek nowotworowych .
3. Wyniki
na podstawie ich morfologii rozpoznano cztery typy komórek mioepitelialnych. Podtyp spoczynkowy wykazywał wydłużone cechy komórek wrzecionowatych w bliskim kontakcie z komórkami nabłonka luminalnego, jak również proliferacyjnych komórek nadbasalnych, które zamiast tego wykazywały wielokątny kształt(Fig. 1 (A)). Zaobserwowano, że śródmiąższowe komórki ruchome tworzą gniazda (gniazda wyłożone wrzecionami i komórki gwiaździste stanowiły rdzeń gniazda) i izolowane są w śródmiąższu (fig.2(A)).
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
komórki mioepitelialne nadbasalne: komórki spoczynkowe (cienkie strzałki) i proliferacyjne (grube strzałki). Immunohistochemiczna ekspresja panelu przeciwciał zastosowanych przez IHC, 63x (a) Hematoksylina-eozyna; (b) przeciwciała anty-CK19 znakujące cytoplazmę; (C) przeciwciała anty-ER znakujące jądra; (d) przeciwciała anty-CK 5/6 znakujące cytoplazmę; (e) przeciwciała anty-CK14 znakujące cytoplazmę; (f) przeciwciała anty-VIM znakujące cytoplazmę; (g) przeciwciała anty-Alfa-SMA znakujące błonę cytoplazmatyczną; (h) przeciwciała anty-p63 znakujące jądra.
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
Motile myoepithelial cells: spindle (asterisks) and stellate (stars) cells. Immunohistochemical expression of a panel of antibodies applied by IHC. 63x (a) Hematoxylin-eosin; (b) anti-CK19 antibodies labeling the cytoplasm; (c) anti-ER antibodies labeling the nuclei; (d) anti-CK 5/6 antibodies labeling the cytoplasm; (e) anti-CK14 antibodies labeling the cytoplasm; (f) przeciwciała anty-VIM znakujące cytoplazmę; (g) przeciwciała anty-Alfa-SMA znakujące błonę cytoplazmatyczną; (h) przeciwciała anty-p63 znakujące jądra.
3.1. Prawidłowy gruczoł sutkowy
W 3 kontrolnych przypadkach wszystkie spoczynkowe i proliferacyjne nadbasalne komórki mioepitelialne oznaczono p63, CK14, Alfa-SMA i VIM. Spoczynkowe i proliferacyjne nadbasalne komórki mioepitelialne nie wykazywały ekspresji CK19 w żadnym z przypadków.
3.2. Tkanka sutka z tej samej linii guza sutka
w 29 prawidłowych tkankach z tej samej linii co guzy, wszystkie spoczynkowe i proliferacyjne nadbasalne komórki mioepitelialne były znakowane przez p63, CK14, Alfa-SMA i VIM. CK5 / 6 było dodatnie we wszystkich przypadkach poza czterema, a ER wykryto w 12 przypadkach. Ekspresję CK19 obserwowano jedynie w nabłonku luminalnym. Nie obserwowano ruchomych komórek śródmiąższowych mioepitelialnych. Wszystkie wyniki podsumowano w tabeli 2.
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| *−: brak poplamionych komórek; ±: mniej niż 5% komórek dodatnich; +: 5-50% komórek dodatnich; ++: ponad 50% komórek dodatnich. °: fonotyp motylkowy nie jest aktualizowany, ponieważ nie występuje. §: fonotyp nadbasalny nie jest aktualizowany, ponieważ nie jest wykrywalny wokół komórek luminalnych. |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3.3. Guzy sutka
wyniki immunohistochemiczne dla komórek nadbasalnych (Fig.1) i ruchliwych (fig. 2) z wykorzystaniem p63, CK14, CK5/6, CK19, Alfa-SMA, VIM i ER przedstawiono w tabeli 2. Znakowane CK5 / 6: nadbasalne komórki spoczynkowe w 16 z 29 przypadków (5 raków w łagodnych guzach mieszanych i 11 raków złożonych). CK 5/6 oznaczał również proliferacyjne komórki ruchowe nadbasalne i wrzecionowate w 10 przypadkach (3 raki w łagodnych guzach mieszanych i 7 rakach złożonych). W 25 przypadkach (1 łagodny guz mioepitelialny, 3 złośliwe guz mioepitelialny, 5 raków w łagodnych guzach mieszanych i 15 rakach złożonych) stwierdzono obecność komórek Stellate moile, ale nie stwierdzono CK5 / 6. Chrząstka w guzach mieszanych sutka zawsze była ujemna.
CK14 wykazywał dodatni wynik w 23 przypadkach w komórkach spoczynkowych (z wyjątkiem 1 raka złożonego i łagodnych i złośliwych guzów mioepitelialnych), w 22 przypadkach w komórkach proliferacyjnych (6 raków w łagodnych guzach mieszanych i 15 złożonych rakach) z tendencją do utraty ekspresji, gdy komórki te nabyły bardziej ruchliwy fenotyp komórek wrzecionowatych (dodatni w 2 łagodnych i 3 złośliwych guzach mioepitelialnych, 2 rakach w łagodnych guzach mieszanych i 2 złożonych rakach). Chondrocyty guzów mieszanych były ujemne.
VIM był dodatni w komórkach nadbasalnych w 23 przypadkach raka w łagodnym i złożonym raku oraz w ruchomych komórkach mioepitelialnych we wszystkich 29 przypadkach. Komórki zrębu we wszystkich przypadkach były dodatnie. Chrząstka była VIM dodatnia we wszystkich 7 rakach w łagodnych guzach mieszanych.
znakowane Alfa-SMA spoczynkowe i proliferacyjne nadbasalne komórki mioepitelialne w 23 rakach w łagodnych guzach mieszanych i złożonych rakach. Komórki wrzecionowate w 10 przypadkach (5 raków w łagodnym raku mieszanym i 5 raków złożonych) wykazały dodatni wynik dla Alfa-SMA. W każdym przypadku, z wyjątkiem dwóch złożonych nowotworów, komórki gwiaździste były ujemne. Stroma wykazywał dodatni wynik jedynie w 6 przypadkach (1 rak w łagodnym raku mieszanym i 5 złożonych rakach).
P63 wykryto w spoczynkowych i proliferacyjnych nadbasalnych komórkach mioepitelialnych 23 przypadków raka w łagodnym, mieszanym i złożonym raku. Wszystkie komórki wrzecionowate i gwiaździste były ujemne. Komórki zrębu i chrząstki były negatywne.
ekspresja ER była obecna w 11 nadbasalnych komórkach mioepitelialnych (4 raki w guzach łagodnych-mieszanych i 7 rakach złożonych); w 9 przypadkach (3 raki w nowotworach łagodnych-mieszanych i 6 raków złożonych) stwierdzono dodatni wynik. Chrząstka guzów mieszanych była ujemna.
spoczynkowe i proliferacyjne nadbasalne i wrzecionowate / gwiaździste ruchome komórki mioepitelialne nie wykazywały ekspresji CK19 w żadnym z badanych nowotworów. Ujemna dla CK19 była także chrząstka guzów mieszanych.
4. Dyskusja
na podstawie ustaleń Gama et al. i Tateyama i in. , w gruczole sutkowym występują cztery typy morfologiczne komórek mioepitelialnych: spoczynkowe i proliferacyjne nadbasalne komórki mioepitelialne wyściełające pęcherzyki i kanały oraz wrzecionowate i gwiaździste śródmiąższowe komórki ruchome, które leżą w przestrzeni śródmiąższowej, gdzie mogą być rozmieszczone w gniazdach. Markery mioepitelialne, takie jak p63, CK5/6, CK14, Alfa-SMA i VIM, okazały się cennymi dodatkami diagnostycznymi ułatwiającymi ocenę złożonych i mieszanych proliferacji. CK19 jest uważany za złoty standardowy marker dla nabłonka luminalnego i został użyty w celu uniknięcia błędnej diagnozy komórek mioepitelialnych. Ze względu na wzorce reaktywności krzyżowej i fakt, że ogniska zmian są zazwyczaj niewielkie, żaden z markerów mioepitelialnych nie posiadał 100% czułości i swoistości dla komórek mioepitelialnych. Jako takie, co najmniej 2 Markery powinny być używane do oceny danego ostrości .
opierając się na naszych wynikach, najlepszym markerem dla komórek nadbasalnych był p63, szczególnie w połączeniu z CK14, który był ograniczony do dojrzałych (podstawnych) komórek mioepitelialnych i, w mniejszym stopniu, a następnie CK5/6, Alfa-SMA i VIM (Fig.1). Jednakże CK5 / 6 oznaczał również komórki nabłonka luminalnego, co utrudniało odróżnienie ich od proliferacyjnych komórek mioepitelialnych nadbasalnych . Morfologicznie zarówno komórki nabłonkowe, jak i mioepitelialne mogą mieć kształt wielokąta. Cechą charakterystyczną zarówno CK14, jak i CK5 / 6, ale nie p63, Alfa-SMA i VIM, była ich zmniejszona ekspresja w komórkach mioepitelialnych w stanie proliferacji nadbasalnej. Ekspresja CK14, CK5/6 i p63 była stopniowo tracona w komórkach w stanie ruchu wrzeciona i stellatu.
Alfa-SMA i VIM były obecne w ruchomych komórkach mioepitelialnych wrzeciona o różnym stopniu intensywności. Tylko VIM okazał się spójnym markerem dla stellate moile myoepithelial cells. W badaniu tym ruchomy mioepithelium gwiaździstego ułożono w gniazda i wyłożono spoczynkowymi komórkami przypuszczalnie pochodzenia pęcherzykowego. Ta cecha może popierać tezę, że gniazda ruchomych komórek mioepitelialnych, które utraciły ekspresję głównych markerów mioepitelialnych nadbasalnych, ale zachowały powinowactwo do VIM, są prekursorami chrząstki, co wskazuje, że komórki te zakończyły swoją transformację w elementy mezenchymalne. W łagodnych i złośliwych guzach mioepitelialnych, oznaczanie VIM we wszystkich przypadkach, utrata wszystkich innych nadbasalnych markerów mioepitelialnych oraz niewielki dodatni wynik CK14 w komórkach wrzecionowatych wskazywały na dominującą ekspresję stanu ruchu mioepitelialnego i możliwe przejście od prostych komórek mioepitelialnych do fibroblastów mezenchymalnych.
w naszych badaniach dowody na przesunięcie komórek mioepitelialnych do fenotypu mezenchymalnego, wykazanego przez utratę ekspresji ck14, CK5/6 i P63, zostały wzmocnione przez nieciągłe etykietowanie komórek wrzeciona dla Alfa-SMA, markera zarówno komórek mioepitelialnych, jak i miofibroblastów, który został całkowicie utracony w komórkach stellatowych, które rzekomo stały się fibroblastami.
dalsze badania potwierdzające przeprowadzone przez Tsuda et al. zgłaszano występowanie miofibroblastów z resztkami ekspresji CK14 (opisywanych jako „przekształcone komórki mioepitelialne”). W przypadkach badanych w niniejszym badaniu CK14 stopniowo zanikał, co wskazuje na utratę fenotypu (mio-)nabłonkowego. Wyniki te wspierają hipotezę EMT obejmującą stan podobny do mioepitelialnego, który przechodzi mezenchymalną przemianę mioepitelialną (MMT). Hipoteza ta została potwierdzona u psa przez Gärtnera i wsp. who stwierdził, że w guzach sutka jednym z etapów ewolucji komórek mezenchymalnych jest ekspresja typowych cech mioepitelialnych.
interesującym wynikiem niniejszego badania była pozytywna ocena ER stwierdzona w 12/29 nadbasalnych komórkach mioepitelialnych i 9/29 stellatowych komórkach raka w nowotworach łagodnych-mieszanych i rakach złożonych. Opisano dwie izoformy receptorów ER, mianowicie ER-α I ER-β, przy czym ta ostatnia jest jedyną formą wyrażoną w jądrach izolowanych komórek podstawno-mioepitelialnych . Przeciwciało użyte w niniejszym badaniu obejmowało obie izoformy: zarówno komórki luminalne, jak i podstawowe/stellate były znakowane, przypuszczalnie komórki luminalne przez ER-α i komórki basal / stellate przez ER-β.
podsumowując, nadbasalne komórki mioepitelialne dobrze charakteryzowały się p63 i CK14, a w mniejszym stopniu innymi zastosowanymi markerami. Zamiast tego ruchome komórki mioepitelialne charakteryzują się Alfa-SMA i VIM oraz utratą CK14, CK5 / 6 i p63(fig. 2). Niniejsze badanie wykazało również ER zarówno w nabłonku luminalnym, jak i w komórkach mioepitelialnych nadbasalnych/gwiaździstych (te ostatnie w około połowie przypadków) i że ekspresja ER nie ma wpływu na fazę spoczynkową/ruchową. Dlatego też, w odcinkach seryjnych lub wielostopniowych, immunohistochemia do ER w połączeniu z p63 i CK14 może służyć do uniknięcia błędnej identyfikacji komórek luminalnych lub mioepitelialnych w guzach sutka psów. Trend zachowanej ekspresji Alfa-SMA i VIM w komórkach wrzecionowatych i tylko dodatniość VIM w komórkach stellatowych, jak również zmniejszona ekspresja p63 w obu typach ruchliwych, wspiera hipotezę EMT obejmującą stan mioepitelialny w MMT. Komórka wrzecionowata może być uważana za wcześniejszą transformację niż komórka gwiaździsta w kierunku fenotypu mezenchymalnego.
wkład autorów
autorzy Ci w równym stopniu przyczynili się do tej pracy.
konflikt interesów
autorzy oświadczają, że nie mają konkurencyjnych interesów.
podziękowanie
autorzy dziękują Pani Anne Collins za edycję tekstu w języku angielskim.
Materiały uzupełniające
tabela uzupełniająca 1: Wyniki immunohistochemiczne.
tabela uzupełniająca 2: wiek, rasa i wyniki kliniczne.
- materiał uzupełniający