opis

Rnalater RNA stabilizuje i chroni komórkowy RNA w nienaruszonych, odmrożonych próbkach tkanek, eliminując potrzebę natychmiastowego przetwarzania próbek tkanek lub zamrażania próbek w ciekłym azocie w celu późniejszego przetworzenia. Kawałki tkanki mogą być zbierane i zanurzane w roztworze stabilizującym RNA RNAlater do przechowywania bez narażania jakości lub ilości RNA uzyskanego po kolejnej izolacji RNA. Zalety stosowania roztworu stabilizującego Rnalater RNA:
• skuteczność—stabilizacja RNA przez 1 dzień w temperaturze 37°C, 1 tydzień w temperaturze 25°C, 1 miesiąc w temperaturze 4°C lub na czas nieokreślony w temperaturze -20°C
• prostota—pojedynczy odczynnik, który natychmiast dezaktywuje RNazy i stabilizuje RNA w tkankach lub komórkach
• wygoda—brak konieczności zamrażania próbek ciekłym azotem lub pośpiechu z powrotem do zamrażarki laboratoryjnej
• mobilność—idealna do pobierania tkanek „w terenie”
• wszechstronność—kompatybilna z wieloma procedurami izolacji RNA, w tym z większością zestawów do izolacji RNA
zastosowania
rnalater roztwór stabilizujący RNA został przetestowany na różnych Ssaki, rośliny, E. coli, Xenopus, ryby i Drosophila. Jest idealny do:
• ochrony integralności RNA w tkankach bogatych w RNazy
• pobierania próbek z różnych punktów czasowych bez konieczności natychmiastowego przetwarzania próbek z każdego punktu czasowego
• archiwizacji tkanek do przyszłej mikrodissekcji
• zanurzania jam lub narządów zwierząt w celu stabilizacji RNA podczas długich procedur rozbioru
• pobierania próbek w miejscach (np., szpitale, pola, prom kosmiczny), gdzie natychmiastowa izolacja RNA nie jest możliwa
• Wysyłka próbek na mokrym lodzie lub nawet w temperaturze pokojowej, jeśli są wysyłane przez noc
rnalater RNA Stabilization Solution procedure
rozcięta tkanka (mniej niż 0,5 cm w jednym wymiarze) jest po prostu zanurzona w około 5 objętościach roztworu RNAlater w temperaturze pokojowej. Roztwór przenika komórki, stabilizując RNA. Próbkę można następnie przechowywać w nieskończoność w temperaturze -20°C (tkanka nie zamraża), w temperaturze 4°C przez okres do miesiąca lub w temperaturze 25°C przez okres do tygodnia. W przypadku izolacji RNA tkanka jest po prostu usuwana z roztworu RNAlater i traktowana tak, jakby właśnie została zebrana. Większość tkanek może być przenoszona bezpośrednio do bufora lizy i homogenizowana. Próbki potraktowane roztworem RNAlater, a następnie zamrożone mogą być mielone za pomocą zaprawy i tłuczku lub rozmrożone i przetwarzane jak świeża tkanka bez obawy o pęknięcie komórek i uwolnienie Rnaz, ponieważ RNazy zostały już inaktywowane. Komórki mogą być odwrócone, a następnie dodane do buforu lizy, lub w niektórych przypadkach, roztwór RNAlater mogą być dodawane wraz z komórkami bezpośrednio do buforu lizy.
kompatybilny z różnymi procedurami
Rnalater RNA Stabilization Solution jest kompatybilny z jednoetapowymi metodami izolacji RNA, takimi jak odczynnik TRIzol; z metodami wiązania szkła, takimi jak Qiagen ’ s RNeasy lub Ambion Rnaqueous kit; z metodami ekstrakcji fenolem kwasowym, takimi jak Ambion ToTALLY RNA kit; oraz z metodami wykorzystującymi selekcję mRNA oligo(dT), takimi jak Ambion Poly(a)Purist™ kit. Badania wewnętrzne, jak również niedawno opublikowane niezależne badania, wskazują, że zastosowanie roztworu stabilizującego Rnalater RNA do przechowywania tkanek nie wpływa na wynik kolejnych eksperymentów analizy ekspresji RNA w porównaniu z innymi metodami przetwarzania.