Introdução

a dermatite Atópica (AD) é comum, incurável, crônica inflamatória da pele com uma alta prevalência em crianças que faz com que uma considerável redução na qualidade de vida.1-4 apesar da sua prevalência e morbilidade, existem actualmente poucas terapias orientadas para a SIDA. O tratamento principal é o alívio sintomático baseado no uso de esteróides tópicos anti-inflamatórios não específicos, inibidores da calcineurina e imunossupressores sistémicos tais como azatioprina, ciclosporina e prednisolona.4,5 estas terapias estão associadas a efeitos secundários adversos, e existe uma grande necessidade clínica não satisfeita para o desenvolvimento de terapias ad específicas que são eficazes, económicas e seguras para utilização, especialmente em crianças mais novas.5

a seminal report in 20066 demonstrated that of any marker so far identified, loss-of-function mutations in the gene for the epidermal barrier protein profilaggrin (FLG) show the strongest association with AD.7,8 profilagrina, originalmente chamada de” proteína rica em histidina”devido ao seu teor muito elevado (~10%) de histidina,9 é um grande (>400 kDa) polipéptido sintetizado na camada granular epidérmica. Acumula-se em grânulos de queratohialina antes da desfosforilação e da transformação, através de produtos intermédios de peso inferior, até ~37 kDa monómeros de filagrina.10, 11 Filagrina agrega citoqueratinas 1 e 10 e outros filamentos intermédios na camada granular de queratinócitos, “colapsando-os” como parte do processo de diferenciação epidérmica terminal para formar córneos e abóboras achatadas que são fundamentais para a função da barreira cutânea.12,13 a Filagrina é finalmente desiminada e clivada pelas proteases, incluindo a kallikrein 5, a caspase-14, a elastase-2, a matripase e a prostatina, no seu componente aminoácidos higroscópicos que são o principal componente do “factor de hidratação natural” (NMF), que contribui ainda para a função da barreira através da hidratação da pele e da manutenção da acidez do stratum corneum.14-16

apesar da associação genética entre mutações FLG e AD ser a mais forte de qualquer marcador 6,a maioria dos indivíduos AD são tipo selvagem para FLG.Nestes indivíduos, os efeitos epigenéticos associados à gravidade da doença e ao meio citocino inflamatório reduzem o processamento da filagrina e os níveis NMF, prejudicando assim a hidratação da pele e a integridade da barreira.18, 19 processamento proteolítico anormal da profilaggrina em monómeros funcionais da filagrina devido ao desequilíbrio protease–antiprotease também pode desempenhar um papel no desenvolvimento da doença em doentes com FLG tipo selvagem.Uma barreira cutânea comprometida, quer devido a mutações FLG ou ao processamento epigeneticamente comprometido de profilaggrina, resulta em xerose, ingestão de alergénios, iniciação e exacerbação da doença.Grande parte da actividade de investigação actual tem por objectivo compreender melhor o envolvimento da filagrina na etiologia da AD e traduzir estes conhecimentos em novas abordagens terapêuticas para esta condição crónica e incapacitante.7,21 Otsuka et al22 screened a 1120 compound library of bioactives and reported that JTC801, a four-aminoquinoline derivative, had the ability to increase FLG transcription and translation in a human skin-equivalent model. Foi utilizada uma abordagem de terapia genética para fornecer com sucesso uma construção de codificação de monómeros de filaggrin no modelo de rato com deficiência de FLG (cauda flácida), restaurando assim um fenótipo normal de barreira cutânea.23

neste artigo, sugerimos que uma suplementação nutricional mais simples da l-histidina pode ter um potencial benéfico na AD.

L-histidina é um aminoácido proteinogénico que não é sintetizado pelos mamíferos. Em lactentes humanos, é considerado “essencial” devido aos baixos níveis de microflora intestinal sintetizada por histidina e actividade mínima da carnosinase, o que ajuda a libertar l-histidina livre da carnosina.24 o nosso interesse no uso de L-histidina no AD foi estimulado por várias observações. Em primeiro lugar, tanto em lactentes como em adultos, uma dieta deficiente em histidina resulta numa erupção cutânea eczematosa.Em roedores, a 3h-histidina é rapidamente (1-2 horas) incorporada no profilaggrina nos grânulos de queratohialina após injecção intraperitoneal ou intradérmica14,26 e no prazo de 1-7 dias é libertada como um aminoácido NMF livre no estrato córneo superior.Além disso, a redução dos níveis do estrato córneo de aminoácidos NMF livres, incluindo a histidina e o seu metabolito acidificante ácido urocânico (UCA), estão associados à gravidade da doença de AD e ao genótipo FLG.27,28

Dada a evidência para a dependência de filaggrin processamento e NMF formação adequados níveis de l-histidina, trabalhamos com a hipótese de que a l-histidina iria reforçar filaggrin processamento in vitro, organotypic, modelo de pele humana e tem efeitos benéficos como um suplemento nutricional em indivíduos com dermatite atópica.métodos estudos in vitro condição de cultura de queratinócitos humanos imortalizada HaCaT keratinocites29 de passagens 35-41 (presente do Dr. J. Wood, Universidade de Dundee; origin-German Cancer Research Center( DKFZ), Heidelberg, Germany) were semedded in six-well cell culture plates (Corning Incorporated, Corning, NY, USA) in D-MEM/F-12 medium with GlutaMAX (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) supplemented with 10% fetal bovine serum and 1% penicillin/streptomicina. Culturas Monolayer eram tipicamente confluentes após 48-72 horas. A partir dos dias 15-21, os meios de cultura foram complementados com 1-5 mM adicionais de aminoácidos (L-lisina, l-histidina, ou d-histidina; Sigma-Aldrich Co., St Louis, MO, USA). As células foram colhidas e lisadas com tampão de Laemmli (Sigma-Aldrich Co.) no dia 21.

SDS-PAGE e Western-blotting

A proteína celular Total das monocamadoras HaCaT foi resolvida por 9% de electroforese em gel de poliacrilamida dodecilsulfato de sódio (SDS-PAGE) e Western blotting usando protocolos padrão. Foram utilizados anticorpos primários contra os seguintes antigénios: filagrina (anticorpo policlonal de cabra; Santa Cruz Biotechnology Inc., Dallas, TX, USA) e keratin 10 (rabbit monoclonal; Abcam, Cambridge, UK). A análise densitométrica foi realizada com o sistema de imagem VersaDoc (Bio-Rad Laboratories Inc., Hercules, CA, EUA); todas as bandas foram corrigidas e normalizadas para keratin 10. os fibroblastos dérmicos adultos (HDFs; Thermo Fisher Scientific) das passagens 3-5 foram misturados com colagénio I de cauda de rato (Thermo Fisher Scientific) e deixados em placas de cultura de seis células. Depois de 20-30 minutos, Hacks das passagens 35-41 foram semeados no aspecto apical dos géis. Após as células HaCaT alcançarem a confluência, todas as culturas (incluindo as estruturas de colágeno contendo HDFs) foram colocadas em grades de plástico, criando uma interface ar-líquido com o aspecto apical exposto ao ar. Culturas equivalentes à pele foram mantidas durante um total de 19 dias e completadas nos dias 13-19 com 5 mM de L-lisina, L-serina ou l-histidina (Sigma-Aldrich Co.). As amostras foram lavadas duas vezes em PBS, fixadas em formalina, embebidas em parafina e seccionadas. Protocolos padrão foram usados para hematoxilina e coloração de eosina. No dia 19, os modelos cutâneos exibiam queratina 10, involucrina, filaggrina e loricrina (dados não apresentados), particularmente nas camadas supra-basais, indicando diferenciação epidérmica.

para o ensaio de penetração, 50 µL de Corante dipotássico de Lucifer Amarelo CH (Sigma-Aldrich Co.) foi aplicado na superfície apical de cada modelo de pele no centro em intervalos de 5 minutos por um total de 10 minutos, antes de ser lavado com PBS, fixado em formalina, e embutido em parafina. Secções transversais de 3 µm desparafinadas e hidratadas foram visualizadas usando fluorescência a 455-495/505-555 nm. Lucifer Yellow é um corante aniônico de ácido dissulfônico fluorescente solúvel em água frequentemente usado para estudar morfologia neuronal. Foi utilizado para avaliar a barreira de permeabilidade dos ratinhos e modelos equivalentes à pele.30-33

embora o nosso modelo de pele não tenha mostrado um estrato epidérmico bem estabelecido córneo sob coloração de hematoxilina e de eosina, foi observada uma penetração mínima de corante através do modelo de pele em 5 minutos, indicando uma barreira funcional, equivalente à da epiderme humana. A penetração do corante não foi confluente em toda a amostra. Por conseguinte, a percentagem média de penetração do corante foi calculada em três campos de microscópio consecutivos, não sobrepostos, em cada secção (um total de cinco secções foram pontuadas a partir de cada modelo de pele).estudo piloto de suplementação clínica com nutrição

indivíduos

adulto (> 18 anos de idade) indivíduos com um diagnóstico de AD de acordo com os critérios de diagnóstico do grupo de trabalho do Reino Unido para dermatite atópica “34 foram recrutados. Os critérios de exclusão foram gravidez ou aleitamento, doença hepática, exposição a radiação ultravioleta natural ou artificial, imunossupressão devida a doença ou medicação, ou uso de medicamentos à base de plantas chineses nos 3 meses anteriores ao estudo. Os indivíduos foram autorizados a continuar o uso de emolientes não medicinais e terapia de resgate intermitente de cremes esteróides tópicos, que foram registrados nos formulários de notificação de casos em cada visita.este foi um estudo piloto aleatorizado, em dupla ocultação, controlado por placebo, cruzado, com suplemento nutricional que examinou os efeitos da l-histidina em indivíduos adultos com AD. Os indivíduos foram randomizados usando o Randomizador de pesquisa (www.randomizer.org) quer no Grupo A quer no grupo B. A gravidade inicial da doença de AD foi avaliada por um enfermeiro especializado em dermatologia, utilizando a medição validada da dermatite atópica (SCORAD).35 os indivíduos também foram treinados para realizar a primeira auto-avaliação semanal da sua gravidade da doença de Alzheimer usando a medida de Eczema orientada para o paciente validado (poema).Após um período de 2 semanas de washout durante o qual os indivíduos foram convidados a não utilizar nenhum medicamento para a sua AD, as mesmas medidas foram repetidas e os doentes receberam saquetas idênticas contendo 4 g De L-histidina (Grupo A) ou 4 g de placebo (eritritol); Grupo B) que foi tomado uma vez por dia, dissolvido numa bebida de fruta da manhã. Os pacientes retornaram 4 e 8 semanas depois e SCORAD foi realizado por uma única enfermeira de pesquisa de Dermatologia treinada em cada visita. Os doentes do Grupo A passaram então para o placebo e os do Grupo B tomaram L-histidina durante as 8 semanas seguintes, com SCORAD a ser realizado pela enfermeira de investigação de Dermatologia treinada em intervalos de 4 semanas e questionários POEM a ser completados em intervalos semanais.a Agência Reguladora de medicamentos e produtos de saúde do Reino Unido confirmou que este estudo-piloto de suplementação nutricional sobre os efeitos de um aminoácido não foi classificado como um “ensaio clínico de um medicamento experimental”. O Comité de Ética da investigação Bolton deu autorização para o estudo (#08/H1009/52) que foi realizado de acordo com a Declaração de Helsínquia 1964 e a nota de orientação da EMEA sobre Boas Práticas Clínicas, com o consentimento escrito e informado obtido de todos os indivíduos.

Statistics

Analysis of variance (one – or two-way, with Dunnett’s and Bonferroni post hoc tests performed, respectively) and simple linear regression analysis were used for the in-vitro studies. Estes foram realizados usando GraphPad Prism Versão 4.00 Para Windows (GraphPad software, San Diego, CA, EUA). Os dados são apresentados como valores médios ± desvio-padrão.a análise estatística do estudo-piloto clínico foi realizada por um analista estatístico independente (StatSol, Sereetz, Alemanha) utilizando a versão 15 do SPSS. Os dados são apresentados como erros médios ± padrão e o significado das diferenças entre as médias foi expresso como um valor p de dois lados exato dos testes Wilcoxon rank-sum. Tanto nos estudos clínicos como in vitro, os valores de P<0, 05 foram considerados significativos.a adição de L-histidina a culturas monolayer de queratinócitos HaCaT (N=6) causou uma diminuição num grande número de 120 kDa de profilaggrina intermediate11 e um aumento concomitante de 37 kDa de monómeros de filagrina (Figura 1). Esse aumento de 37 kDa:120 kDa relação (média de 1,69, SD 0.46) foi l-histidina dose (0-5 mM) dependente (P<0.01), mas não foi visto quando queratinócitos foram incubadas com 5 mM d-histidina (média de 0,68, SD 0.13) ou l-lisina (média de 1,02, SD 0.37) (Figura 1).

a Figura 1 L-histidina aumenta filaggrin proteína formação em confluente humanos (HaCaT) keratinocyte monocamadas. A) blots ocidentais representativos que apresentem uma diminuição de 120 kDa de filagrina e um aumento da formação de 37 kDa de filagrina após tratamento com L-histidina. B) A L-lisina e A D-histidina não tiveram efeito significativo na expressão da proteína de filagrina, enquanto a L-histidina aumentou a razão de 37 kDa para 120 kDa de filagrina (P<0, 01), em comparação com os controlos. (C) A L-histidina aumentou a razão de 37 kDa:120 kDa filagrina de forma dependente da dose (R2=0, 54, P<0, 01). As barras de erro representam a média ± DP, em que n = 6. Todas as faixas foram padronizadas para o controle de carga de proteína housekeeping keratin 10. ** p <0,01.abreviaturas: OD, densidade óptica; WB, Western blot.

Para examinar o efeito da l-histidina na função de barreira da epiderme, organotypic pele-equivalente culturas (Figura 2A) foram incubadas com 5 mM de l-histidina (média de 3,60, SD 0.88), o que levou a uma significativa redução na penetração de Lúcifer Amarelo corante fluorescente (N=5, P<0.01) em relação ao controle (média 7.67, SD 0.37). A mesma concentração de L-lisina (média 8, 78, SD 1, 55) ou l-serina (média 7, 64, SD 2, 00) não teve qualquer efeito na Penetração do corante (figura 2B).

Figura 2 L-histidina reforça a função de barreira da organotypic pele de modelo, conforme indicado pela penetração de Lúcifer Amarelo corante fluorescente. A) uma imagem representativa do modelo de pele organotípico com Corante amarelo de Lucifer, vista sob fluorescência, e H&e coloração. B) modelos de pele cultivados em L-histidina de 5 mM tiveram uma penetração reduzida dos corantes (N=5; P<0,01), enquanto que L-lisina e L-serina não tiveram qualquer efeito na função da barreira. Nota: * * p <0,01, n=5. abreviatura: H&e, hematoxilina e eosina.

clínico nutritional supplementation pilot study

Os doentes do grupo a receberam l-histidina no período de tratamento 1 de 8 semanas, seguido de placebo no período de tratamento 2, enquanto os doentes do Grupo B receberam placebo seguido de l-histidina (figura 3A). Três doentes (um no Grupo A e dois no grupo B) foram perdidos para o estudo após o período de lavagem (figura 3B). Os pacientes restantes introduzir o estudo teve uma média (erro padrão da média ) idade de 25,9 (1.6) anos e 27,6 (1.6) anos, nos Grupos A e B, respectivamente; 55% dos pacientes no Grupo A e 70% no Grupo B eram do sexo feminino. A maioria dos doentes foram caucasianos com um doente de raça asiática e caucasiana nos grupos A e B, respectivamente.

Figura 3-protocolo de estudo Clínico e detalhes do paciente. (A) Esquema mostrando o protocolo do estudo, (B) pacientes completaram questionários POEM semanalmente, e (C) disposição dos pacientes.Houve uma boa correlação entre SCORAD e POEM scores (R2=0, 62) em pacientes em estudo no grupo a (style grants) (n=11) e no grupo B (style grants) (n=10) na semana 0. Não houve diferença na pontuação média de SCORAD ou poema entre os dois grupos (P=0,86). abreviaturas: POEM, Patient Oriented Eczema Measure; SCORAD, SCORing Atopic Dermatite; WO, washout period.

tanto o marcador clínico como o poema marcado pelo doente foram utilizados como medidas validadas de gravidade da doença.35 na semana 0, não houve diferença significativa na média (SEM) SCORAD (31.9 e 28.3 ) e poem (18.4 e 16.7 ) entre os grupos a (n=11) e B (n=10), respectivamente. Em todos os pacientes, houve uma forte correlação entre SCORAD e POEM scores na semana 0 (R2=0.62) (figura 3C).

Efeitos da l-histidina suplementação nutricional no ANÚNCIO gravidade

a Seguir a l-histidina (período 1) suplementação, houve uma redução significativa da semana 0 pontuação em SCORAD (34%, P= 0.0029 e 32%, P=0.0029; Figura 4A) e POEMA (39%, P=0.0020 e 39%, P=0.0010; Figura 4B) pontos no Grupo semanas 4 e 8, respectivamente. Nenhuma redução significativa na severidade da doença foi observada no Grupo B, que receberam placebo, durante o período de 1 a 4 semanas ou 8 (SCORAD: -16%, P= 0.3223 e 6%, P=0.5391; POEMA: 2%, P=0.8438 e 16%, P=0.2695), respectivamente (Figura 4A e B). No período 2, houve evidências de que os indivíduos do Grupo B, que cruzou ao longo do placebo para o l-histidina, mostrou uma melhoria em seu ANÚNCIO, a gravidade da doença, embora um carry-over efeito da l-histidina no Grupo A, durante este período, impediu a análise significativa do estudo após o cruzamento.

Figura 4 Efeitos da L-histidina suplementação nutricional no ANÚNCIO gravidade da doença. (A) SCORAD e (B) o POEMA de escores (média ± SEM) foram significativamente reduzidos no Grupo A () pacientes nas semanas 4 e 8 (SCORAD, P=0.0029 e P=0.0029; POEMA, P=0.0020 e P=0.0010, respectivamente) no período 1, enquanto o placebo não tiveram nenhum efeito no Grupo B () pacientes no período de 1 (SCORAD, P=0.3223 e P=0.5391; POEMA, P=0.8438 e P=0.2695, respectivamente). Existe um efeito claro de “transferência” da L-histidina no grupo a entre as semanas 8 e 12, o que exclui uma análise estatística significativa dentro do período de estudo 2.abreviaturas: AD, dermatite atópica; poema, eczema orientado para o doente medida; SCORAD, pontuação dermatite atópica; SEM, erro padrão da média; WO, período de washout.

acontecimentos adversos

foram monitorizados e registados no decurso do estudo. Não houve acontecimentos adversos directamente associados à administração quer da l-histidina quer do placebo.

discussão a terapêutica actual com AD baseia-se no uso paliativo de emolientes e agentes anti-inflamatórios tais como corticosteróides tópicos ou inibidores da calcineurina, com tratamento da superinfecção, particularmente devido a Staphylococcus aureus e Herpes simplex, quando surge. Se a gestão tópica não for bem sucedida, é necessário o tratamento sistémico com base em fármacos potentes tais como corticosteróides, metotrexato, azatioprina, Ciclosporina A ou micofenolato de mofetil. Os efeitos bem conhecidos da utilização prolongada de corticosteróides sistémicos incluem osteoporose, Cataratas, hipertensão e hiperglicemia. Os imunossupressores, como a ciclosporina A e a azatioprina, também têm efeitos secundários potenciais graves, incluindo anomalias hematológicas, predisposição a infecções potencialmente fatais, insuficiência hepática e renal, pelo que requer uma monitorização intensiva por parte do médico supervisor.5-36 tendo em conta a elevada prevalência de AD (até 16% das crianças 1 e 10% dos adultos 2 a nível mundial), estes efeitos adversos impõem um encargo considerável ao doente individual e um custo financeiro elevado para os sistemas de cuidados de saúde e para a sociedade. Os ensaios clínicos estão actualmente a ser realizados com agentes biológicos que actuam sobre elementos do sistema imunitário, mas se forem eficazes, estes serão dispendiosos e serão provavelmente limitados ao medicamento mais grave e resistente ao tratamento. As preocupações sobre a segurança desta classe de agentes continuam, particularmente sobre o aumento dos riscos de infecção e malignidade.5,36 uma grande necessidade clínica não satisfeita permanece, portanto, para intervenções seguras, convenientes e direcionadas não esteróides adequadas para uso a longo prazo na gestão de AD, particularmente em crianças.os monocamadores HaCaT cultivados em meios enriquecidos com L-histidina foram associados a um aumento significativo da expressão dos monómeros de filagrina de 37 kDa em relação ao intermediário de filagrina de 120 kDa. Não se observou aumento na expressão dos monómeros de filagrina com meios enriquecidos com L-lisina e d-histidina, os isómeros estruturalmente semelhantes mas biologicamente inactivos da l-histidina. O mecanismo pelo qual a l-histidina melhorou o processamento da filagrina de uma forma específica de enantiómero não é claro, embora a l-histidina seja um participante comum nas reacções enzimáticas 37 devido à anfotericidade da sua cadeia lateral de imidazol. os monómeros de 37 kDa da filagrina são produtos intermédios da proteólise da filagrina que se degradam ainda mais em fragmentos mais pequenos do péptido da filagrina pelas proteases, incluindo a calpain-1 e a caspase-14 e, finalmente, em aminoácidos livres pela hidrolase da bleomicina.É de esperar que o aumento da formação dos monómeros de filagrina de 37 kDa pela L-histidina melhore a agregação de queratina e conduza ao aumento dos níveis dos componentes livres de aminoácidos NMF. a L-histidina é higroscópica, e esta capacidade de capturar e reter água torna-a um componente importante do NMF.14 a capacidade da l-histidina de aumentar o processamento de filagrina com o consequente aumento da função da barreira cutânea é suportada pela nossa descoberta de que os equivalentes de pele cultivados em meios enriquecidos com L-histidina eram mais resistentes à penetração por corante fluorescente de Lucifer Amarelo. O efeito observado pode dever-se quer à melhoria da agregação queratina quer ao aumento do nível de NMF nos modelos cutâneos devido ao aumento da disponibilidade de substrato (ou seja, mais monómeros de filagrina) para a degradação proteolítica, ou ambos. Em indivíduos com mutações de FLG de tipo selvagem ou heterozigótica, a L-histidina pode melhorar os sintomas da doença melhorando a formação de filagrina e a produção de NMF, enquanto em doentes com mutações de FLG homozigosas, a l-histidina pode aumentar a quantidade de NMF na pele. Em todos os casos, espera-se que o aumento da formação de filagrina e/ou o complemento do NMF melhore a função da barreira cutânea e reduza a carga da doença de AD. pode argumentar-se que a utilização de queratinócitos humanos primários em vez de células HaCaT para o ensaio da função de barreira é mais “fisiológica”. No entanto,o nosso modelo interno equivalente à pele é uma adaptação da técnica demonstrada por Schoop et al, 39 que demonstraram que as células HaCaT, cultivadas numa interface ar–líquido em várias matrizes que servem como equivalentes dérmicos, podem ser utilizadas para gerar estruturas altamente diferenciadas organotípicas equivalentes de pele in vitro. Ao contrário dos queratinócitos primários que são normalmente derivados de amostras de prepúcio humano, a linha celular HaCaT é de qualidade padronizada, uma vez que é independente das variações de doadores.o estudo piloto de suplementação nutricional clínica sugere que a l-histidina oral, administrada uma vez por dia durante um período de 4 semanas, está associada à melhoria dos sinais e sintomas clínicos dos doentes adultos com AD. Tanto nas medidas de gravidade da doença com pontuação clínica (SCORAD) como nas do doente (poema), verificou-se uma diminuição de ~40% na actividade da AD durante 4 semanas de tratamento, semelhante à notificada com o uso de corticosteróides tópicos de potência média (Grupo III).Os efeitos benéficos observados nos doentes do grupo a persistiram durante várias semanas após a transição da l-histidina para o placebo, sugerindo um benefício prolongado do tratamento com l-histidina. Importante, não foram notificados acontecimentos adversos atribuíveis à suplementação com l-histidina.demonstrou-se, in vitro, um aumento dependente da concentração de L-histidina na formação de monómeros de 37 kDa filaggrina e na melhoria associada à L-histidina na função de barreira de um modelo equivalente à pele. Esta observação está correlacionada com a evidência do estudo clínico-piloto nutricional de que a l-histidina oral pode ter benefícios terapêuticos na AD. Embora existam limitações relacionadas com o tamanho da amostra do nosso estudo-piloto, se forem consistentes, os resultados sugerem que a l – histidina oral de um dia por dia tem efeitos semelhantes na AD aos notificados para corticosteróides tópicos de potência média (Grupo III).Estas observações, quando combinadas com o seu perfil de segurança estabelecido, sugerem que a suplementação nutricional da l-histidina pode ser uma intervenção segura, conveniente e não esteróide adequada para utilização a longo prazo no tratamento da AD, particularmente em crianças. este estudo foi apoiado por bolsas do Scottish Overseas Research Student Award, University of Edinburgh College of Medicine and Veterinary Medicine PhD Scholarship, e da Universidade de Manchester. O CEMG é investigador Sénior do Instituto Nacional de pesquisa de saúde. Agradecemos aos enfermeiros de pesquisa do centro de Dermatologia de Manchester por gerirem a parte clínica deste projeto e também agradecemos a todos os voluntários pacientes por participarem deste estudo. todos os autores contribuíram para a análise de dados, elaboração e revisão crítica do artigo, deram a aprovação final da versão a ser publicada, e concordam em ser responsáveis por todos os aspectos do trabalho.

Disclosure

CEMG reports grants from Zymogenetics, Stiefel, and Regeneron, grants and personal fees from Novartis and Pfizer. NKG é um diretor fundador da Curapel, uma empresa de spin-out da Universidade de Manchester que possui patentes neste campo. Os outros autores não relatam conflitos de interesses neste trabalho.

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