o que são proteínas para andaimes?

GPCRs e proteínas do andaime

G-protein Coupled Receptors (GPCRs) são uma grande classe de proteínas da superfície celular que transmitem sinais extracelulares para o núcleo. Um exemplo de uma GPCR é o receptor β-adrenérgico que sente a hormona adrenalina. Uma vez ativado por um ligante na superfície celular externa, as GPCRs ativam suas proteínas-G cognatos que residem na membrana celular interna. As proteínas G ativadas então deslizam ao longo do interior da membrana celular para ativar uma cascata de proteínas e enzimas que por sua vez amplificam a mensagem original recebida pela GPCR. As proteínas de andaimes são os principais centros de informação a jusante das GPCRs activadas. As proteínas do andaime recrutam membros a jusante de uma cascata sinalizadora para a membrana da célula interna muito rapidamente, ou antes do tempo, tornando-a eficiente para que a mensagem se mova da GPCR para o citosol.

Estados de Ativação da Cascata de Sinalização

A complexidade de sinalização intracelular é que as proteínas em uma cascata de sinalização têm diferentes estados de atividade (i.e. fora, parcialmente ativo, totalmente ativo). Estes estados dependem de mudanças conformacionais que resultam de interações com outras proteínas. Eles também dependem da presença ou ausência de grupos de moléculas, tais como grupos de fosfato, grupos de ubiquitina e iões de cálcio. O estado de ativação de uma proteína de sinalização é muitas vezes usado como um indicador de se uma determinada via foi ativada. Por exemplo, MEK fosforilado ou ERK é muitas vezes interpretado como representando a ativação de uma via de sinalização intracelular a jusante de uma GPCR. Além disso, essas proteínas sinalizadoras podem ter múltiplos locais de fosforilação, diferentes combinações das quais afetam o nível de atividade da proteína ou semi-vida. Proteínas como MEK e ERK são conhecidas por se ligarem entre si em proteínas de andaimes. A capacidade das proteínas do andaime para se ligarem ao MEK e ao ERK também é regulada em termos do Estado de ativação do andaime, que muda após modificação pós-translacional por adição de moléculas químicas.

escolher o Direito Epitopos para obter Informações Precisas

A referida complexidade de sinalização intracelular é precisamente por isso que a escolha correta de anticorpos é crucial quando os pesquisadores procuram determinar com precisão o estado de uma célula em resposta a estímulos extracelulares. Cada conformação ativa de um local de proteína ou fosforilação pode servir como um epítopo diferente que pode ser ligado por um anticorpo. Assim, anticorpos que são projetados para detectar a presença ou ausência de uma fracção química em uma proteína de sinalização pode dar aos pesquisadores uma imagem clara de que via foi ativada e em que medida. Epitópios fosforilados são frequentemente alvos de testes de imunoblotting e imunolocalização in situ. Uma vez que uma proteína pode ter múltiplos locais de fosforilação, cada um dos quais afeta a proteína de forma diferente, além de vários locais para grupos como ubiquitinação, escolher os epítopos certos para detectar é uma tarefa frutífera – mas não trivial.múltiplos epitópios, seja sobre a mesma proteína ou proteínas diferentes, podem ser detectados simultaneamente ou sequencialmente na mesma mancha ou nas mesmas células. Assim, é importante que as espécies hospedeiras certas para anticorpos primários e secundários sejam consideradas com antecipação. Anticorpos de domínio único também são úteis para estes experimentos, que adicionam à versatilidade de combinações de anticorpos que podem ser usados no mesmo teste.os anticorpos monoclonais e policlonais são úteis na detecção do estado das Cascatas de sinalização intracelular. O nosso guia de selecção de anticorpos facilita a escolha da combinação correcta de anticorpos. Ele leva em consideração as espécies de espécimes, as espécies hospedeiras, o nível desejado de especificidade, e preocupações de reatividade cruzada, entre outros fatores. O Guia de seleção de anticorpos irá levá-lo às melhores opções para anticorpos de propósito único ou aqueles que você vai usar em múltiplas aplicações. A combinação correta de anticorpos direcionados a epítopos estratégicos trará clareza ao estado de qualquer cascata de sinalização intracelular.