Picardo și-a făcut debutul în lungmetraj ca Eddie Quist, vârcolacul ucigaș în serie în filmul Joe Dante urletul (1981). De asemenea, a avut un rol recurent în sitcom Alice și a jucat un doctor într-un episod din fetele de aur. A jucat o serie de roluri în filmul de science fiction al familiei lui Dante Exploratori (1985), iar mai târziu a apărut în Dante ‘s Burbs, Looney Tunes: înapoi în acțiune, Matinee, Gremlins 2: noul lot, soldați mici și spațiu interior. Picardo joacă adesea roluri sub straturi de latex protetic, jucând și Meg Mucklebones care locuiește în mlaștină în legenda filmului lui Ridley Scott. De asemenea, a avut un rol mic ca director funerar în John Landis ‘ s Amazon Women on the Moon. El exprimă Pfish în două Pfish& Chip shorts așa cum se vede pe Cartoon Network ‘ s What-A-Cartoon! Arată. Picardo descrie, de asemenea, vocea și fața robotului Johnny Cab în Total Recall. A apărut într – un episod din ER în 1995 ca Abraham Zimble (Sezonul 2-Episodul 6, „Days Like This”).în 1993, Picardo a avut un scurt rol ca Joe „The Meat Man” Morton, un măcelar și vecin al personajului lui Tim Allen din sitcom-ul Home Improvement.

în 2001, a jucat în episodul de 7 zile „Apocalipsa”, pretinzând că este un călător în timp de șapte ani în viitor.

în 2007, a jucat rolul Principal White în Ben 10: Race Against Time. În 2007, a jucat în lungmetrajul independent al regizorului Russ Emanuel, P. J., alături de John Heard și Vincent Pastore. De asemenea, a jucat în Russ Emanuel ‘ s Chasing the Green în 2008, cu William Devane, Jeremy London și Ryan Hurst.Picardo a apărut pe Kojak într-un episod din 1977, E-Ring, ca reprezentant media în Pentagon, ca tată înfuriat în Cold Case și ca ofițer de poliție în CSI: NY. A fost o stea invitată recurentă în două episoade din Sezonul 7 din Smallville.

departe de actorie, din 1999 până în 2015, Picardo a fost membru al Consiliului Consultativ al Consiliului de Administrație al Societății planetare; începând din 2015, a fost ales în Consiliul de administrație însuși.

alte repere ale carierei includ interpretarea în masa lui Leonard Bernstein în timpul turneului său de debut European, interpretarea cu societatea Universității Yale din Orfeu& Bacchus a cappella cântând grup ca student și apărând în zeci de alte roluri de televiziune și film, inclusiv filmul our Last Days as Children.

Picardo a interpretat vocea lui Loki în jocul video Xbox 360 prea uman. În 2009, a apărut și în Pushing Daisies, Chuck și Castle. Tot în 2009, a jucat rolul principal în filmul thriller psihologic independent Sensored. În 2010, Picardo a avut un cameo în episodul final al persoane necunoscute, ca membru al Consiliului de conducere al „programului”. Picardo îl exprimă și pe Robert McNamara în Call of Duty: Black Ops în campanie și în ” modul Zombie „după finalizarea campaniei pe o singură hartă,”cinci”. Picardo a apărut în patru episoade din mentalistul din 2012 până în 2013 ca Jason Cooper, locotenent al liderului cultului Bret Styles.

Picardo a apărut și într-un episod din Sezonul 6 din Supernatural intitulat „bate-ți mâinile dacă crezi”, ca un spiriduș.

în mai 2014, Cartoon Hangover l-a anunțat pe Picardo ca actor vocal invitat în al doilea sezon al Bravest Warriors, în episodul „The Parasox Pub”.

în 2017, Picardo l-a interpretat pe Tatăl Lt.Kitan în primul episod al sezonului Orville intitulat „Firestorm” și a reluat rolul în episodul din 2019 „acasă”.Picardo a apărut ca el însuși într-un episod din Schooled.

Star TrekEdit

din 1995 până în 2001, a jucat rolul hologramei medicale de urgență (EMH) în serialul de televiziune Star Trek: Voyager. Înainte de a fi acceptat pentru acest rol, Picardo a audiat inițial pentru rolul lui Neelix. Ulterior a regizat și două episoade.

a jucat copii suplimentare ale rolului EMH în filmul din 1996 Star Trek: Primul Contact și 1997 Star Trek: Deep Space Nine episodul ” Doctor Bashir, presupun?”A jucat, de asemenea, Dr.Lewis Zimmerman, creatorul EMH, în episoadele din Deep Space Nine și Voyager.în 2002, Picardo a scris manualul hologramei, publicat de Pocket Books.în 2007 și 2008, Star Trek: The Music a fost un turneu în mai multe orașe cu John de Lancie. Picardo și de Lancie au povestit în jurul spectacolului orchestral, explicând istoria muzicii din Star Trek.în 2015, Picardo a reluat rolul doctorului Lewis Zimmerman în episodul pilot al serialului Star Trek: Renegades.

StargateEdit

În 2004, a început să joace rolul recurent al consilierului Internațional de supraveghere (IOA) membru Richard Woolsey atât în Stargate SG-1, cât și în Stargate Atlantis. Prima sa apariție în acele serii a fost în Stargate SG-1 Episodul „Heroes (Partea 2)”.

pe 5 februarie 2008, s-a anunțat că Picardo se va alătura distribuției obișnuite a Stargate Atlantis cu normă întreagă pentru al cincilea și ultimul sezon al seriei. El a preluat rolul de comandant al Misiunii expediției Atlantis.