Picardo debuterade som Eddie Quist, seriemördaren varulv i Joe Dante-filmen The Howling (1981). Han hade också en återkommande roll i sitcom Alice och spelade en läkare i ett avsnitt av The Golden Girls. Han spelade ett antal roller i Dantes familj science fiction film Explorers (1985) och uppträdde senare i Dantes ’Burbs, Looney Tunes: Back in Action, Matinee, Gremlins 2: The New Batch, små soldater och Innerspace. Picardo spelar ofta roller under lager av protetisk latex, efter att ha spelat de träskboende Meg Mucklebones i Ridley Scotts film Legend. Han hade också en liten roll som begravningsdirektör i John Landis Amazon Women on the Moon. Han uttrycker Pfish i två Pfish & Chip shorts som ses på Cartoon Network ’ s What-a-Cartoon! Visa. Picardo skildrar också rösten och ansiktet på roboten Johnny Cab i Total Recall. Han dök upp i ett avsnitt av ER 1995 som Abraham Zimble (säsong 2 – Avsnitt 6, ”Days Like This”).1993 hade Picardo en kort roll som Joe ”The Meat Man” Morton, en slaktare och granne till Tim Allens karaktär på sitcom Home Improvement.

2001 gästade han i 7-dagars avsnittet” Revelation”, som utger sig för att vara en tidsresenär från sju år i framtiden.

2007 spelade han Principal White i Ben 10: Race Against Time. 2007 spelade han i den oberoende långfilmen av regissören Russ Emanuel, P. J., tillsammans med John Heard och Vincent Pastore. Han spelade också in Russ Emanuel ’ s Chasing the Green 2008, med William Devane, Jeremy London och Ryan Hurst.

Picardo dök upp på Kojak i ett avsnitt från 1977, E-Ring, som mediarepresentant i Pentagon, som en rasande far I Cold Case och som polis i CSI: NY. Han var en återkommande gäststjärna i två avsnitt av säsong 7 av Smallville.

bort från att agera, från 1999 till 2015, var Picardo medlem av styrelsens rådgivande råd för Planetary Society; från och med 2015 valdes han till styrelsen själv.

andra karriärhöjdpunkter inkluderar att uppträda i Leonard Bernsteins Mässa under sin europeiska debutresa, uppträda med Yale University Society of Orpheus & Bacchus a cappella sånggrupp som grundutbildning och visas i dussintals andra TV-och filmroller, inklusive filmen våra sista dagar som barn.

Picardo framförde Lokis röst i Xbox 360-videospelet för mänskligt. 2009 medverkade han också i Pushing Daisies, Chuck och Castle. Även 2009 spelade han huvudrollen i den oberoende psykologiska thrillerfilmen Sensored. 2010 hade Picardo en komo i det sista avsnittet av personer okända, som medlem i ”programmet”styrelse. Picardo uttrycker också Robert McNamara i Call of Duty: Black Ops i kampanjen och i ”Zombie mode”efter att ha avslutat kampanjen på en karta, ”fem”. Picardo dök upp i fyra avsnitt av The Mentalist från 2012 till 2013 som Jason Cooper, en löjtnant för kultledaren Bret Styles.

Picardo dök också upp i en säsong 6 avsnitt av Supernatural med titeln” Klappa Händerna om du tror”, som en leprechaun.

i maj 2014 tillkännagav Cartoon Hangover Picardo som gäströstskådespelare under andra säsongen av Bravest Warriors, i avsnittet ”The Parasox Pub”.

2017 spelade Picardo Lt Kitans far i första säsongsavsnittet av Orville med titeln ” Firestorm ”och repriserade rollen i avsnittet”Hem” 2019.

Picardo framträdde som sig själv i ett avsnitt av Schooled.

Star TrekEdit

från 1995 till 2001 spelade han rollen som Emergency Medical Hologram (EMH) i tv-serien Star Trek: Voyager. Innan han accepterades för denna roll, Picardo auditionerade ursprungligen för rollen som Neelix. Senare regisserade han också två avsnitt.

han spelade ytterligare kopior av EMH: s roll i 1996-filmen Star Trek: First Contact och 1997 Star Trek: Deep Space Nine avsnitt ” Doctor Bashir, antar jag?”Han spelade också Dr. Lewis Zimmerman, skaparen av EMH, i avsnitt av Deep Space Nine och Voyager.

2002 författade Picardo Holograms handbok, publicerad av Pocket Books.

under 2007 och 2008, Star Trek: The Music var en multi-city tour med John de Lancie. Picardo och de Lancie berättade om orkesterföreställningen och förklarade musikens historia i Star Trek.under 2015 repriserade Picardo rollen som Dr. Lewis Zimmerman i pilotavsnittet av fanserien Star Trek: Renegades.

StargateEdit

2004 började han spela den återkommande rollen som international Oversight Advisory (IOA) medlem Richard Woolsey i både Stargate SG-1 och Stargate Atlantis. Hans första framträdande i dessa serier var i Stargate SG-1 episod ”Heroes (Del 2)”.

den 5 februari 2008 tillkännagavs att Picardo skulle gå med i den vanliga rollen i Stargate Atlantis på heltid för seriens femte och sista säsong. Han tog över rollen som uppdragschef för Atlantis-expeditionen.