SacI (10 U/µL)
Description
5′ | G | A | G | C | T ↓ | C | 3′ | ||||
3′ | C | T | C | G | A | G | 5′ |
Thermo Scientific SacI restriction enzyme recognizes GAGCT^C sites and cuts best at 37°C in its own unique buffer. Se reaktionsbetingelser för restriktionsenzymer för en tabell över enzymaktivitet, betingelser för dubbel matsmältning och värmeinaktivering för detta och andra restriktionsenzymer. Obs: finns även som ett FastDigest-enzym för snabb DNA-digestion. Isoschizomerer: Eco53kI, EcoICRI, Psp124BI, SstI.Thermo Scientific konventionella restriktions endonukleaser är en stor samling av högkvalitativa restriktionsenzymer, optimerade för att fungera i en av buffertarna i fem Buffertsystemet. Dessutom tillhandahålls den universella Tangobufferten för bekvämlighet i dubbla matsmältningsorgan. Alla enzymer uppvisar 100% aktivitet i de rekommenderade buffertförhållandena och reaktionsförhållandena. För att säkerställa konsekvent prestanda innehåller Thermo Scientific restriction enzyme reaction buffertar förblandade BSA, vilket förbättrar stabiliteten hos många enzymer och binder föroreningar som kan vara närvarande i DNA-preparat.
Funktioner
• överlägsen kvalitet-stringent kvalitetskontroll och branschledande tillverkningsprocess• br> * bekväm färgkodade fem buffertsystem• br> * inkluderar universal Tango buffert för dubbel-digestions
* brett urval av restriktions endonukleas specificiteter
applikationer
* molekylär kloning
• begränsning site mapping
* genotypning
• Southern blotting• br> * begränsning fragment längd polymorfism(RFLP) r• * SNP
Obs: SacI är känslig för cytosinmetylering vid GAGmCTC, men inte GAGCTmC och okänslig för adeninmetylering vid GmAGCTC. AluI metyltransferas (AGmCT) kan användas för att blockera SacI. Supercoiled plasmider kan kräva upp till 5-faldigt mer SacI för fullständig digestion än linjärt DNA. SacI hämmas av vanliga kliniska antikoagulantia som finns i viss beredning av antikoagulativt perifert blod och benmärg. Nivåer av EDTA och ACD (citronsyra-natriumcitrat-dextros) i standardprovberedning har visat sig hämma SacI. Tre gånger den normala koncentrationen för heparin krävs för att hämma SacI. (J. E. Coad et al., Hämning av restriktionsendonukleaser med vanliga kliniska antikoagulantia. Anal. Biochem. 205, 368-369, 1992). För metylering känslighet, se produktspecifikationer.