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SacI (10 U/µL)

Description

5′ G A G C T ↓ C 3′
3′ C T C G A G 5′

Thermo Scientific SacI restriction enzyme recognizes GAGCT^C sites and cuts best at 37°C in its own unique buffer. Siehe Reaktionsbedingungen für Restriktionsenzyme für eine Tabelle der Enzymaktivität, Bedingungen für den Doppelverdau und Hitzeinaktivierung für dieses und andere Restriktionsenzyme. Hinweis: Auch als FastDigest-Enzym für die schnelle DNA-Verdauung erhältlich. Isoschizomere: Eco53kI, EcoICRI, Psp124BI, SstI.
Thermo Scientific konventionelle Restriktionsendonukleasen sind eine große Sammlung hochwertiger Restriktionsenzyme, die für die Arbeit in einem der Puffer des Fünf-Puffer-Systems optimiert sind. Darüber hinaus ist der universelle Tango-Puffer für die Bequemlichkeit in Doppelaufbrüchen vorgesehen. Alle Enzyme zeigen unter den empfohlenen Puffer- und Reaktionsbedingungen eine 100%ige Aktivität. Um eine gleichbleibende Leistung zu gewährleisten, enthalten Thermo Scientific Restriktionsenzymreaktionspuffer vorgemischtes BSA, das die Stabilität vieler Enzyme verbessert und Verunreinigungen bindet, die in DNA-Präparaten vorhanden sein können.
Eigenschaften
* Überlegene Qualität – strenge Qualitätskontrolle und branchenführender Herstellungsprozess
* Praktisches farbcodiertes Fünf-Puffer-System
* Enthält universellen Tango-Puffer für Doppelverdauungen
• BSA vorgemischt in Reaktionspuffern
* Große Auswahl an Restriktionsendonuklease-Spezifitäten
Anwendungen
* Molekulares Klonen
* Restriktionsstellen-Mapping
• Genotypisierung
* Southern Blotting
• Restriktionsfragmentlängenpolymorphismus (RFLP)
* SNP
Hinweis: SacI ist empfindlich gegenüber Cytosinmethylierung bei GAGmCTC, aber nicht GAGCTmC und unempfindlich gegen Adeninmethylierung bei GmAGCTC. AluI Methyltransferase (AGmCT) kann verwendet werden, um SacI zu blockieren. Supercoiled Plasmide können bis zu 5-fach mehr SacI für die vollständige Verdauung als lineare DNA erfordern. SacI wird durch übliche klinische Antikoagulanzien gehemmt, die in einigen Zubereitungen von antikoaguliertem peripherem Blut und Knochenmark vorkommen. Es wurde gezeigt, dass EDTA- und ACD-Spiegel (Zitronensäure-Natriumcitrat-Dextrose) in der Standardprobenvorbereitung die SacI hemmen. Dreimal die normale Konzentration für Heparin wird angefordert, um SacI zu hemmen. (J. E. Coad et al., Hemmung von Restriktionsendonukleasen durch übliche klinische Antikoagulanzien. Anal. Biochem. 205, 368-369, 1992). Für die Methylierungsempfindlichkeit siehe Produktspezifikationen.