i když protilátky cílení imunitní inhibiční kontrolní body byly klíčem k úspěchu imunoterapie rakoviny v posledním desetiletí, důkazy naznačují, stimulační kontrolní body jsou stejně důležité při vytváření efektivní protinádorové reakce. Značné úsilí se zaměřilo na vývoj agonistů kostimulačních receptorů, včetně OX40.1-3

více nuancí roli těchto receptorů a problémy rozvojových agonistické protilátky se ukázaly jako významné úskalí klinické překlad,4 ale mnoho farmaceutické společnosti pokračovat v jejich pronásledování v naději, že nové protidrogové strategie bude úspěšná.5

Údaje z probíhajících klinických studií prezentovaných na nedávné konference zdůraznily několik těchto nových léků a přinesl OX40 zpět do zaměření.6-8

T-Buňka Costimulation

Plná aktivace naivních T buněk vyžaduje nejen interakce mezi T-buněčný receptor (TCR) a hlavní histokompatibilní komplex–vázané peptidy na povrchu antigen-prezentujících buňkách (APC), ale také sekundární signál poskytována kostimulační molekuly na APC, které se váží na jejich receptory na T-buňkách (Figure9).9-12

obrázek. OX40 Mechanismy Action9

typický kostimulační receptor CD28, který je exprimován na naivní T-buňky a poskytuje počáteční kostimulační signál, když se váže k jeho ligandu, ale řadu dalších receptory a ligandy jsou také upregulated v hodinách a dnech po aktivace T-buněk. Tyto udržení aktivace T-buněk a prohloubení T-buněčnou odpověď tím, že zvýšení proliferace a přežití a optimalizaci penetrace, diferenciaci a efektorové funkce různých T-buněk podskupin.4,10,11

Mezi kostimulační receptory je OX40, 1 z 29 členů tumor nekrotizující faktor receptor (TNFR) nadčeleď; 6 těchto členů rodiny, včetně OX40, zahrnuty jsou klasifikovány jako imunitní costimulators.4 Vyjádření OX40 je přesměrován na oba CD4 a CD8 pozitivních T buněk mezi 12 a 24 hodin po TCR zapojení a je pak postupně downregulated 48 až 96 hodin později.10,13,14

jediným známým ligandem je OX40L, který je podobně přechodně exprimován na aktivovaných APC. OX40L se také nachází na jiných typech buněk, včetně aktivovaných přirozených zabijáků a B buněk, stejně jako nehematopoetických buněk, jako jsou hladké svalstvo a endotelové buňky. OX40 vyžaduje shlukování pro efektivní aktivaci. Aby se to usnadnilo, OX40L obsahuje konzervované homologické domény TNF, kterými vytváří trimery, které se mohou vázat na 3 molekuly receptoru OX40 současně.10-12

stejně jako ostatní členové nadčeledi TNFR je OX40 transmembránový protein. Prostřednictvím své cytoplazmatické ocas, OX40 váže na členy TNFR-associated factor (KONGESCÍ) rodina adaptér proteiny, konkrétně TRAFs 2, 3 a 5. TRAFs usnadnit aktivaci následných signálních kaskád, který lze nejlépe charakterizovat jako nukleární faktor kappa B (NFkB) dráhu, nakonec vyvolat řadu různých účinků v T-buněk, závislých na konkrétní podmnožinu.10-12

šlápnutí na plyn

navzdory úspěchu inhibitorů imunitního kontrolního bodu (ICIs) mnoho pacientů nereaguje a vývoj rezistence omezuje trvalý přínos pro ostatní. Kostimulační receptory jsou již dlouho sledovány jako alternativní a potenciálně komplementární cíl.2,3

Preklinické studie prokázaly schopnost agonistické OX40 protilátky na podporu aktivace T-buněk a zvýšení T-buněčné protinádorové imunity, což vede regrese nádoru a přežití výhody v celé řadě nádorových modelů.15-17

první OX40 agonisty k postupu do klinického testování bylo 9B12, myší, monoklonální protilátky vyvinuty Providence Portland Medical Center a AgonOx, a to jak v Portlandu, Oregon. Agent byl následně přejmenován na MEDI6469, když AgonOx in-licencoval svůj program OX40 společnosti MedImmune, společnosti AstraZeneca.4,9,18,19

V první-v-lidské studie 9B12/ MEDI6469 (NCT01644968), tam byly žádné nádorové odpovědi, i když 40% pacientů regresi alespoň 1 metastatické léze. Léčba byla dobře snášena a existovaly významné důkazy imunomodulační aktivity.20

humanizovaná verze této protilátky, MEDI0562 (tavolimab), následně byla vyvinuta, aby se zabránilo pacientů, z formování lidské anti-myší protilátky, které omezený počet dávek ve výše uvedené studii.20 V 1. fázi studie u pacientů s pokročilými solidními nádory (NCT02318394), tam byly žádné dávku limitující toxicita (DLTs) a 1 pacient vykazoval částečné odpovědi (PR), která trvala 16 týdnů.21 AstraZeneca od té doby ukončila vývoj MEDI6469 a MEDI0562, 5, ale ten je stále studován akademickými skupinami.

Dva pozoruhodné OX40 agonisty, MOXR0916 a PF-04518600, byly tested22-25; nicméně, vývoj bývalého byl přerušen zcela v 2019,5 a ta je již uvedena v Pfizer rozvoj potrubí.26 celkově ox40 agonisté jako monoterapie nesplnili očekávání, pouze s mírnou protinádorovou aktivitou.

podle odborníků v oboru spočívá část problému v výzvách spojených s vývojem agonistických protilátek. Protože antagonistické protilátky vykazují klasický vztah mezi dávkou a odpovědí, jsou vhodné pro studie dávkování. Hledání nejvyšší tolerovatelné dávky agonistů receptorů má však potenciál vyčerpat T buňky a vyvrátit jakoukoli protinádorovou účinnost.4,5

důležité úvahy pro navrhování optimálních agonistických protilátek zahrnují vazebnou afinitu, výběr epitopů, valenci a obsazenost receptorů. Kromě toho, protože kostimulační receptor clustering je klíčem k signalizaci aktivace vyvolané nativní ligand vazba, agonista protilátek musí být schopen reprodukovat tento efekt.4,5

Konvenční bivalentní protilátky, které mohou komunikovat pouze s 2 receptory za molekula protilátky, mají nízkou nebo žádnou vnitřní agonistickou aktivitu a jsou závislé na sekundární cross-linking protilátky-receptor komplexy způsobené interakcí mezi Fc regionu a Fcy receptor (FcyR).27,28

Vydělávat na Kombinaci Terapie

i Přes překážky, stále existuje značný zájem o OX40-cílené léky (Tabulka), ale pozornost se přesunula k kombinované terapii. Nejoblíbenější strategií je kombinovat agonisty OX40 s ICIs na základě Předklinické demonstrace synergie, i když podávání léků ve správné sekvenci může být u těchto kombinací zásadním hlediskem.29,30

tabulka. Vyberte Studií OC40-Cílené Léky v Aktivní Klinického Vývoje

GlaxoSmithKline vyvíjí zlidštění OX40 protilátek, GSK3174998, který je hodnocen v několika probíhajících klinických studiích v kombinaci s různými léky. Výsledky z nedávno dokončené fáze 1 ZAPOJIT-1 studie (NCT02528357) byly hlášeny v roce 2020 Americké Asociace pro Výzkum Rakoviny (AACR) Virtuální Výroční Schůzi I.

Pacientů s pokročilými solidními nádory byly léčeny stupňující se dávky GSK3174998 (0.003-10 mg/kg) intravenózně každé 3 týdny jako monoterapie (část 1; n = 45), nebo v kombinaci s 200 mg pembrolizumab (část 2; n = 96). V části 1 měl 1 pacient PR a 1 dosáhl stabilního onemocnění (SD), oba při dávce 0, 3 mg/kg. V části 2 byly 2 úplné odpovědi, 7 PRs a 9 pacientů s SD v dávkách od 0.01 až 3 mg / kg. Klinický přínos byl pozorován jak u pacientů předléčených inhibitory PD-1/PD-L1, tak u pacientů dosud neléčených.

v části 2 byly 2 DLTs (nemaligní pleurální výpotek stupně 3 při 0, 03 mg / kg a myokarditida stupně 1 při 10 mg / kg). Nejčastějšími nežádoucími účinky souvisejícími s léčbou, které byly převážně stupně 1 a 2, byly průjem a únava v části 1 a únava a nauzea v části 2.31

Pohybující se Vpřed S Novou Strategií

řešit potřebu receptor clustering, úpravy Fc oblasti protilátky pro zvýšení FcyR vazba může být efektivní strategií, ale také může zvýšit některé efektorové funkce protilátek, včetně protilátce závislé buněčné cytotoxicity. I když to může být prospěšné, které poskytují další protinádorový účinek, to může také vést k vyčerpání T-buňky aktivovány pomocí kostimulační agonistické protilátky, a tím snižují jeho protinádorové imunitní účinky.27

alternativní strategií je zvýšení Valence. Inhibrx vyvíjí INBRX-106, hexavalentní OX40 monoklonální protilátku, která může vázat 6 OX40 receptorů na molekulu léčiva. Podle webových stránek společnosti bylo prokázáno, že v preklinickém testování překonává bivalentní protilátky.32

Bispecifické protilátky, určené k zapojení 2 různých cílů, jsou také studovány.

ator-1015 se zaměřuje na OX40 a coinhibitory receptor, CTLA-4. Probíhá první studie fáze 1 u lidí (NCT03782467)u pacientů s pokročilými solidními nádory a předběžné výsledky byly prezentovány na virtuálním vědeckém programu American Society of Clinical Oncology (asco) 2020. ATOR-1015 byl podáván intravenózně každé 2 týdny při zvyšujících se dávkách od 0, 043 do 600 mg. Pacienti byli silně předléčeni, po mediánu 5 předchozích linií léčby.

údaje od 21 dosud podávaných pacientů prokázaly nejlepší odpověď SD. U 11 pacientů nebyly hlášeny žádné DLT a trae, nejčastěji reakce související s infuzí a vyrážka. Nebyly hlášeny žádné závažné imunitně podmíněné nežádoucí účinky.8

F-hvězdičkový Therapeutics vyvíjí také FS120, bispecifické protilátky, které se zaměřuje na druhý kostimulační receptor 4-1BB (CD137), kromě OX40. Po slibných předklinických studiích, 9 F-star v lednu oznámila, že FDA přijala svou vyšetřovací novou aplikaci léků. Studie fáze 1 zvyšování dávky je plánována u pacientů s pokročilými malignitami, s očekávaným zařazením 70 pacientů.33

Shattuck Labs se snaží dosáhnout účinku podobného těmto bispecifickým protilátkám prostřednictvím jiného designu léku. Použili svou agonistickou přesměrovanou kontrolní platformu k vytvoření SL-279252, bifunkčního fúzního proteinu, který se skládá z extracelulárních domén OX40L a PD-1 Spojených centrální Fc doménou.34 probíhá první klinické hodnocení u člověka (NCT03894618).

OX40L Genové Terapie

Nukleové kyseliny–založené drogy příslibem pro genovou terapii, a může být použit k vyvolání nádorové buňky vyjádřit OX40L. Tyto léky představují výzvu, protože nahý genetický materiál je náchylné k degradaci v oběhu, ale lipidů, založené na dopravci nabídnout možný způsob, jak tento problém vyřešit.35

Moderna Therapeutics vyvíjí 2 messenger RNA (mRNA)-založené drogy, mRNA-2416 a mRNA-2752, oba se skládá z lipidové nanočástice zapouzdření syntetické mRNA kódující OX40L. mRNA-2752 také obsahuje mRNAs kódování prozánětlivých cytokinů IL-23 a IL-36γ.

na schůzkách ASCO a AACR byly zdůrazněny výsledky probíhajících studií obou léčiv u člověka. mRNA-2416 se hodnotí samostatně a v kombinaci s durvalumabem (Imfinzi) u pacientů s pokročilými solidními nádory nebo lymfomy (NCT03323398). Byly prezentovány výsledky z monoterapeutického ramene; v listopadu 2019, 39 pacientů se solidními nádory byly léčeny mRNA-2416 podáván intratumorally každé 2 týdny po dobu až 12 dávek ve 4 dávkách (1, 2, 4 a 8 mg). Nejlepší celková odpověď byla SD u 14 pacientů, včetně 4 ze 6 pacientů s karcinomem vaječníků. SD trvala nejméně 14 týdnů u 6 pacientů. Smrštění nádoru bylo pozorováno u 7 pacientů, z nichž 2 měli smrštění pouze u injekčních lézí, 3 pouze u neinfikovaných lézí a 2 u obou typů lézí.

nebyly zjištěny žádné DLT a většina trae byla stupně 1 nebo 2, nejčastěji únava a reakce související s injekcí. Kombinace mRNA-2416 a durvalumab je hodnocen ve studii probíhající části B, která zahrnuje dávky-rozšiřující část se zaměřením na karcinom vaječníků.6.

V samostatné studii (NCT03739931), intratumorally podáván mRNA-2752 je také hodnocena jako monoterapii (rameno) a v kombinaci s durvalumab (rameno B) u pacientů s pokročilým solidní malignity nebo lymfomy. Pacienti dostávají stupňující se dávku mRNA-2752 (0.25-8 mg) a fixní 1500 mg dávky durvalumabu. V dubnu roku 2020, 17 pacientů v rameni A a 12 pacientů v rameni B byla hodnocena bezpečnost, a 15 pacientů v rameni A a 8 v arm B bylo možné hodnotit účinnost.

v rameni a mělo 5 pacientů SD jako nejlepší odpověď; nicméně v rameni B měl 1 pacient s PD-L1–nízkým dlaždicovým karcinomem močového měchýře PR a 4 pacienti dosáhli SD. Smrštění nádoru bylo pozorováno jak u injekčních, tak u neinjektovaných lézí v obou ramenech studie. TRAEs, které byly převážně stupně 1 nebo 2, nejčastěji zahrnovaly erytém v místě vpichu, bolest v místě vpichu a pyrexii. Pět pacientů v rameni a prodělalo trae stupně 3, ale žádné trae stupně 3 se nevyskytly v rameni B.7

1. Ribas a, Wolchok JD. Imunoterapie rakoviny pomocí blokády kontrolního bodu. Věda. 2018;359(6382):1350-1355. doi: 10.1126 / věda.aar4060
2. Hahn AW, Gill DM, Pal SK, Agarwal N. budoucnost léčby rakoviny imunitního kontrolního bodu po PD-1 a CTLA-4. Imunoterapie. 2017;9(8):681-692. doi: 10.2217 / imt-2017-0024
3. Qin S, Xu L, Yi M, Yu S, Wu K, Luo s. nové cíle imunitního kontrolního bodu: pohybující se za PD-1 a CTLA-4. Rakovina Mol. 2019;18(1):155. doi: 10.1186/12943-019-1091-2
4. Mayes PA, Hance KW, Hoos a. příslib a výzvy vývoje imunitních agonistických protilátek u rakoviny. Nat Rev Drug Discov. 2018;17(7):509-527. doi: 10.1038 / nrd.2018.75
5. Garber k. imunitní agonistické protilátky čelí kritickému testu. Nat Rev Drug Discov. 2019;19(1):3-5. doi: 10.1038 / d41573-019-00214-5
6. Jimeno A, Gupta S, Sullivan R, et al. Fáze 1/2, otevřené, multicentrické, zvyšování dávky a účinnost studie mRNA-2416, lipidové nanočástice zapouzdřeny mRNA kódující lidský OX40L, pro intratumorózní injekce sama nebo v kombinaci s durvalumab u pacientů s pokročilou formou nádorového onemocnění. Příspěvek prezentovaný na: virtuální výroční setkání Americké asociace pro výzkum rakoviny I; duben 27-28, 2020.
7. Patel MR, Bauer TM, Jimeno A, et al. Studie fáze I mRNA-2752, lipidové nanočástice zapouzdřující mRNA kódující lidské OX40L, IL-23 a IL-36γ, pro intratumorální (iTu) injekci samotnou a v kombinaci s durvalumabem. J Clin Oncol. 2020; 38 (15): 3092. doi: 10.1200 / JCO.2020.38.15_suppl.3092
8. Yachnin J, Ullenhag GJ, Carneiro A, et al. První studie fáze i u lidí u pacientů s pokročilými a / nebo refrakterními solidními malignitami k vyhodnocení bezpečnosti ator-1015, BISPECIFICKÉ protilátky CTLA-4 x OX40. J Clin Oncol. 2020; 38 (15): 3061. doi: 10.1200 / JCO.2020.38.15_suppl.3061
9. Alves Costa Silva C, Facchinetti F, Routy B, Derosa L. nové cesty v imunitní stimulaci: cílení OX40. ESMO otevřeno. 2020; 5(1): e000573. doi: 10.1136 / esmoopen-2019-000573
10. Fu Y, Lin Q, Zhang Z, Zhang L. Terapeutické strategie pro kostimulační molekulu OX40 v imunitě zprostředkované T-buňkami. Acta Pharm Sin B. 2020; 10 (3): 414-433. doi: 10.1016 / j. apsb.2019.08.010
11. Buchan SL, Rogel, Al-Shamkhani A. immunobiology CD27 a OX40 a jejich potenciál jako cíle pro imunoterapii rakoviny. Krev. 2018;131(1):39-48. doi: 10.1182 / krev-2017-07-741025
12. Ward-Kavanagh LK, Lin WW, Šedý JR, Ware CF. Nadrodina receptoru TNF v kostimulačních a coinhibitorových reakcích. Imunita. 2016;44(5):1005-1019. doi: 10.1016 / j. immuni.2016.04.019
13. Sturgill ER, Redmond WL. Tnfr agonisté: přehled současných biologů zaměřených na OX40, 4-1BB, CD27 a GITR. Am J Hematol Oncol. 2017;13(11)4-15.
14. Croft M, Salek-Ardakani S, Píseň J, T, Bansal-Pakala P. Regulace T-buněčné imunity OX40 a OX40L. Madame Lék Bioscience Databáze. Landes Bioscience; 2013. Přístup K 26. Červnu 2020. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK5990/
15. Linch SN, McNamara MJ, Redmond WL. OX40 agonisté a kombinovaná imunoterapie: uvedení pedálu na kov. Přední Onkol. 2015;5:34. doi: 10.3389 / fonc.2015.00034
16. Jensen SM, Maston LD, Gough MJ, et al. Signalizace prostřednictvím OX40 zvyšuje protinádorovou imunitu. Semin Onkol. 2010;37(5):524-532. doi: 10.1053 / j. seminonkol.2010.09.013
17. Aspeslagh S, Postel-Vinay S, Rusakiewicz S, Soria JC, Zitvogel L, Marabelle a. Důvody pro anti-OX40 imunoterapie rakoviny. Eur J Rakovina. 2016;52:50-66. doi: 10.1016 / j. ejca.2015.08.021
18. Oberst MD, Augé C, Morris C, et al. Silná imunitní modulace MEDI6383, upravený lidský ox40 ligand IgG4P Fc fúzní protein. Mol Rakovina Ther. 2018;17(5):1024-1038. doi: 10.1158 / 1535-7163.MCT-17-0200
19. Adams b. Aktualizováno: Q2 clear-out vidí AstraZeneca skládku rakoviny žaludku, Nash PhIII studie. Divoká Biotechnologie. 28. července 2016. Přístup 3. Srpna 2020. https://bit.ly/39Ww6pV
20. Curti BD, Kovacsovics-Bankowski M, Morris N, et al. OX40 je silným imunitně stimulujícím cílem u pacientů s rakovinou v pozdním stádiu. Rakovina Res. 2013; 73 (24): 7189-7198. doi: 10.1158 / 0008-5472.CAN-12-4174
21. Glisson BS, Leidner R, Ferris RL, et al. Studie fáze 1 MEDI0562, humanizované monoklonální protilátky agonisty OX40 (mAb), u dospělých pacientů (pts) s pokročilými solidními nádory. Ann Oncol. 2016; 27 (suppl 6): vi361. doi: 10.1093/annonc / mdw378.07
22. Hansen AR, Infante JR, McArthur G, et al. Studie eskalace dávky první v lidské fázi I agonisty OX40 MOXR0916 u pacientů s refrakterními solidními nádory. Cancer Res.2016;76(suppl 14; abstr CT097). doi: 10.1158 / 1538-7445. AM2016-CT097
23. El-Khoueiry AB, Spano JP, Angevin E, et al. Analýza OX40 agonistické protilátky (PF-04518600) u pacientů s hepatocelulárním karcinomem. J Clin Oncol. 2020; 38 (4): 523. doi: 10.1200 / JCO.2020.38.4_suppl.523
24. Infante JR, Hansen AR, Pishvaian MJ, et al. Studie zvyšování dávky fáze Ib agonisty OX40 MOXR0916 a inhibitoru PD-L1 atezolizumabu u pacientů s pokročilými solidními nádory. J Clin Oncol. 2016; 34 (15): 101. doi: 10.1200 / JCO.2016.34.15_suppl.101
25. Hamid O, Ros W, Thompson JA, et al. Bezpečnost, farmakokinetiku (PK) a farmakodynamiku (PD) data z fáze I s eskalací dávek studium OX40 agonistické monoklonální protilátka (mAb) PF-04518600 (PF-8600) v kombinaci s utomilumab, 4-1BB agonistické mAb. Ann Oncol. 2017; 28 (suppl 5): v406. doi: 10.1093 / annonc / mdx376.008
26. Pfizer pipeline. Pfizeru. 29. října 2019. Přístup K 22. Červnu 2020. https://pfe-pfizercom-prod.s3.amazonaws.com/product-pipeline/Pipeline_Update_29OCT2019_Final.pdf
27. Chen X, Song X, Li K, Zhang T. fcyr-vazba je důležitým funkčním atributem pro imunitní kontrolní protilátky v imunoterapii rakoviny. Přední Imunol. 2019;10:292. doi: 10.3389 / fimmu.2019.00292
28. platformy. Inhibrx. Přístup K 28. Červnu 2020. https://inhibrx.com/platforms/
29. Messenheimer DJ, Jensen SM, Afentoulis ME, et al. Načasování blokády PD-1 je rozhodující pro účinnou kombinovanou imunoterapii s anti-OX40. Clin Cancer Res. 2017; 23 (20): 6165-6177. doi: 10.1158 / 1078-0432.CCR-16-2677
30. Guo Z, Wang X, Cheng D, Xia Z, Luan M, Zhang S. PD-1 blokáda a OX40 spouštění synergicky chrání proti růstu nádoru v myším modelu rakoviny vaječníků. PLoS Jedna. 2014;9(2):389350. doi: 10.1371 / deník.pone.0089350. Publikovaná oprava se objeví v PLoS One. 2017; 12 (10): e0186965.
31. Postel-Vinay S, Lam VK, Ros W, et al. První studie fáze i u člověka agonisty OX40 GSK3174998 (GSK998) + / – pembrolizumab u pacientů (Pts) s vybranými pokročilými solidními nádory (ENGAGE-1). Příspěvek prezentovaný na: American Association for Cancer Research Virtual Annual Meeting I; April 27-28, 2020.
32. INBRX-106. Inhibrx. Accessed June 22, 2020. https://inhibrx.com/programs/multivaleant-therapeutics/inbrx-106/
33. F-star Therapeutics announces FDA acceptance of IND application for FS120. News release. F-star Therapeutics Ltd. January 30, 2020. Accessed June 25, 2020. http://www.f-star.com/media/92860/FDA-Acceptance-of-IND-Application-for-FS120_FINAL-002-.pdf
34. Pipeline. SL-279252. PD1-Fc-OX40L. Shattuck Labs. Accessed August 3, 2020. https://www.shattucklabs.com/pipeline/sl-279252-pd1-fc-ox40l/
35. Barba AA, Bochicchio S, Dalmoro A, Lamberti G. Lipid delivery systems for nucleic-acid-based-drugs: od výroby až po klinické aplikace. Farmacie. 2019;11(8):360. doi: 10.3390 / pharmaceutics11080360