Picardo hizo su debut cinematográfico como Eddie Quist, el hombre lobo asesino en serie en la película de Joe Dante The Howling (1981). También tuvo un papel recurrente en la comedia Alice e interpretó a un médico en un episodio de The Golden Girls. Interpretó varios papeles en la película de ciencia ficción familiar de Dante Explorers (1985), y más tarde apareció en The ‘Burbs de Dante, Looney Tunes: Back in Action, Matinee, Gremlins 2: The New Batch, Small Soldiers e Innerspace. Picardo a menudo interpreta papeles debajo de capas de látex protésico, también ha interpretado a Meg Mucklebones, que habita en el pantano, en la película Legend de Ridley Scott. También tuvo un pequeño papel como director de funerarias en Amazon Women on the Moon de John Landis. Hace la voz de Pfish en dos cortos de Chip Pfish & como se ve en What-A-Cartoon de Cartoon Network! Mostrar. Picardo también retrata la voz y la cara del robot Johnny Cab en Total Recall. Apareció en un episodio de ER en 1995 como Abraham Zimble (Temporada 2-Episodio 6, «Days Like This»).

En 1993, Picardo tuvo un breve papel como Joe «The Meat Man» Morton, un carnicero y vecino del personaje de Tim Allen en la sitcom Home Improvement.

En 2001, fue estrella invitada en el episodio de 7 Días «Revelation», pretendiendo ser un viajero del tiempo de siete años en el futuro.

En 2007, interpretó al Director White en Ben 10: Race Against Time. En 2007, protagonizó la película independiente del director Russ Emanuel, P. J., junto a John Heard y Vincent Pastore. También protagonizó Chasing the Green de Russ Emanuel en 2008, con William Devane, Jeremy London y Ryan Hurst.

Picardo apareció en Kojak en un episodio de 1977, E-Ring, como representante de medios en el Pentágono, como padre enfurecido en Cold Case y como oficial de policía en CSI: NY. Fue una estrella invitada recurrente en dos episodios de la temporada 7 de Smallville.

Lejos de actuar, de 1999 a 2015, Picardo fue miembro del Consejo Asesor de la Junta Directiva de la Sociedad Planetaria; a partir de 2015, fue elegido miembro de la propia Junta Directiva.

Otros aspectos destacados de su carrera incluyen actuar en la Misa de Leonard Bernstein durante su gira de debut en Europa, actuar con la Sociedad de Orfeo de la Universidad de Yale & Grupo de canto a capella de Bacchus como estudiante, y aparecer en docenas de otros papeles de televisión y cine, incluida la película Nuestros últimos días como niños.

Picardo interpretó la voz de Loki en el videojuego de Xbox 360 Too Human. En 2009, también apareció en Pushing Daisies, Chuck and Castle. También en 2009, interpretó el papel principal en la película de suspenso psicológico independiente Sensored. En 2010, Picardo tuvo un cameo en el episodio final de Persons Unknown, como miembro de la junta de gobierno de «the program». Picardo también hace la voz de Robert McNamara en Call of Duty: Black Ops en campaign y en el ‘modo Zombi’ después de completar la campaña en el mapa one, «FIVE». Picardo apareció en cuatro episodios de The Mentalist de 2012 a 2013 como Jason Cooper, un teniente del líder de culto Bret Styles.

Picardo también apareció en un episodio de la temporada 6 de Supernatural titulado «Clap Your Hands if You Believe», como un duende.

En mayo de 2014, Cartoon Hangover anunció a Picardo como actor de voz invitado en la segunda temporada de Bravest Warriors, en el episodio «The Parasox Pub».

En 2017, Picardo interpretó al padre del Teniente Kitan en el primer episodio de la temporada de The Orville titulado «Firestorm», y repitió el papel en el episodio de 2019 «Home».

Picardo apareció como él mismo en un episodio de Schooled.

Star TrekEdit

De 1995 a 2001, interpretó el papel del Holograma Médico de Emergencia (EMH) en la serie de televisión Star Trek: Voyager. Antes de ser aceptado para este papel, Picardo inicialmente audicionó para el papel de Neelix. Más tarde también dirigió dos episodios.

Interpretó copias adicionales del papel de la EMH en la película de 1996 Star Trek: First Contact y en el episodio de 1997 Star Trek: Deep Space Nine » Doctor Bashir, I Presume? También interpretó al Dr. Lewis Zimmerman, el creador de la EMH, en episodios de Deep Space Nine y Voyager.

En 2002, Picardo escribió El Manual del Holograma, publicado por Pocket Books.

En 2007 y 2008, Star Trek: The Music fue una gira por varias ciudades con John de Lancie. Picardo y de Lancie narraron en torno a la actuación orquestal, explicando la historia de la música en Star Trek.

En 2015, Picardo repitió el papel del Dr. Lewis Zimmerman en el episodio piloto de la serie de fans Star Trek: Renegades.

Stargateeditar

En 2004, comenzó a desempeñar el papel recurrente de Richard Woolsey, miembro de International Oversight Advisory (IOA), tanto en Stargate SG-1 como en Stargate Atlantis. Su primera aparición en esa serie fue en el episodio de Stargate SG-1 «Heroes (Part 2)».

El 5 de febrero de 2008, se anunció que Picardo se uniría al elenco regular de Stargate Atlantis a tiempo completo para la quinta y última temporada de la serie. Asumió el papel de comandante de misión de la Expedición Atlantis.