Picardo a fait ses débuts au long métrage en tant qu’Eddie Quist, le tueur en série loup-garou dans le film de Joe Dante The Howling (1981). Il a également eu un rôle récurrent dans la sitcom Alice et a joué un médecin dans un épisode des Golden Girls. Il a joué un certain nombre de rôles dans le film de science-fiction familial de Dante, Explorers (1985), et est apparu plus tard dans Les Burbs de Dante, Looney Tunes: Retour en action, Matinée, Gremlins 2: Le Nouveau lot, Petits soldats et Innerspace. Picardo joue souvent des rôles sous des couches de latex prothétique, ayant également joué le rôle de Meg Mucklebones dans le film Legend de Ridley Scott. Il a également eu un petit rôle en tant que directeur de funérailles dans Amazon Women on the Moon de John Landis. Il fait la voix de Pfish dans deux shorts de puce de Pfish & comme on le voit sur What-A-Cartoon de Cartoon Network! Montrer. Picardo dépeint également la voix et le visage du robot Johnny Cab dans Total Recall. Il est apparu dans un épisode de ER en 1995 sous le nom d’Abraham Zimble (Saison 2 – Épisode 6, « Des jours comme ça »).

En 1993, Picardo a eu un bref rôle de Joe « The Meat Man » Morton, un boucher et voisin du personnage de Tim Allen dans la sitcom Home Improvement.

En 2001, il a joué dans l’épisode de 7 jours « Revelation », prétendant être un voyageur temporel de sept ans dans le futur.

En 2007, il a joué le rôle principal White dans Ben 10: Course contre la montre. En 2007, il joue dans le long métrage indépendant du réalisateur Russ Emanuel, P.J., aux côtés de John Heard et Vincent Pastore. Il a également joué dans Chasing the Green de Russ Emanuel en 2008, avec William Devane, Jeremy London et Ryan Hurst.

Picardo est apparu sur Kojak dans un épisode de 1977, E-Ring, en tant que représentant des médias au Pentagone, en tant que père enragé dans Cold Case et en tant qu’officier de police dans CSI: NY. Il était une guest star récurrente dans deux épisodes de la saison 7 de Smallville.

Loin d’agir, de 1999 à 2015, Picardo a été membre du Conseil Consultatif du Conseil d’administration de la Planetary Society; à partir de 2015, il a été élu au Conseil d’administration lui-même.

Parmi les autres temps forts de sa carrière, citons la messe de Leonard Bernstein lors de sa première tournée européenne, la performance avec la Yale University Society of Orpheus&Groupe de chant a cappella Bacchus en tant que premier cycle, et des dizaines d’autres rôles à la télévision et au cinéma, y compris le film Our Last Days as Children.

Picardo a interprété la voix de Loki dans le jeu vidéo Too Human sur Xbox 360. En 2009, il est également apparu dans Pushing Daisies, Chuck et Castle. Toujours en 2009, il a joué le rôle principal dans le film de thriller psychologique indépendant Sensored. En 2010, Picardo a fait un caméo dans le dernier épisode de Persons Unknown, en tant que membre du conseil d’administration de « the program ». Picardo fait également la voix de Robert McNamara dans Call of Duty: Black Ops en campagne et dans le « mode Zombie » après avoir terminé la campagne sur la carte one, « FIVE ». Picardo est apparu dans quatre épisodes de The Mentalist de 2012 à 2013 dans le rôle de Jason Cooper, un lieutenant du leader de la secte Bret Styles.

Picardo est également apparu dans un épisode de la saison 6 de Supernatural intitulé « Clap Your Hands if You Believe », en tant que lutin.

En mai 2014, Cartoon Hangover annonce Picardo comme acteur de doublage invité dans la deuxième saison de Bravest Warriors, dans l’épisode « The Parasox Pub ».

En 2017, Picardo a joué le père du lieutenant Kitan dans l’épisode de la première saison de The Orville intitulé « Firestorm », et a repris le rôle dans l’épisode de 2019 « Home ».

Picardo est apparu comme lui-même dans un épisode de Schooled.

Star TrekEdit

De 1995 à 2001, il a joué le rôle de l’Hologramme Médical d’urgence (EMH) dans la série télévisée Star Trek: Voyager. Avant d’être accepté pour ce rôle, Picardo a d’abord auditionné pour le rôle de Neelix. Plus tard, il a également réalisé deux épisodes.

Il a joué des copies supplémentaires du rôle de l’EMH dans le film Star Trek: Premier Contact de 1996 et l’épisode Star Trek: Deep Space Nine de 1997 « Docteur Bashir, je suppose? »Il a également joué le Dr Lewis Zimmerman, le créateur de l’EMH, dans des épisodes de Deep Space Nine et Voyager.

En 2002, Picardo est l’auteur du Manuel de l’hologramme, publié par Pocket Books.

En 2007 et 2008, Star Trek: The Music était une tournée dans plusieurs villes avec John de Lancie. Picardo et de Lancie ont raconté la performance orchestrale, expliquant l’histoire de la musique dans Star Trek.

En 2015, Picardo reprend le rôle du Dr Lewis Zimmerman dans l’épisode pilote de la série de fans Star Trek: Renegades.

StargateEdit

En 2004, il a commencé à jouer le rôle récurrent de Richard Woolsey, membre de l’International Oversight Advisory (IOA), dans Stargate SG-1 et Stargate Atlantis. Sa première apparition dans ces séries était dans l’épisode Stargate SG-1 « Heroes (Part 2) ».

Le 5 février 2008, il a été annoncé que Picardo rejoindrait la distribution régulière de Stargate Atlantis à temps plein pour la cinquième et dernière saison de la série. Il a assumé le rôle de commandant de mission de l’expédition Atlantis.